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靶向半胱氨酸硫用于体外重组蛋白的特异糖基化

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Targeting Cysteine Thiols for in Vitro Site-specific Glycosylation of Recombinant Proteins

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靶向半胱氨酸硫用于体外重组蛋白的特异糖基化

DOI:

10.3791/56302-v

•

11:25 min

•

October 04, 2017

•

Yoo Jung Choi*¹, Jinhui Zhu*¹, Steve Chung*¹, Naveed Siddiqui*¹, Qingping Feng, Peter B. Stathopulos

¹Department of Physiology and Pharmacology, Schulich School of Medicine and Dentistry,University of Western Ontario

Capítulos

00:05Título
01:09Polymerase Chain Reaction (PCR)-mediated Site-directed Mutagenesis
03:44Uniform ¹⁵N-labeled Protein Expression in BL21 ΔE3 E. coli
05:24Purification of Recombinant Protein from E. coli
07:50Chemical Attachment of Glucose-5-MTS to Protein by Dialysis
08:48Results: Site-selective Cys Mutation Followed by In Vitro Glycosylation in STIM1 EF-SAM Protein
10:11Conclusion

Summary

Traducción Automática

糖化蛋白的生物化学和结构分析需要相对较大数量的均质样品。在这里, 我们提出了一种有效的化学方法的 site-specific 糖基化的重组蛋白纯化细菌的靶向活性胱氨酸硫。

Tags

Keywords: Cysteine Thiols Site-specific Glycosylation Recombinant Proteins Structural Biology Glycosylation Patterns Disease Therapy PCR Mutagenesis DPN1 Digestion Protein Expression

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