Ferumoxides植入人类间质干细胞在软骨缺损的标记
Summary
演示的目的是展示一个高度重复性的方法来生成矩阵相关联的干细胞植入软骨缺损，可与磁共振成像的可视化。干细胞标记与美国FDA批准的Ferumoxides用琼脂糖混合，植入软骨缺损，并与7T磁共振扫描仪成像。
Abstract
组织工程领域的集成工程，细胞生物学和医学对特定的细胞和组织功能再生的原则。矩阵相关的干细胞植入（MASI）的目标是再生软骨缺损，因关节炎或外伤关节损伤。成人间质干细胞（MSCs）分化为软骨细胞谱系细胞的能力，并已显示出可喜的成果细胞为基础的关节软骨修复技术。自体干细胞可以从各种组织中分离，在细胞培养，可以扩大，而不会失去它们的分化潜能，并表现出软骨细胞分化，在 体外和体内的1，2。
为了提供地方留成和软骨缺损移植干细胞的可行性，脚手架是必要的，这也支持了随后的分化和增殖。脚手架指导组织形成的架构，允许细胞外基质，由干细胞产生，扩大。以前的调查表明，2％琼脂糖支架可以支持稳定的透明软骨的发展并不会诱发免疫反应的3。
MASI移植的干细胞的长期保存是软骨再生的关键。氧化铁纳米粒子标记的MSCs可在体内长期跟踪与非侵入性磁共振成像技术4。
本演示将展示标签MSCs的氧化铁纳米粒子，成软骨缺损的细胞琼脂糖结构和这些结构的植入代技术。标记的结构可以跟踪非侵入性磁共振成像。
Protocol
Discussion
所描述的协议提供了一个可重复的氧化铁纳米粒子标记的干细胞，这些标记的MSCs植入软骨缺损的方法。这种技术允许与磁共振成像，这使得MASI故障的早期检测软骨缺损的非侵入性干细胞移植的写照。一个错位或标记的细胞外排，可以诊断的基础上从MR图像的移植部位的标签消失。对这些事件的早期诊断是可取的，将防止不必要的替代侵入性诊断程序的病人。所述的非侵入性诊断MASI成果方法，可?…
Acknowledgements
这项工作是从国立关节炎和肌肉骨骼皮肤疾病，美国国立卫生研究院RO1AR054458赠款的支持。
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| D-MEM High Glucose | Reagent | Sigma | D5648 | |
| PBS (Ca++, Mg++ free) | GIBCO | 14190-144 | ||
| Trypsin-EDTA 0.05% | Invitrogen | 25399-120 | ||
| FBS | Hyclone | SH30071.03 | ||
| Penicillin/Streptomycin | GIBCO | 15140-122 | ||
| Ferumoxides (Endorem) | Guerbet | |||
| Agarose Typ VII | Sigma | A9045 | Dilute Agarose in PBS to final concentration of 4% |
References
- Mauck, R. L., Yuan, X., Tuan, R. S. Chondrogenic differentiation and functional maturation of bovine mesenchymal stem cells in long-term agarose culture. Osteoarthritis Cartilage. 14, 179-189 (2006).
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