غرس Ferumoxides إعتبر الإنسان الخلايا الجذعية الوسيطة في عيوب الغضروف
Summary
الهدف من العرض هو لاظهار طريقة استنساخه للغاية لتوليد مصفوفة الخلايا الجذعية يزرع في العيوب المرتبطة الغضروف ، والتي يمكن تصور مع التصوير بالرنين المغناطيسي. وصفت الخلايا الجذعية مع ادارة الاغذية والعقاقير التي وافق عليها Ferumoxides ، مختلطة مع agarose ، مزروع في عيوب الغضروف وتصويرها مع ماسح ضوئي 7T MR.
Abstract
مجال هندسة الأنسجة يدمج مبادئ علم الأحياء الهندسة الخلية ، والدواء نحو تجديد الخلايا والأنسجة وظيفية محددة. مصفوفة زرع الخلايا الجذعية المرتبطة به (مازي) تهدف إلى تجديد عيوب الغضروف بسبب الاصابة بالتهاب المفاصل المشتركة أو الصدمة. الكبار الخلايا الجذعية الوسيطة (MSCS) لديها القدرة على التمايز إلى خلايا النسب مكون للغضروف وأظهرت نتائج واعدة لخلية تكنولوجيات إصلاح الغضروف المفصلي. ويمكن توسيع نطاق ذاتي يمكن عزل اللجان الدائمة من مجموعة متنوعة من الأنسجة ، في ثقافات الخلية دون أن تفقد قدرتها التمايز ، وبرهنت تمايز مكون للغضروف في المختبر والمجراة في 1 و 2.
من أجل توفير الاحتفاظ المحلية وصلاحية اللجان الدائمة زرع غضروف في العيوب ، لا بد من السقالة ، والذي يدعم أيضا تمايز اللاحقة والانتشار. بنية النسيج سقالة تشكيل دلائل وتصاريح المصفوفة خارج الخلية ، التي تنتجها الخلايا الجذعية ، للتوسع. وقد أظهرت التحقيقات السابقة بأن 2 ٪ agarose سقالة قد دعم تنمية مستقرة وغضروف زجاجي لا تحفز الاستجابات المناعية 3.
الاحتفاظ على المدى الطويل من الخلايا الجذعية المزروعة في مازي أمر حاسم بالنسبة لتجديد الغضاريف. وسم اللجان الدائمة مع جزيئات أكسيد الحديد يسمح على المدى الطويل في تتبع المجراة مع المنظمات غير الغازية تقنيات التصوير بالرنين المغناطيسي 4.
وهذا العرض شرح التقنيات لوضع العلامات اللجان الدائمة مع جزيئات أكسيد الحديد ، وتوليد خلايا agarose يبني وغرس هذه التركيبات في عيوب الغضروف. ويمكن تتبع يبني المسمى غير جراحية مع MR – التصوير.
Protocol
Discussion
وصف بروتوكول يوفر وسيلة لتسمية اللجان الدائمة للتكرار مع جزيئات أكسيد الحديد وزرع هذه اللجان الدائمة في المسمى عيوب الغضروف. هذا الأسلوب يسمح غير الغازية تصوير زرع الخلايا الجذعية في عيوب الغضروف مع التصوير بالرنين المغناطيسي ، والذي يسمح للكشف المبكر عن الفشل ماز?…
Acknowledgements
وأيد هذا العمل من خلال منحة من المعهد الوطني لالتهاب المفاصل والأمراض الجلدية العظام والعضلات ، NIH RO1AR054458.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| D-MEM High Glucose | Reagent | Sigma | D5648 | |
| PBS (Ca++, Mg++ free) | GIBCO | 14190-144 | ||
| Trypsin-EDTA 0.05% | Invitrogen | 25399-120 | ||
| FBS | Hyclone | SH30071.03 | ||
| Penicillin/Streptomycin | GIBCO | 15140-122 | ||
| Ferumoxides (Endorem) | Guerbet | |||
| Agarose Typ VII | Sigma | A9045 | Dilute Agarose in PBS to final concentration of 4% |
References
- Mauck, R. L., Yuan, X., Tuan, R. S. Chondrogenic differentiation and functional maturation of bovine mesenchymal stem cells in long-term agarose culture. Osteoarthritis Cartilage. 14, 179-189 (2006).
- Pittenger, M. F. Multilineage potential of adult human mesenchymal stem cells. Science. 284, 143-147 (1999).
- Rahfoth, B. Transplantation of allograft chondrocytes embedded in agarose gel into cartilage defects of rabbits. Osteoarthritis Cartilage. 6, 50-65 (1998).
- Henning, T. D., Boddington, S., Daldrup-Link, H. E. Labeling hESCs and hMSCs with iron oxide nanoparticles for non-invasive in vivo tracking with MR imaging. J Vis Exp. , (2008).
