Моделирование внутримозгового кровоизлияния у мышей: Инъекции аутологичной крови или бактериальной коллагеназы
Summary
Клинически значимые животных моделях внутримозговое кровоизлияние (ICH) необходимо расширить наши знания о геморрагического инсульта и изучения новых терапевтических стратегий. В данном исследовании мы рассматриваем и оценить две ICH моделей, которые реализуют односторонние инъекции аутологичных или цельной крови или бактериальной коллагеназы в базальных ганглиях (корпус полосатого тела) мышей.
Abstract
Спонтанные внутримозговые кровоизлияния (ICH) определяет потенциально опасные для жизни неврологическая болезнь, которая составляет 10-15% от всех инсультов госпитализаций в связи и для которой нет эффективного лечения имеются на сегодняшний день 1,2. Из-за неоднородности ICH в организме человека, различных доклинических моделях необходимо тщательно изучить перспективные терапевтические стратегии 3. Экспериментальные ICH обычно индуцированных у грызунов по интрапаренхимальные инъекции либо аутологичной крови или бактериальной коллагеназы 4. Соответствующая модель выбирается на основе патофизиологии индукции кровотечения и травмы прогрессии. Модель имитирует кровь инъекции быстро прогрессирующее кровотечение. Кроме того, бактериальной коллагеназы ферментативно разрушает базальной мембраны капилляров головного мозга, вызывая активное кровотечение, что в целом развивается в течение нескольких часов 5. Результирующая perihematomal отек и нейрофункциональной дефицита может быть определена количественно сюдам обеих моделей. В этом исследовании мы описали и оценили изменение модели двойной инъекции аутологичных цельной крови 6, а также модель ICH введения бактериального коллагеназы 7, оба из которых целевой базальных ганглиев (полосатое тело) мужской CD-1 мышей. Мы оценили нейрофункциональной дефицита и отека головного мозга в 24 и 72 часов после индукции ICH. Intrastriatal инъекции аутологичной крови (30 мкл) или бактериальной коллагеназы (0.075U), вызванных воспроизводимых нейрофункциональной дефицита у мышей и значительно увеличить отек головного мозга через 24 и 72 ч после операции (р <0,05). В заключение обе модели дают последовательное геморрагические инфаркты и представляют основные методы для проведения доклинических исследований ICH.
Protocol
Discussion
Животные модели внутримозгового кровоизлияния (ICH) в значительной степени способствовать передовые понимания патофизиологии болезни, и обычно используются для разработки и оценки новых терапевтических стратегий в доклинических условиях. Интрапаренхимальные инъекции аутологичной ?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Это исследование было частично поддержана NIH грант RO1NS053407 для JH Чжан. Мы хотели бы поблагодарить г-на Дэймона Клебе за его ценный вклад.
Materials
| Material | Company | Catalogue Number | Comment |
| Stereotactic Head Frame | Stoelting Co. | 51600 | |
| Nanomite Syringe Pump | Harvard Apparatus | PY2 70-2217 | |
| Hamilton Syringe | Hamilton Company | 1725RN (250 μl) 1701 RN (10 μl) |
26 Gauge needle for 250 μl and 10 μl syringes. |
| Microdrill | Fine Science Tools | 18000-17 | |
| Microdrill burr | Fine Science Tools | 19007-09 | 0.9 mm diameter |
| Collagenase Type VII-S | Sigma-Aldrich | C2399 | |
| Microhematocrit Capillary Tubes | Fisher Scientific | 22-362-574 | unheparinized |
| Bone Wax | Ethicon | W31 | |
| Suture | Ethicon | 1676G | |
| Ketamine | JHP Pharmaceuticals | 42023-115-10 | Ketalar |
| Xylazine | LLOYD Laboratories | 139-236 | AnaSed |
References
- Broderick, J. P. Guidelines for the management of spontaneous intracerebral hemorrhage: A statement for healthcare professionals from a special writing group of the Stroke Council, American Heart Association. Stroke. 30, 905-915 (1999).
- Qureshi, A. I., Mendelow, A. D., Hanley, D. F. Intracerebral haemorrhage. Lancet. 373, 1632-1644 (2009).
- MacLellan, C. L., Silasi, G., Auriat, A. M., Colbourne, F. Rodent models of intracerebral hemorrhage. Stroke. 41, 95-98 (2010).
- James, M. L., Warner, D. S., Laskowitz, D. T. Preclinical models of intracerebral hemorrhage: a translational perspective. Neurocrit Care. 9, 139-152 (2008).
- MacLellan, C. L. Intracerebral hemorrhage models in rat: comparing collagenase to blood infusion. J. Cereb. Blood Flow Metab. 28, 516-525 (2008).
- Belayev, L. Experimental intracerebral hemorrhage in the mouse: histological, behavioral, and hemodynamic characterization of a double-injection model. Stroke. 34, 2221-2227 (2003).
- Clark, W., Gunion-Rinker, L., Lessov, N., Hazel, K. Citicoline treatment for experimental intracerebral hemorrhage in mice. Stroke. 29, 2136-2140 (1998).
- Nakamura, T. Intracerebral hemorrhage in mice: model characterization and application for genetically modified mice. J. Cereb. Blood Flow Metab. 24, 487-494 (2004).
- Schallert, T. Behavioral tests for preclinical intervention assessment. NeuroRx. 3, 497-504 (2006).
- Hartman, R., Lekic, T., Rojas, H., Tang, J., Zhang, J. H. Assessing functional outcomes following intracerebral hemorrhage in rats. Brain Res. 1280, 148-157 (2009).
- Hua, Y. Behavioral tests after intracerebral hemorrhage in the rat. Stroke. 33, 2478-2484 (2002).
- Tang, J. Mmp-9 deficiency enhances collagenase-induced intracerebral hemorrhage and brain injury in mutant mice. J. Cereb. Blood Flow Metab. 24, 1133-1145 (2004).
- Ma, Q. Vascular adhesion protein-1 inhibition provides antiinflammatory protection after an intracerebral hemorrhagic stroke in mice. J. Cereb. Blood Flow Metab. , (2010).
- Bullock, R., Mendelow, A. D., Teasdale, G. M., Graham, D. I. Intracranial haemorrhage induced at arterial pressure in the rat. Part 1: Description of technique, ICP changes and neuropathological findings. Neurol Res. 6, 184-188 (1984).
- Yang, G. Y., Betz, A. L., Chenevert, T. L., Brunberg, J. A., Hoff, J. T. Experimental intracerebral hemorrhage: relationship between brain edema, blood flow, and blood-brain barrier permeability in rats. J. Neurosurg. 81, 93-102 (1994).
- Rosenberg, G. A., Mun-Bryce, S., Wesley, M., Kornfeld, M. Collagenase-induced intracerebral hemorrhage in rats. Stroke. 21, 801-807 (1990).
- Alkayed, N. J. Gender-linked brain injury in experimental stroke. Stroke. 29, 159-165 (1998).
- Saha, J. K., Xia, J., Grondin, J. M., Engle, S. K., Jakubowski, J. A. Acute hyperglycemia induced by ketamine/xylazine anesthesia in rats: mechanisms and implications for preclinical models. Exp Biol Med. (Maywood). 230, 777-784 (2005).
- Fujiwara, N. Effect of normobaric oxygen therapy in a rat model of intracerebral hemorrhage. Stroke. 42, 1469-1472 (2011).
- Khatibi, N. H. Isoflurane posttreatment reduces brain injury after an intracerebral hemorrhagic stroke in mice. Anesth Analg. 113, 343-348 (2011).
