マウスにおけるモデリング脳出血：自己血または細菌性コラゲナーゼの注入
1Department of Physiology and Pharmacology,Loma Linda University School of Medicine, 2College of Natural and Agricultural Sciences,University of California, Riverside , 3Department of Anesthesiology,Loma Linda University School of Medicine, 4Department of Neurosurgery,Loma Linda University School of Medicine
Summary
脳内出血（ICH）の臨床的に関連する動物モデルは、出血性脳卒中の知識を拡張し、新たな治療戦略を検討するために必要とされる。そこで本研究では、記述し、マウスの大脳基底核（線条体）に自家全血または細菌コラゲナーゼのどちらかの一方的な注射を実装した2つのICHのモデルを比較検討する。
Abstract
自発脳内出血（ICH）はすべての脳卒中関連入院の10-15％を占めており、そのための効果的な治療法は1,2を最新に利用できない生命を脅かす可能性の神経学的な病気を定義します。なぜなら、ヒトにおけるICHの異質性は、様々な前臨床モデルを3前向きな治療戦略を徹底的に探求するために必要とされる。実験的な無形文化遺産は、一般的に自己血または細菌コラゲナーゼ4のいずれかの実質内注射することにより、げっ歯類で誘導される。適切なモデルは、出血の誘導と傷害の進行の病態生理に基づいて選択されます。血液注入モデルが急速に進んで出血を模倣しています。あるいは、細菌コラゲナーゼは、酵素的に、一般的に数時間かけて5を進化させ、アクティブな出血を引き起こし、脳の毛細血管の基底膜を破壊する。結果perihematomal浮腫とneurofunctional赤字はあちこちに定量化することができるメートルの両モデル。そこで本研究では、説明と自己全血6の修正されたダブルインジェクションモデルと同様に細菌性コラゲナーゼ7のICHのインジェクションモデル、どちらもターゲットの雄CD-1マウスの大脳基底核（線条体）を評価我々は24でneurofunctional赤字と脳浮腫を評価したICH誘導後72時間。自己血の線条体注入量（μl30）または細菌コラゲナーゼ（0.075U）は、24および72手術後の時間（P <0.05）で、マウスで再現neurofunctional赤字と大幅に増加した脳浮腫を引き起こした。結論としては、両方のモデルは、一貫性の出血性梗塞を生じ、前臨床ICHの研究のための基本的な方法を表しています。
Protocol
すべての手順は、 実験動物の管理と使用のためのNIHのガイドに準拠して実施し、ロマリンダ大学での動物実験委員会によって承認された。 1。術前準備無菌技術は、すべての外科的処置のために推薦されます。定位装置を消毒し、手術前に無菌の手術器具を準備する。すべての動物の取扱い中に個人用保護具（PPE）を着用してください。動…
Discussion
脳内出血（ICH）の動物モデルは、疾患の病態生理学の高度な理解に大きく貢献する、と一般的に前臨床設定において新たな治療戦略を開発し、評価するために使用されます。自家血液または細菌コラゲナーゼの実質内注射は、げっ歯類におけるICHを生成するために十分に確立されたメソッドです。どちらの方法も、当初はラットで開発されたが、トランスジェニックマウスおよびノックアウ?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
本研究では、部分的にJH張にNIHの助成金RO1NS053407によってサポートされていました。我々は彼の貴重な貢献のための氏デイモンクレーベに感謝したいと思います。
Materials
| Material | Company | Catalogue Number | Comment |
| Stereotactic Head Frame | Stoelting Co. | 51600 | |
| Nanomite Syringe Pump | Harvard Apparatus | PY2 70-2217 | |
| Hamilton Syringe | Hamilton Company | 1725RN (250 μl) 1701 RN (10 μl) |
26 Gauge needle for 250 μl and 10 μl syringes. |
| Microdrill | Fine Science Tools | 18000-17 | |
| Microdrill burr | Fine Science Tools | 19007-09 | 0.9 mm diameter |
| Collagenase Type VII-S | Sigma-Aldrich | C2399 | |
| Microhematocrit Capillary Tubes | Fisher Scientific | 22-362-574 | unheparinized |
| Bone Wax | Ethicon | W31 | |
| Suture | Ethicon | 1676G | |
| Ketamine | JHP Pharmaceuticals | 42023-115-10 | Ketalar |
| Xylazine | LLOYD Laboratories | 139-236 | AnaSed |
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Citer Cet Article
Krafft, P. R., Rolland, W. B., Duris, K., Lekic, T., Campbell, A., Tang, J., Zhang, J. H. Modeling Intracerebral Hemorrhage in Mice: Injection of Autologous Blood or Bacterial Collagenase. J. Vis. Exp. (67), e4289, doi:10.3791/4289 (2012).