Farelerde Modelleme İntraserebral Kanama: Otolog Kan veya bakteriyel kollajenaz Enjeksiyon
Summary
Intraserebral kanama (İSK) ve Klinik ilgili hayvan modelleri hemorajik inme bilgimizi genişletmek ve yeni tedavi stratejileri incelemek gereklidir. Bu çalışmada, biz tanımlamak ve farelerin bazal ganglion (korpus striatum) içine otolog tam kan ya da bakteriyel kollajenaz ya tek taraflı enjeksiyon uygulamak iki ICH modelleri değerlendirir.
Abstract
Spontan intraserebral kanama (İSK) tüm inme ile ilişkili hastaneye yatışların% 10-15 ve hiçbir etkili tedavi 1,2 bugüne kadar mevcut olduğu için hesapları potansiyel olarak yaşamı tehdit eden nörolojik illet tanımlar. Çünkü insanlarda İSH heterojenliği, çeşitli preklinik modeller iyice 3 prospektif tedavi stratejileri keşfetmek için ihtiyaç vardır. Deneysel ICH yaygın otolog kan ya da bakteriyel ya da kollajenaz 4 arasında intraparenkimal enjeksiyon yoluyla kemirgenlerde meydana gelir. Uygun modeli kanama indüksiyon ve yaralanma ilerleme patofizyolojisi dayanarak seçilir. Kan enjeksiyon modeli bir hızla ilerleyen kanama taklit eder. Alternatif olarak, bakteriyel kollajenaz enzimatik genellikle birkaç saat içindeki 5 geliştikçe aktif kanama neden, beyin kılcal damarların bazal lamina bozar. Sonuç perihematomal ödem ve nöro açıkları fro ölçülebilirm modelleri hem. Bu çalışmada açıklanan ve otolog kan 6 modifiye edilmiş bir çift enjeksiyon modeli hem de bakteri kollajenaz 7'nin bir ICH enjeksiyon modeli, her ikisi de hedef erkek CD-1 mice ve bazal gangliyonlar (corpus striatum). Değerlendirildi Biz ICH indüksiyon sonrası nörofonksiyonel açıkları ve 24. beyin ödemi ve 72 saat değerlendirilmiştir. Otolog kan (30 ul) veya bakteriyel kollajenaz (0.075U) arasında intrastriatal enjeksiyonu farelerde tekrarlanabilir nörofonksiyonel açıkları ve ameliyat sonrası anlamlı artış beynin 24 ödem ve 72 saat (p <0.05) neden oldu. Sonuç olarak, her iki model de tutarlı hemorajik enfarkt verim ve preklinik ICH araştırma için temel yöntemlerini temsil eder.
Protocol
Discussion
Intraserebral kanama (İSK) hayvan modelleri hastalığın patofizyolojisinin anlaşılmasına büyük katkı, ve genellikle bir preklinik ortamda yeni tedavi stratejileri geliştirmek ve değerlendirmek için kullanılır. Otolog kan veya bakteriyel kollajenaz intraparankimal enjeksiyonları kemirgenlerde ICH oluşturmak için köklü yöntem vardır. Her iki yöntem başlangıçta sıçan geliştirilmiştir, ancak transgenik ve nakavt suşların hızla artan durumu nedeniyle, fareler daha hemorajik beyin yaralanması …
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Bu çalışma kısmen JH Zhang NIH hibe RO1NS053407 tarafından desteklenmiştir. Biz onun değerli katkıları için Sayın Damon Klebe teşekkür etmek istiyorum.
Materials
| Material | Company | Catalogue Number | Comment |
| Stereotactic Head Frame | Stoelting Co. | 51600 | |
| Nanomite Syringe Pump | Harvard Apparatus | PY2 70-2217 | |
| Hamilton Syringe | Hamilton Company | 1725RN (250 μl) 1701 RN (10 μl) |
26 Gauge needle for 250 μl and 10 μl syringes. |
| Microdrill | Fine Science Tools | 18000-17 | |
| Microdrill burr | Fine Science Tools | 19007-09 | 0.9 mm diameter |
| Collagenase Type VII-S | Sigma-Aldrich | C2399 | |
| Microhematocrit Capillary Tubes | Fisher Scientific | 22-362-574 | unheparinized |
| Bone Wax | Ethicon | W31 | |
| Suture | Ethicon | 1676G | |
| Ketamine | JHP Pharmaceuticals | 42023-115-10 | Ketalar |
| Xylazine | LLOYD Laboratories | 139-236 | AnaSed |
References
- Broderick, J. P. Guidelines for the management of spontaneous intracerebral hemorrhage: A statement for healthcare professionals from a special writing group of the Stroke Council, American Heart Association. Stroke. 30, 905-915 (1999).
- Qureshi, A. I., Mendelow, A. D., Hanley, D. F. Intracerebral haemorrhage. Lancet. 373, 1632-1644 (2009).
- MacLellan, C. L., Silasi, G., Auriat, A. M., Colbourne, F. Rodent models of intracerebral hemorrhage. Stroke. 41, 95-98 (2010).
- James, M. L., Warner, D. S., Laskowitz, D. T. Preclinical models of intracerebral hemorrhage: a translational perspective. Neurocrit Care. 9, 139-152 (2008).
- MacLellan, C. L. Intracerebral hemorrhage models in rat: comparing collagenase to blood infusion. J. Cereb. Blood Flow Metab. 28, 516-525 (2008).
- Belayev, L. Experimental intracerebral hemorrhage in the mouse: histological, behavioral, and hemodynamic characterization of a double-injection model. Stroke. 34, 2221-2227 (2003).
- Clark, W., Gunion-Rinker, L., Lessov, N., Hazel, K. Citicoline treatment for experimental intracerebral hemorrhage in mice. Stroke. 29, 2136-2140 (1998).
- Nakamura, T. Intracerebral hemorrhage in mice: model characterization and application for genetically modified mice. J. Cereb. Blood Flow Metab. 24, 487-494 (2004).
- Schallert, T. Behavioral tests for preclinical intervention assessment. NeuroRx. 3, 497-504 (2006).
- Hartman, R., Lekic, T., Rojas, H., Tang, J., Zhang, J. H. Assessing functional outcomes following intracerebral hemorrhage in rats. Brain Res. 1280, 148-157 (2009).
- Hua, Y. Behavioral tests after intracerebral hemorrhage in the rat. Stroke. 33, 2478-2484 (2002).
- Tang, J. Mmp-9 deficiency enhances collagenase-induced intracerebral hemorrhage and brain injury in mutant mice. J. Cereb. Blood Flow Metab. 24, 1133-1145 (2004).
- Ma, Q. Vascular adhesion protein-1 inhibition provides antiinflammatory protection after an intracerebral hemorrhagic stroke in mice. J. Cereb. Blood Flow Metab. , (2010).
- Bullock, R., Mendelow, A. D., Teasdale, G. M., Graham, D. I. Intracranial haemorrhage induced at arterial pressure in the rat. Part 1: Description of technique, ICP changes and neuropathological findings. Neurol Res. 6, 184-188 (1984).
- Yang, G. Y., Betz, A. L., Chenevert, T. L., Brunberg, J. A., Hoff, J. T. Experimental intracerebral hemorrhage: relationship between brain edema, blood flow, and blood-brain barrier permeability in rats. J. Neurosurg. 81, 93-102 (1994).
- Rosenberg, G. A., Mun-Bryce, S., Wesley, M., Kornfeld, M. Collagenase-induced intracerebral hemorrhage in rats. Stroke. 21, 801-807 (1990).
- Alkayed, N. J. Gender-linked brain injury in experimental stroke. Stroke. 29, 159-165 (1998).
- Saha, J. K., Xia, J., Grondin, J. M., Engle, S. K., Jakubowski, J. A. Acute hyperglycemia induced by ketamine/xylazine anesthesia in rats: mechanisms and implications for preclinical models. Exp Biol Med. (Maywood). 230, 777-784 (2005).
- Fujiwara, N. Effect of normobaric oxygen therapy in a rat model of intracerebral hemorrhage. Stroke. 42, 1469-1472 (2011).
- Khatibi, N. H. Isoflurane posttreatment reduces brain injury after an intracerebral hemorrhagic stroke in mice. Anesth Analg. 113, 343-348 (2011).
