Summary

Modellazione emorragia intracerebrale in Mouse: iniezione di sangue autologo o collagenasi batterica

Published: September 22, 2012
doi:

Summary

Modelli animali clinicamente rilevanti di emorragia intracerebrale (ICH) sono necessari per ampliare la nostra conoscenza di ictus emorragico e di esaminare nuove strategie terapeutiche. In questo studio, abbiamo descrivere e valutare due modelli ICH che implementano iniezioni unilaterali di ciascuna sangue autologo intero o collagenasi batterica nel gangli della base (corpo striato) di topi.

Abstract

Spontanea emorragia intracerebrale (ICH) definisce una malattia potenzialmente pericolosa per la vita neurologica che rappresenta il 10-15% di tutti i ricoveri legati a ictus e per i quali non sono disponibili trattamenti efficaci ad oggi 1,2. A causa della eterogeneità delle ICH negli esseri umani, diversi modelli preclinici sono necessari per esplorare a fondo i potenziali strategie terapeutiche 3. ICH sperimentale è comunemente indotta in roditori da iniezione intraparenchimale sia di sangue autologo o collagenasi batterica 4. Il modello appropriato viene selezionato in base alla fisiopatologia di induzione emorragie e lesioni progressione. Il modello di iniezione sangue imita una emorragia rapida progressione. In alternativa, collagenasi batterica enzimaticamente sconvolge la lamina basale dei capillari cerebrali, causando un sanguinamento attivo che si evolve in genere per diverse ore 5. Risultante edema perihematomal e deficit neurofunzionali possono essere quantificati from entrambi i modelli. In questo studio abbiamo descritto e valutato un modello modificato doppia iniezione di sangue intero autologo 6 così come un modello ICH iniezione di collagenasi batterica 7, entrambi bersaglio gangli della base (corpo striato) di maschi topi CD-1. Abbiamo valutato deficit neurofunzionali ed edema cerebrale a 24 e 72 ore dopo l'induzione ICH. Intrastriatal iniezione di sangue autologo (30 microlitri) o collagenasi batterica (0.075U) causata riproducibili deficit neurofunzionali in topi e edema cerebrale significativamente aumentata a 24 e 72 ore dopo l'intervento (p <0,05). In conclusione, entrambi i modelli producono consistenti infarti emorragici e rappresentano metodi di base per la ricerca preclinica ICH.

Protocol

Tutte le procedure sono state effettuate in conformità con la Guida NIH per la cura ed uso di animali da laboratorio e approvato dalla cura degli animali e del Comitato uso della Loma Linda University. 1. Preparazioni prechirurgica Tecniche asettiche sono raccomandati per tutte le procedure chirurgiche. Disinfettare l'apparato stereotassico e preparare sterili strumenti chirurgici prima dell'intervento. Indossare dispositivi di protezione individu…

Discussion

Modelli animali di emorragia intracerebrale (ICH) contribuiscono notevolmente a una conoscenza avanzata della fisiopatologia della malattia, e sono comunemente utilizzati per sviluppare e valutare nuove strategie terapeutiche in un ambiente preclinica. Iniezioni intraparenchimali di sangue autologo o collagenasi batterica sono consolidati metodi per generare ICH nei roditori. Entrambi i metodi sono stati sviluppati inizialmente nel ratto, tuttavia, a causa della disponibilità rapida crescita di ceppi transgenici e knoc…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Questo studio è stato in parte sostenuto da NIH sovvenzione RO1NS053407 a JH Zhang. Vorremmo ringraziare il signor Damon Klebe per i suoi preziosi contributi.

Materials

Material Company Catalogue Number Comment
Stereotactic Head Frame Stoelting Co. 51600
Nanomite Syringe Pump Harvard Apparatus PY2 70-2217
Hamilton Syringe Hamilton Company 1725RN (250 μl)
1701 RN (10 μl)
26 Gauge needle for 250 μl and 10 μl syringes.
Microdrill Fine Science Tools 18000-17
Microdrill burr Fine Science Tools 19007-09 0.9 mm diameter
Collagenase Type VII-S Sigma-Aldrich C2399
Microhematocrit Capillary Tubes Fisher Scientific 22-362-574 unheparinized
Bone Wax Ethicon W31
Suture Ethicon 1676G
Ketamine JHP Pharmaceuticals 42023-115-10 Ketalar
Xylazine LLOYD Laboratories 139-236 AnaSed

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Citer Cet Article
Krafft, P. R., Rolland, W. B., Duris, K., Lekic, T., Campbell, A., Tang, J., Zhang, J. H. Modeling Intracerebral Hemorrhage in Mice: Injection of Autologous Blood or Bacterial Collagenase. J. Vis. Exp. (67), e4289, doi:10.3791/4289 (2012).

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