마우스의 모델링 Intracerebral 출혈 : Autologous 혈액이나 세균 Collagenase의 주입
Summary
intracerebral 출혈 (ICH)의 임상 관련 동물 모델은 출혈성 뇌졸중에 대한 지식을 확장하고 새로운 치료 전략을 검토 필요합니다. 본 연구에서는, 우리는 설명과 쥐의 기저 신경절 (코퍼스 striatum)에 autologous 전체 혈액이나 세균 collagenase 하나의 일방적 주사를 구현하는 두 ICH 모델을 평가합니다.
Abstract
자연 intracerebral 출혈 (ICH)는 모든 뇌졸중 관련 입원의 10-15%와 더 효과적인 치료법은 1,2 데이트를 할 수 없습니다있는 계정 잠재적으로 생명을 위협하는 신경 질병을 정의합니다. 때문에 인간의 ICH의 이질성의 다양한 잠복기 모델은 철저하게 3 예비 치료 전략을 탐색 할 필요합니다. 실험의 ICH는 일반적으로 autologous 혈액이나 세균 collagenase 4 중의 intraparenchymal 주입에 의해 동물에서 유도됩니다. 해당 모델은 출혈 유도와 부상의 진행의 pathophysiology에 따라 선택됩니다. 혈액 주입 모델은 빠른 속도로 진행 출혈을 모방 한 것이 었지요. 또한, 세균 collagenase는 효소 일반적으로 몇 시간 동안 5 발전 적극적으로 출혈의 원인, 뇌 모세 혈관의 기저 얇은 판을 방해. 결과 perihematomal 부종과 neurofunctional 적자는 이리저리 정량화 할 수m 모델 모두. 본 연구에서는, 우리는 설명과 autologous 전체 혈액 6 수정 이중 사출 모델뿐만 아니라 세균 collagenase 7 ICH 분사 모델, 둘 다 대상의 남성 CD-1 마우스의 기저 신경절 (코퍼스 striatum).을 평가 우리는 ICH 유도 한 후 neurofunctional 결손과 24에서 뇌 부종과 72 시간을 평가합니다. autologous 혈액 (30 μl) 또는 박테리아 collagenase (0.075U)의 Intrastriatal 주입 쥐 재현 neurofunctional 결손 및 수술 후 크게 증가 뇌 24의 부종과 72 시간 (P <0.05)을 일으켰습니다. 결론적으로 두 모델은 일관성 출혈성 infarcts를 얻을 수 있으며 잠복기 ICH 연구에 대한 기본적인 방법을 나타냅니다.
Protocol
Discussion
intracerebral 출혈 (ICH)의 동물 모델은 질병의 pathophysiology의 고급 이해에 크게 기여하고, 일반적으로 잠복기 분위기의 소설 치료 전략을 개발하고 평가하는 데 사용됩니다. autologous 혈액이나 세균 collagenase의 Intraparenchymal 주사는 설치류에서 ICH를 생성하는 잘 알려진 방법입니다. 두 방법은 처음 쥐에서 개발하지만, 유전자 변형과 한방 긴장의 급속하게 증가 가용성으로 인해, 쥐 더 출혈성 뇌 손상 <su…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 연구는 부분적으로 JH 장에 NIH 보조금 RO1NS053407에 의해 지원되었다. 우리는 그의 귀중한 공헌 씨 데이먼 Klebe 감사드립니다.
Materials
| Material | Company | Catalogue Number | Comment |
| Stereotactic Head Frame | Stoelting Co. | 51600 | |
| Nanomite Syringe Pump | Harvard Apparatus | PY2 70-2217 | |
| Hamilton Syringe | Hamilton Company | 1725RN (250 μl) 1701 RN (10 μl) |
26 Gauge needle for 250 μl and 10 μl syringes. |
| Microdrill | Fine Science Tools | 18000-17 | |
| Microdrill burr | Fine Science Tools | 19007-09 | 0.9 mm diameter |
| Collagenase Type VII-S | Sigma-Aldrich | C2399 | |
| Microhematocrit Capillary Tubes | Fisher Scientific | 22-362-574 | unheparinized |
| Bone Wax | Ethicon | W31 | |
| Suture | Ethicon | 1676G | |
| Ketamine | JHP Pharmaceuticals | 42023-115-10 | Ketalar |
| Xylazine | LLOYD Laboratories | 139-236 | AnaSed |
References
- Broderick, J. P. Guidelines for the management of spontaneous intracerebral hemorrhage: A statement for healthcare professionals from a special writing group of the Stroke Council, American Heart Association. Stroke. 30, 905-915 (1999).
- Qureshi, A. I., Mendelow, A. D., Hanley, D. F. Intracerebral haemorrhage. Lancet. 373, 1632-1644 (2009).
- MacLellan, C. L., Silasi, G., Auriat, A. M., Colbourne, F. Rodent models of intracerebral hemorrhage. Stroke. 41, 95-98 (2010).
- James, M. L., Warner, D. S., Laskowitz, D. T. Preclinical models of intracerebral hemorrhage: a translational perspective. Neurocrit Care. 9, 139-152 (2008).
- MacLellan, C. L. Intracerebral hemorrhage models in rat: comparing collagenase to blood infusion. J. Cereb. Blood Flow Metab. 28, 516-525 (2008).
- Belayev, L. Experimental intracerebral hemorrhage in the mouse: histological, behavioral, and hemodynamic characterization of a double-injection model. Stroke. 34, 2221-2227 (2003).
- Clark, W., Gunion-Rinker, L., Lessov, N., Hazel, K. Citicoline treatment for experimental intracerebral hemorrhage in mice. Stroke. 29, 2136-2140 (1998).
- Nakamura, T. Intracerebral hemorrhage in mice: model characterization and application for genetically modified mice. J. Cereb. Blood Flow Metab. 24, 487-494 (2004).
- Schallert, T. Behavioral tests for preclinical intervention assessment. NeuroRx. 3, 497-504 (2006).
- Hartman, R., Lekic, T., Rojas, H., Tang, J., Zhang, J. H. Assessing functional outcomes following intracerebral hemorrhage in rats. Brain Res. 1280, 148-157 (2009).
- Hua, Y. Behavioral tests after intracerebral hemorrhage in the rat. Stroke. 33, 2478-2484 (2002).
- Tang, J. Mmp-9 deficiency enhances collagenase-induced intracerebral hemorrhage and brain injury in mutant mice. J. Cereb. Blood Flow Metab. 24, 1133-1145 (2004).
- Ma, Q. Vascular adhesion protein-1 inhibition provides antiinflammatory protection after an intracerebral hemorrhagic stroke in mice. J. Cereb. Blood Flow Metab. , (2010).
- Bullock, R., Mendelow, A. D., Teasdale, G. M., Graham, D. I. Intracranial haemorrhage induced at arterial pressure in the rat. Part 1: Description of technique, ICP changes and neuropathological findings. Neurol Res. 6, 184-188 (1984).
- Yang, G. Y., Betz, A. L., Chenevert, T. L., Brunberg, J. A., Hoff, J. T. Experimental intracerebral hemorrhage: relationship between brain edema, blood flow, and blood-brain barrier permeability in rats. J. Neurosurg. 81, 93-102 (1994).
- Rosenberg, G. A., Mun-Bryce, S., Wesley, M., Kornfeld, M. Collagenase-induced intracerebral hemorrhage in rats. Stroke. 21, 801-807 (1990).
- Alkayed, N. J. Gender-linked brain injury in experimental stroke. Stroke. 29, 159-165 (1998).
- Saha, J. K., Xia, J., Grondin, J. M., Engle, S. K., Jakubowski, J. A. Acute hyperglycemia induced by ketamine/xylazine anesthesia in rats: mechanisms and implications for preclinical models. Exp Biol Med. (Maywood). 230, 777-784 (2005).
- Fujiwara, N. Effect of normobaric oxygen therapy in a rat model of intracerebral hemorrhage. Stroke. 42, 1469-1472 (2011).
- Khatibi, N. H. Isoflurane posttreatment reduces brain injury after an intracerebral hemorrhagic stroke in mice. Anesth Analg. 113, 343-348 (2011).
