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Dirigida a tioles de la cisteína para in Vitro específica glicosilación de proteínas recombinantes
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Capítulos
- 00:05Título
- 01:09Polymerase Chain Reaction (PCR)-mediated Site-directed Mutagenesis
- 03:44Uniform 15N-labeled Protein Expression in BL21 ΔE3 E. coli
- 05:24Purification of Recombinant Protein from E. coli
- 07:50Chemical Attachment of Glucose-5-MTS to Protein by Dialysis
- 08:48Results: Site-selective Cys Mutation Followed by In Vitro Glycosylation in STIM1 EF-SAM Protein
- 10:11Conclusion
Análisis bioquímicos y estructurales de proteínas glicosiladas requieren cantidades relativamente grandes de muestras homogéneas. Aquí, presentamos un método químico eficiente para el glycosylation sitio-específico de proteínas recombinantes purificados de bacterias dirigiéndose a tioles reactivos de Cys.
