筋肉の損傷のメカニズムの同定は非常に重要です。ここでは、ショウジョウバエの胸部筋肉のパラフィン包埋して凍結切片を調製するための組織学的手法を提示する。これは筋肉の形態やタンパク質と他の筋肉の細胞成分の局在の分析を行うことができます。
ヒトの筋ジストロフィーとミオパシーの分子特性は、筋肉の病気と筋肉の仕様の遺伝学的解析の複雑さを明らかにした、モデルシステムの形成と機能は、筋肉の生理学に貴重な洞察を提供しています。そのため、筋肉の損傷を根底にある分子機構を同定し、特徴付けることが重要です。成人ショウジョウバエマルチファイバーの筋肉の構造は、脊椎動物の横紋筋1とショウジョウバエの遺伝学的従順さがそれをジストロフィー筋の形態を分析し、加齢成人で筋肉機能に影響を与えるプロセスが2便を運行する航空会社の特性に優れたシステムをした似ている。ここでは、 ショウジョウバエの胸部筋肉のパラフィン包埋して凍結切片を調製するための組織学的手法を提示する。これらの製剤は、古典的な組織学的染色で染色し、タンパク質を検出する色素で標識する組織を可能にし、特に凍結切片はそのまま筋肉の蛋白質の免疫組織化学的検出に最適です。これは、筋肉組織の構造、形態学的欠陥の同定、および筋肉/ ショウジョウバエの成体の筋におけるニューロン特異的タンパク質の発現パターンの検出の解析が可能になります。これらの技術はまた、少し他の身体部分の切片用に変更することができます。
The authors have nothing to disclose.
私たちは、私たちはクライオミクロトームを使用できるようにするため教授Eicheleに感謝。作業は、マックスプランクGesselschaftによって賄われていた。
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
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Stainless steel collars | self-made | Specially constructed | ||
Forceps | Fine Science Tools GmbH | 11295-10 | ||
Aluminum foil | Any | |||
Blade or scalpel | Any | |||
Wheaton macro staining jar | Wheaton Science Products | 900200 | ||
Microtome | Carl Zeiss | Model: Hyrax M25 | ||
Cryo-microtome | Leica | Model CM3050S | ||
60-65°C Incubator | Any | Large enough to hold at least 4 staining jars | ||
Freezing cooler with metal block | Any | Store at -80°C | ||
Super-frost slides | Thermo Fisher Scientific | 9161155 | ||
Cover slips | Any | Recommend 24 X 40 mm | ||
Chloroform | Sigma-Aldrich | 288306 | Analytical grade | |
Glacial acetic acid | Merck | 100063 | Analytical grade | |
Ethanol | Merck | 100983 | Analytical grade | |
Methylbenzoate | Sigma-Aldrich | M29908-500G | Analytical grade | |
Paraplast plus | Sigma-Aldrich | 76258 | Paraffin | |
Tissue-Teck O.C.T. compound | Sakura | 4583 | ||
16% formaldehyde, methanol free | Polysciences | 18814 | ||
Glycerol | Sigma-Aldrich | G5150-1L |