JoVE Educación científica
Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
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JoVE Educación científica Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
Gel Purification
  • 00:00Descripción
  • 00:39Gel Purification: Basic Principles
  • 01:51The Gel Purification Procedure
  • 04:51Application
  • 06:04Summary

Purificación del gel

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Descripción

Purificación del gel se utiliza para recuperar los fragmentos de ADN después de la separación electroforética. Recuperación de ADN de un gel de agarosa incluye tres pasos básicos: encuadernación, lavado y liberador de una columna de sílice. ADN se cree que se unen a la sílice en presencia de sal alta a través de un puente de sal. Siguiendo el enlace, ADN es lavado de impurezas y eluyen condiciones bajo sal interrumpir esta interacción.

Este video va a través de un procedimiento generalizado, paso a paso de cortar una banda de gel, gel de solubilización, purificación mediante el enlace a una columna de sílice y la elución de DNA purificado. Además, la presentación discute varios consejos para asegurar la purificación del gel de éxito, incluyendo la importancia de correr un gel de agarosa con un marcador o una escalera que tiene ADN de tamaño conocido.

Procedimiento

Gel-purificación es un procedimiento estándar para recuperar deseados fragmentos de ADN de geles de agarosa después de la separación electroforética. Después de disolver el fragmento de gel y ejecutar a través de un filtro especializado, este procedimiento produce ADN liberado de impurezas tales como sales, nucleótidos libres y las enzimas, convenientes para los usos aguas abajo. El principio básico detrás de recuperación de la DNA del gel de agarosa consiste en una…

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Gel Purification. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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