نحن تصف طريقة لتحضير شرائح الحصين عضوي النمط التي يمكن تكييفها بسهولة إلى مناطق أخرى من الدماغ. وضعت شرائح الدماغ على الأغشية التي يسهل اختراقها وسائل الاعلام الثقافة يسمح له شكل واجهة. هذا الأسلوب يحافظ على بنية الإجمالي للقرن آمون لمدة تصل الى 2 أسابيع في الثقافة.
Abstract
قرن آمون ، وهو مكون من الجهاز الحوفي ، ويلعب دورا هاما في الذاكرة طويلة المدى والملاحة الفضائية 1. يمكن أن الخلايا العصبية الحصين تعديل قوام صلاتهم بعد فترات وجيزة من تفعيل قوي. ويمكن لهذه الظاهرة ، والمعروفة باسم بعيدة المدى (الكمونية) تستمر لساعات أو أيام ، وأصبحت آلية أفضل مرشح للتعلم والذاكرة 2. بالإضافة إلى ذلك ، بذلت التشريح محددة جيدا ، والتواصل بين الحصين 3 أنه نظام نموذجي لدراسة نقل الكلاسيكية متشابك ومتشابك 4 اللدونة.
كما فهمنا للعلم وظائف الأعضاء من نقاط الاشتباك العصبي الحصين نما وأصبح اللاعبون الجزيئية التي تم تحديدها ، وأصبح من الضروري التعامل مع البروتينات متشابك حتمية. ثقافات الحصين عضوي النمط توفر إمكانية للتلاعب الجيني سهلة ودقيقة ولكن التدخل الدوائي الحفاظ على منظمة متشابك التي تعتبر ضرورية لفهم وظيفة المشبك في سياق طبيعي أكثر من الأساليب الروتينية ثقافة فصل الخلايا العصبية.
هنا نقدم طريقة لتحضير شرائح الحصين والثقافة التي يمكن تكييفها بسهولة إلى مناطق أخرى من الدماغ. هذا الأسلوب يتيح سهولة الوصول إلى شرائح للتلاعب الجيني باستخدام أساليب مختلفة مثل العدوى الفيروسية أو 5،6 biolistics 7. بالإضافة ، يمكن استردادها بسهولة لشرائح فحوصات البيوكيميائية 8 ، أو نقلها إلى المجاهر التصوير 9 أو 10 تجارب الكهربية.
Protocol
1. قبل البدء في إعداد شرائح الحصين. إعداد تقطيع الأنسجة عن طريق وضع قطعة من ورقة تفلون وتصاعد شفرة جديدة. مسح نسيج الثقافة (TC) هود مع الايثانول 70 ٪ ومجموعة الداخل مجهر تشريح. تعقيم هود ، المجهر …
Discussion
ويستند هذا الأسلوب على طريقة وصف لأول مرة من قبل Stoppini آخرون(11) وتقدم على نحو سريع لشرائح ثقافة الحصين. الجانب الأكثر أهمية من هذا البروتوكول هو الحفاظ على شرائح معقمة ، وبالتالي من الأهمية بمكان استخدام تقنيات مناسبة ومعقمة بشكل صحيح لتطهير وتعقيم جميع ال?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
وقد تم تمويل هذا العمل من قبل NINDS — NIH R01NS060756