ウサギの乳腺への管内配達
Summary
Here, we describe a technique for the localized delivery of reagents to the rabbit mammary gland via an intraductal injection. In addition, we describe a protocol for visualization and the confirmation of delivery by high-resolution ultrasound imaging of contrast agents.
Abstract
乳癌のためのローカライズされた管内の治療は、腫瘍への効率的な送達および減少全身毒性及び副作用1、2、3、4、5、6、7を含む潜在的な利点を提供します。これらの処理は、より広く適用することができる前に、しかし、いくつかの課題が残っています。適切な動物モデルにおける管内治療法の開発と検証は、患者のための管内治療戦略の開発を促進します。マウス乳腺広く乳腺発達および腫瘍形成のモデル系として使用されてきたが、解剖学的構造は、人間の腺と区別されます。大きな動物モデルは、ウサギのような乳腺構造と管内治療の開発のためのより良好なモデルとして役立つことができます。 C INマウスにontrast、ここで10乳管の木は空間的に分離した乳首の各終端は、ウサギの乳腺は、より密接1乳頭内の別の開口部を通ってその出口複数の重複乳管システムで、人間の腺に似ている、体軸に沿って分布しています。ここでは、直接ウサギ乳管に、高解像度の超音波画像で配信自体の可視化のための試薬の送達のための低侵襲的な方法を提示します。
Introduction
治療薬の管内送達は、齧歯類モデルおよび早期臨床試験3、4、5、6、11、12で検討されています。私は勉強最近のフェーズは、管内カルボプラチンまたは浸潤癌2の治療のために乳房切除術を待っている女性では管内ペグ化リポソームドキソルビシンの安全性と実現可能性を実証しました。
管内送達のための以前のプロトコルは、マウスおよびラット乳腺6、7、8、9のために開発されています。研究目的、管内腫瘍細胞注射および癌遺伝子のレンチウイルスベクターの送達のためにも、げっ歯類モデルで実施されていますREF "> 13、14、15、16が、管内デリバリプロセスのインビボモデルにおける理想的な治療用化合物の新規なクラスの開発を可能にし、前臨床評価を容易にするはずである。げっ歯類とヒトとの間の解剖学的差異は、これらの変換を複雑にしています研究。
マウスとは異なり、各ダクトは別々の乳首で終了した、ヒト乳房は5〜9の独立性乳管システム、乳首で終わる独立した開口部を有する各構成されています。ウサギの乳腺は、4つの独立した腺管システム、単一乳首の4つのオリフィスのうちの1つを介してそれぞれ個別にアクセスを抱きます。ウサギモデルは、より密接に人体解剖学と一致し、より関連性の文脈で管内薬物送達の研究を可能にします。
ここでは、管内の配信を評価するために2つの手法を使用します。の同時投与生体色素が皮膚を通して可視化を可能にし、方法の簡単かつ迅速な確認を提供します。いくつかの用途のために、管のより高い解像度のマッピングが好ましい場合があります。我々は、非標的コントラスト試薬の管内配信を通じてここダクトの超音波イメージングのためのプロトコルを提示します。
Protocol
Representative Results
Discussion
ウサギの乳腺へ管内送達のこの方法は、超音波造影試薬および不可欠な染料および治療薬を含む多くの他の水溶液に使用することができます。以前の研究は、ホルモン17、18、19の管内送達を実証しました。げっ歯類モデル、核酸8の管内送達、化学療法剤6,7、及…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
The authors acknowledge support from a Translational Breast Cancer Research Grant (14-60-26-BROC to AB) from the Breast Cancer Research Foundation and the American Association for Cancer Research.
Materials
| MicroMarker non-targeted contrast reagent | VisualSonics | VS-11694 | |
| Luer Lock 1mL Syringes | BD | 309628 | |
| Glycopyrrolate 0.2mg/mL | Wedgewood Compounding Pharmacy | GLYCOP-INJ013VC | 6 month shelf life, supply may be limited. |
| Atropine Sulfate 0.5 mg/mL | Animal Health International | 15320764 | If glycopyrrolate is unavailable. Not to be combined with glycopyrrolate. |
| Ketamine HCL 100mg/mL | Animal Health International | 21250699 | http://www.animalhealthinternational.com/ |
| Acepromazine 10mg/mL | Animal Health International | 17640541 | |
| Xylazine 20mg/mL | Animal Health International | 20101547 | |
| Yohimbine 0.2mg/mL | Animal Health International | 14588965 | |
| Hair Removing Cream | Veet | Sensitive skin solution. Available through local retailers. | |
| Blunt tip infusion needles | Sai Infusion Technology | B14-50 | http://www.sai-infusion.com/collections/blunt-needles |
| Veterinary Pulse Oximeter | EdanUSA | VE-H100B | http://www.edanusa.com/Product/VE-H100B-Veterinary-Pulse-Oximeter.html |
| Warm Water Pump | Gaymar | TP700 | |
| Warm Water Blanket | Animal Health International | 21232696 | Maxi-Therm Lite Warming Pads |
| Ultrasound system | VisualSonics | Vevo 2100 |
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