토끼 유선으로 관내 배달
Summary
Here, we describe a technique for the localized delivery of reagents to the rabbit mammary gland via an intraductal injection. In addition, we describe a protocol for visualization and the confirmation of delivery by high-resolution ultrasound imaging of contrast agents.
Abstract
유방암 췌관 국소 치료는 종양에 대한 효율적인 전달 및 감소 된 독성 및 부작용이 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7을 포함한 잠재적 인 이점을 제공한다. 이러한 치료가 더 널리 적용 할 수 있습니다 전에 그러나, 몇 가지 과제가 남아있다. 적절한 동물 모델의 개발과 췌관 치료제의 유효성 검사는 환자 췌관 치료 전략의 개발을 용이하게한다. 마우스 유방 선 널리 유선 종양의 발달 및 모델 시스템으로 사용되었지만, 해부학 인간 동맥 구별된다. 더 큰 동물 모델은 같은 토끼로, 유선 구조 및 췌관 치료 개발을위한 더 나은 모델이 될 수 있습니다. C에서마우스에 ontrast,하는 열 유관 나무 공간적으로 분리 된 유두의 각 종단은 토끼 유방 동맥은 더 밀접하게 한 젖꼭지에 별도의 구멍을 통해 그 출구 여러 중복 유관 시스템과, 인간의 동맥과 유사한 신체의 축을 따라 배포됩니다. 여기서는 직접 유선 토끼 덕트로 고해상도 초음파 영상과 함께 전달 자체의 시각화를위한 시약의 전달을위한 최소 침습적 방법을 제시한다.
Introduction
치료제의 관내 전달은 설치류 모델에서 초기 및 인간 실험 3, 4, 5, 6, 11, 12에서 검토되고있다. 공부의 최근 단계는 췌관 카보 플 라틴 또는 침습성 암 (2)의 치료를 위해 유방 절제술을 기다리고 여성의 췌관 페 길화 된 리포좀 독소루비신의 안전과 가능성을 보여 주었다.
관내 전달을 위해 이전 프로토콜은 마우스와 랫트 젖샘 6, 7, 8, 9에 대해 개발되어왔다. 연구 목적, 관내 종양 세포를 주사하고 암 유전자의 렌티 바이러스 벡터 전달에도 설치류 모델에서 수행 된REF "> 13, 14, 15, 16. 그러나 관내 전달 프로세스의 생체 내 모델에서 이상적 치료 화합물의 신규 클래스의 개발을 허용하고 임상 평가를 용이하게한다. 설치류와 인간 사이의 해부학 적 차이는 이들의 번역을 복잡했다 연구.
마우스와는 달리, 각각의 덕트는 별도의 젖꼭지에서 종료하는, 인간의 가슴은 5 ~ 9 독립적 인 유관 시스템, 유두에서 끝나는 별도의 개방 각으로 구성되어 있습니다. 토끼 유방 땀샘은 네 개의 독립 유관 시스템, 하나의 젖꼭지에 네 개의 구멍 중 하나를 통해 각각 개별적으로 접근 항구. 토끼 모델은 더 밀접하게 일치 인체 해부학 및 더 중요한 상황에서 관내 약물 전달 연구를 허용한다.
여기, 우리는 관내 배달을 평가하기 위해이 기술을 사용합니다. (A)의 공동 투여중요한 색소는 피부로 시각화를 허용하고있어서 간단하고 신속하게 확인을 제공한다. 일부 애플리케이션의 경우, 덕트 고해상도 매핑은 바람직 할 수있다. 우리는 비 대상 대조 시약 관내 전달을 통해 여기 덕트의 초음파 영상을위한 프로토콜을 제시한다.
Protocol
Representative Results
Discussion
토끼 유방 선으로 관내 전달하는이 방법은 중요한 염료 및 치료를 포함하여, 초음파 대조 시약 및 기타 수용액에 사용될 수있다. 이전의 연구는 호르몬 17, 18, 19의 췌관 배달을 증명하고있다. 설치류 모델 핵산 (8)의 관내 전달, 화학 요법 제 6, 7, 나노 캐리어 <sup clas…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
The authors acknowledge support from a Translational Breast Cancer Research Grant (14-60-26-BROC to AB) from the Breast Cancer Research Foundation and the American Association for Cancer Research.
Materials
| MicroMarker non-targeted contrast reagent | VisualSonics | VS-11694 | |
| Luer Lock 1mL Syringes | BD | 309628 | |
| Glycopyrrolate 0.2mg/mL | Wedgewood Compounding Pharmacy | GLYCOP-INJ013VC | 6 month shelf life, supply may be limited. |
| Atropine Sulfate 0.5 mg/mL | Animal Health International | 15320764 | If glycopyrrolate is unavailable. Not to be combined with glycopyrrolate. |
| Ketamine HCL 100mg/mL | Animal Health International | 21250699 | http://www.animalhealthinternational.com/ |
| Acepromazine 10mg/mL | Animal Health International | 17640541 | |
| Xylazine 20mg/mL | Animal Health International | 20101547 | |
| Yohimbine 0.2mg/mL | Animal Health International | 14588965 | |
| Hair Removing Cream | Veet | Sensitive skin solution. Available through local retailers. | |
| Blunt tip infusion needles | Sai Infusion Technology | B14-50 | http://www.sai-infusion.com/collections/blunt-needles |
| Veterinary Pulse Oximeter | EdanUSA | VE-H100B | http://www.edanusa.com/Product/VE-H100B-Veterinary-Pulse-Oximeter.html |
| Warm Water Pump | Gaymar | TP700 | |
| Warm Water Blanket | Animal Health International | 21232696 | Maxi-Therm Lite Warming Pads |
| Ultrasound system | VisualSonics | Vevo 2100 |
References
- Flanagan, M., Love, S., Hwang, E. S. Status of Intraductal Therapy for Ductal Carcinoma in Situ. Curr Breast Cancer Rep. 2 (2), 75-82 (2010).
- Love, S. M., et al. A Feasibility Study of the Intraductal Administration of Chemotherapy. Cancer Prevention Research. 6 (1), 51-58 (2013).
- Stearns, V., et al. Preclinical and Clinical Evaluation of Intraductally Administered Agents in Early Breast Cancer. Sci Transl Med. 3 (106), 106ra108 (2011).
- Zhang, B., et al. The Safety Parameters of the Study on Intraductal Cytotoxic Agent Delivery to the Breast before Mastectomy. Chin J Cancer Res. 26 (5), 579-587 (2014).
- Mahoney, M. E., Gordon, E. J., Rao, J. Y., Jin, Y., Hylton, N., Love, S. M. Intraductal Therapy of Ductal Carcinoma In Situ: a Presurgery Study. Clin Breast Cancer. 13 (4), 280-286 (2013).
- Murata, S., et al. Ductal Access for Prevention and Therapy of Mammary Tumors. Cancer Res. 66 (2), 638-645 (2006).
- Chun, Y. S., et al. Intraductally Administered Pegylated Liposomal Doxorubicin Reduces Mammary Stem Cell Function In the Mammary Gland but in the Long Term, Induces Malignant Tumors. Breast Cancer Res Treat. 135 (1), 201-208 (2012).
- Brock, A., et al. Silencing HoxA1 by Intraductal Injection of siRNA Lipidoid Nanoparticles Prevents Mammary Tumor Progression in Mice. Sci Trans Med. 6 (217), 2172a2 (2014).
- Krause, S., Brock, A., Ingber, D. E. Intraductal Injection For Localized Drug Delivery To The Mouse Mammary Epithelium. J Vis Exp. (80), e50692 (2013).
- Brock, A., Goh, H. T., Yang, B., Yu, L., Li, H., Loh, Y. H. Cellular Reprogramming: A New Technology Frontier In Pharmaceutical Research. Pharm Res. 29 (1), 35-52 (2012).
- Silverstein, M. J., et al. Ductal Carcinoma In Situ of the Breast. Annu. Rev Med. 51, 17-32 (2000).
- Love, S. M., Barsky, S. H. Anatomy of the Nipple And Breast Ducts Revisited. Cancer. 101 (9), 1947-1957 (2004).
- Virnig, B. A., Shamliyan, T., Tuttle, T. M., Kane, R. L., Wilt, W. J. Diagnosis and Management of Ductal Carcinoma In Situ (DCIS). Evidence Report/Technology Assessment. , 185 (2009).
- Mills, D., et al. Examination of Duct Physiology in the Human Mammary Gland. PLoS One. 11 (4), e0150653 (2016).
- King, B. L., Love, S. M. The Intraductal Approach to the Breast: Raison d’Etre. Breast Cancer Res. 8 (2), 206 (2006).
- Bu, W., Xin, L., Toneff, M., Li, L., Li, Y. Lentivirus vectors for stably introducing genes into mammary epithelial cells in vivo . J Mammary Gland Biol Neoplasia. 14, 401-404 (2009).
- Lyons, W. R. The Direct Mammotrophic Action of Lactogenic Hormone. Proc. Soc. Exp. Bio. Med. 51 (2), 308-311 (1942).
- Fiddler, T. J., Birkinshaw, M., Falconer, I. R. Effects Of Intraductal Prolactin On Some Aspects of the Ultrastructure and Biochemistry of Mammary Tissue in the Pseudopregnant Rabbit. J Endocrinol. 49 (3), 459-469 (1971).
- Falconer, I. R., Fiddler, T. J. Effects of Intraductal Administration Of Prolactin, Actinomycin D and Cycloheximide on Lipoprotein Lipase Activity in the Mammary Glands of Pseudopregnant Rabbits. Biochim Biophys Acta. 218 (3), 508-514 (1970).
- Singh, Y. Influence of Molecular Size on the Retention of Polymeric Nanocarrier Diagnostic Agents in Breast Ducts. Pharm Res. 29 (9), 2377-2388 (2012).
- Jain, R., et al. Atypical Ductal Hyperplasia: Interobserver and Intraobserver Variability. Mod Pathol. 24 (7), 917-923 (2011).
- Betsill, W. L., Rosen, P. P., Lieberman, P. H., Robbins, G. F. Intraductal Carcinoma. Long-term Follow-up After Treatment by Biopsy Alone. JAMA. 239 (18), 1863-1867 (1978).
- Eusebi, V., et al. Long-term Follow-up of In Situ Carcinoma of the Breast. Semin Diagn Pathol. 11 (3), 223-235 (1994).
- Sanders, M., et al. The Natural History Of Low-Grade Ductal Carcinoma In Situ Of The Breast In Women Treated By Biopsy Only Revealed Over 30 Years Of Long-Term Follow-Up. Cancer. 103 (12), 2481-2484 (2005).
- Esserman, L. J., et al. Addressing Overdiagnosis and Overtreatment in Cancer: A Prescription For Change. Lancet Oncol. 15 (6), e234-e242 (2014).
