Summary
यह अध्ययन चूहों में रीढ़ की हड्डी आइसकेमिया के कम से कम आक्रामक और आसानी से प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य मॉडल बनाने के लिए तकनीक को दर्शाता है। महाधमनी अवरोधन समय को नियंत्रित करके हिंद अंग मोटर घाटे के विभिन्न डिग्री का उत्पादन किया जा सकता है।
Abstract
रीनाइन कॉर्ड आइस्केमिया थोरैकोएडोमोनियल एओर्टिक एन्युरिज़्म सर्जरी के बाद एक घातक जटिलता है। रीढ़ की हड्डी आइस्किमिया के प्रायोगिक मॉडल का उपयोग करके शोधकर्ता इस जटिलता को रोकने और रोकने के लिए रणनीतियों की जांच कर सकते हैं। यहां वर्णित मॉडल में पैरापालगिया की अलग-अलग डिग्री दर्शायी जाती हैं जो चूहे रीढ़ की हड्डी के इस्किमिया मॉडल में वक्षीय महाधमनी अवरोधन के बाद अवरोध की लंबाई से संबंधित हैं।
ए 2-फादर गुब्बारे से टकरा गया कैथेटर उदरदार धमनी के माध्यम से अवरोहीय छातीचा महाधमनी में बढ़ गया था जब तक कि एनेस्थेटेड पुरुष स्प्रैग-दावली चूहों में बाएं सबक्लावियन धमनी पर कैथेटर टिप नहीं रखा गया था। स्पाइनल कॉर्ड इस्किमिया कैथेटर गुब्बारा बढ़ाकर प्रेरित किया गया था। अवरोध (9, 10 या 11 मिनट) की एक निश्चित अवधि के बाद, गुब्बारा deflated था। सर्जरी के बाद 24 घंटे में मोटर घाटे सूचकांक का उपयोग करके न्यूरोलॉजिक मूल्यांकन किया गया था, और रीढ़ की हड्डी हिस्टोपैथोलॉजिकल परीक्षा के लिए काटा गया था।
Jove_content "> 9 मिनट के महाधमनी अवरोधन के तहत चूहों ने हल्के अंग में हल्के और प्रतिवर्ती मोटर हानि दिखायी। उंगलियां 10 मिनट के महाधमनी अवरोध के अधीन थीं जो मध्यम लेकिन प्रतिवर्ती मोटर हानि के साथ प्रस्तुत की गई थी। 11 मिनट की महाधमनी अवरोधन के अधीन चूहे पूर्ण और निरंतर प्रदर्शित हुए पक्षाघात की रीढ़ की हड्डी के हिस्सों में मोटर न्यूरॉन्स अधिक चूहे में महाधमनी अवरोधन की कम अवधि के अधीन बनाए गए थे।शोधकर्ताओं ने इस रीढ़ की हड्डी आइसकेमिया मॉडल का उपयोग करके वक्षीय महाधमनी अवरोधन के बाद एक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य हिंद अंग मोटर घाटे को प्राप्त कर सकते हैं।
Introduction
पार्पेलिगिया थोरोकोएडोमोनियल एओर्टिक एन्युरिज़्म सर्जरी के घातक जटिलता है। यह रीढ़ की हड्डी इस्किमिया-रिपरफ्यूजन की चोट से उत्पन्न होती है जो कि एॉर्टो के क्रॉस क्लैम्पिंग और अनक्लम्पिंग के दौरान होती है। 1 रीढ़ की हड्डी, 2 , 3 , 4 की रक्षा करने के लिए प्रणालीगत हाइपोथर्मिया और मस्तिष्कमेरु ड्रेनेज सहित कई रणनीतियों को पेश किया गया है , लेकिन कई मरीज़ चोट से प्रभावित हैं।
कई जानवरों की रीढ़ की हड्डी इस्किमिया मॉडल को इसकी रोगजनकता की जांच करने और चोट के खिलाफ सुरक्षात्मक रणनीति तैयार करने के लिए पेश किया गया है। वर्तमान अध्ययन में, हम टेरा और मार्सला की विधि के आधार पर रीढ़ की हड्डी के इस्किमिया के एक चूहे मॉडल की रूपरेखा करते हैं। 5 चूहों में रीढ़ की हड्डी का संचयन तंत्र मनुष्यों में रीढ़ की हड्डी संवहनी और संपार्श्विक तंत्र के समान है, हालांकि आकार में कुछ अंतर हैं औरस्थान। 6 , 7 , इसलिए, चूहे एक आनुवंशिक रूप से उपयुक्त पशु है जो कि रोगजनन, जटिलताओं और रीढ़ की हड्डी आइस्किमिया के उपचार की जांच के लिए प्रयोगात्मक मॉडल का उपयोग करता है। इसके अलावा, रीढ़ की हड्डी इस्किमिया मॉडल वक्षीय महाधमनी के एक अंतर्भुमीय गुब्बारा अवरोध का उपयोग करके न्यूनतम हस्तक्षेप के साथ विश्वसनीय महाधमनी अवरोध पैदा करता है।
इस अध्ययन में, हमने दिखाया है कि रीढ़ की हड्डी की आर्चशियान के चूहा मॉडल में हरित अंगों में प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य मोटर घाटे आती हैं जो महाधमनी अवरोधन समय के आधार पर गंभीरता से भिन्न होती हैं।
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Protocol
इस प्रोटोकॉल को संस्थागत पशु देखभाल और सोल नेशनल यूनिवर्सिटी की उपयोग समिति बुंदांग अस्पताल द्वारा अनुमोदित किया गया था। संयुक्त राज्य अमेरिका नेशनल इंस्टीट्यूट ऑफ हैल्थ गाइड फॉर केयर एंड लैबोरेटरी प्राइजल्स के अनुसार पशु देखभाल और प्रयोगों का आयोजन किया गया।
1. सर्जिकल तैयारी
- सर्जरी से पहले, पेटेंट को सुनिश्चित करने के लिए बाँझ खारा के साथ कैथेटर फ्लश करें
- ऑपरेटिंग टेबल पर एक हीटिंग कंबल रखो, और एक बाँझ कपड़े के साथ मेज को कवर।
- 100% ऑक्सीजन में 3.0% -4.0% isoflurane के साथ एक ऐक्रेलिक बॉक्स में पुरुष स्प्रग-दावली चूहों (270-330 जी) रखें।
- चूहे की आंखों पर स्नेहक लागू करें
- सुचारु स्थिति में ऑपरेटिंग मेज पर चूहा रखें और साँस आइफ्लुरेन (1.0% -2.5 वॉल्यूम%) के निरंतर प्रशासन के साथ चेहरे का मुखौटा का उपयोग करके संज्ञाहरण बनाए रखें।
- शरीर का तापमान 37.0-38.0 डिग्री सेल्सियस के बीच पर नजर रखने और बनाए रखने के लिए एक गुदा जांच करें।
2. रेशमी आर्टरी कैथीटेराइजेशन
- बीटैडिन और 70% इथेनॉल का उपयोग करके सही इनग्रेनल क्षेत्र को धीरे से साफ़ करें।
- सही इनग्रेनल क्षेत्र पर कैंची का उपयोग करके 2 सेमी क्षैतिज त्वचा चीरा बनाएं।
- रिट्रेक्टर का उपयोग करना, सर्जिकल फील्ड को बेनकाब करना।
- आसपास के नस और तंत्रिका से उदर धमनी काटना। घुमावदार संदंश और धुंधला संदंश का उपयोग कर धमनी के एक 1 सेमी अनुभाग को अलग करें।
- 4.0 ब्लैक रेशम सीवन का उपयोग करना, एक्सपोजर को अधिकतम करने के लिए धमनी के समीपस्थ और बाह्य दोनों किनारों पर ढीली टाई दें।
- सूक्ष्म कैंची का उपयोग करते हुए उदर धमनी पर चीरा बनाएं।
- 2-फादर डालें सूक्ष्म संदंश का उपयोग करते हुए उदर धमनी में गुब्बारे से छिपाया कैथेटर कैथेटर सिर से समीपस्थता के साथ कैथेटर सिर से 1 सेमी के बारे में पोत को कैथेटर सुरक्षित करें, और फिर बाहर का लघड़ना टाई।
3. कैरोटिड आर्टरी कैथीटेराइजेशन
- बीटाड का उपयोग करके ठीक पूर्वकाल गर्दन को साफ़ करेंIne और 70% इथेनॉल, और फिर एक त्वचा चीरा बनाने
- रिट्रेक्टर का उपयोग करना, सर्जिकल फील्ड को बेनकाब करना। धमनी के एक 1-सेमी खंड को अलग करें, और जोखिम को अधिकतम करने के लिए धमनियों के समीपस्थ और बाह्य दोनों किनारों पर एक रेशम सीवन का उपयोग करके शिथिल रूप से टाई।
- 24 जी अंतःशिरा कैथेटर का उपयोग कर मन्या धमनी को दबाएं और दिल की ओर कैथीटर की समीपस्थ 1 सेमी अग्रिम।
- समीपस्थ संयुक्ताक्षर के साथ कैथेटर सुरक्षित करें, और फिर बाहर का बंधन बाँध लें।
- 3-रास्ता स्टॉपकॉक का उपयोग करना, खारा भरा माइक्रो-ट्यूब और बाहरी जलाशय के लिए कैथेटर के बाहर का अंत कनेक्ट करें।
4. टेल आर्टरी कैथीटेराइजेशन
- बीटाडिन और 70% इथेनॉल का उपयोग करके पूंछ के उदर क्षेत्र को साफ़ करें और 2 सेमी की त्वचा चीरा करें।
- आसपास की संरचनाओं से पूंछ की धमनी काटना और घुमावदार संदंश और धुंधला संदंश का उपयोग कर धमनी के 1 सेमी खंड को अलग करें।
- एक 4.0 काले रेशम सीवन का उपयोग करके, एक ढीला रखेंएक्सपोजर को अधिकतम करने के लिए धमनी के समीपस्थ और बाह्य दोनों किनारों पर टाई करें।
- एक 24 जी अंतःशिरा कैथेटर का प्रयोग करके पूंछ की धमनी को दबाएं और धमनी में कैथेटर को आगे बढ़ाएं।
- समीपस्थ संयुक्ताक्षर के साथ पोत (कैथेटर सिर से लगभग 1 सेंटीमीटर) को कैथेटर सुरक्षित रखें, और बाहर का बंधन बाँध लें।
- धमनी दबाव मॉनिटरिंग डिवाइस में कैथेटर के बाहर का हिस्सा कनेक्ट करें।
5. रीढ़ की हड्डी इस्किमिया की प्रेरण
- कैथीटेराइजेशन पूर्ण होने के बाद, 2 फ़्रेड को अग्रिम करें। गुब्बारे से छिद्रित कैथेटर उतरते हुए छाती वाले महाधमनी में इतना है कि कैथेटर की नोक बाएं उपक्लावियन धमनी तक पहुंचता है।
- प्रविष्टि साइट से 10 सेमी की गहराई तक डालें।
- कैरिटि कैथेटर में 100 यूनिट / एमएल की एकाग्रता में हेपरिन की 150 इकाइयां इंजेक्ट करें।
- 0.05 एमएल खारा के साथ कैथेटर गुब्बारा बढ़ाना।
- इसके साथ ही, रक्त को बाह्य रक्त कंटेनर में सी से निकालेंअरोपीड धमनी 80 एमएमएचजी को समीपस्थ धमनी दबाव को विनियमित करने के लिए।
- धमनियों के दबाव की निगरानी प्रणाली को 3-रास्ता बंद मुर्गा के शेष लुमेन में जोड़ दें, और धमनी दबाव की निगरानी के साथ रक्त वाहिकाओं की मात्रा को नियंत्रित करें।
- एक अचानक कमी और बाहरी धमनी दबाव का निरंतर नुकसान करके महाधमनी अवरोधन की सफलता की पुष्टि करें।
- 9, 10 या 11 मिनट की महाधमनी अवरोधन के बाद, फोगर्टी कैथेटर बैलून को विसर्जित करें, और सूखा हुआ रक्त को पुन: संयोजन करें।
6. पोस्ट सर्जिकल केयर और न्यूरोलॉजिक एसेसमेंट
- पूंछ की धमनी के माध्यम से धमनियों के दबाव की निगरानी करते समय, ऊर्ध्वाधर और कैरिटिड धमनियों से कैथेटर निकालें और रेशम के साथ घावों को बंद करें।
- पुष्टि करने के बाद कि सामान्य दबाव को सामान्य श्रेणी में बहाल किया जाता है, पूंछ की धमनी से कैथेटर निकालें और घाव को बंद करें।
- संज्ञाहरण से वसूली के बाद, चूहा को उसके पिंजरे पर वापस लौटें।
- हाय का आकलन करेंमोटर घाटे सूचकांक ( तालिका 1 ) का प्रयोग करते हुए सर्जरी के बाद 24 घंटे में एन डी अंग मोटर समारोह। मोटर घाटे सूचकांक को आकलन स्कोर के योग के रूप में परिभाषित किया गया है और प्लेसिंग / स्टेपिंग रिफ्लेक्स स्कोर दिया गया है। 6 की एक मोटर खपत सूचकांक अधिकतम घाटा इंगित करता है
7. हिस्टॉपैथोलिक मूल्यांकन
- न्यूरोलॉजिक मूल्यांकन के बाद, मुखौटा वितरित आइसफ्लुरेन के साथ चूहों को संवेदनाहट करते हैं, एनास्थेसिया के तहत 100 एमएल हेपरिनाइज्ड खारा के साथ ट्रांसकार्डियल पेर्फ्युसन द्वारा उन्हें बलिदान करते हैं, और रीढ़ की हड्डी को निकालते हैं। 8
- पैराफिन में कांबी कशेरुक 3-5 के स्तर से कॉर्ड अनुभागों को एम्बेड करें।
- हेमटैक्साइलिन और ईओसिन (एच एंड ई) के साथ अनुप्रस्थ खंडों को दाग़े।
- माइक्रोस्कोप के तहत मोटर न्यूरॉन की चोट का निरीक्षण करें। 9
8. सांख्यिकी विश्लेषण
- सामाजिक विज्ञान संस्करण के लिए सांख्यिकीय पैकेज का उपयोग सांख्यिकीय विश्लेषण करें 20. मोटर डीईएफतीन समूहों के आईसीआईटी सूचकांक की तुलना कुस्ककल-वालिस परीक्षण से की गई थी, उसके बाद मैन-व्हिटनी यू -टेस्ट ए पी- वेल्यू <0.05 सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण माना जाता है।
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Representative Results
रीढ़ की हड्डी की कमी के दौरान, महाधमनी अवरोध 9 मिनट (एन = 3), 10 मिनट (एन = 3), या 11 मिनट (एन = 3) के लिए किया गया था। चूहों में मोटर खराबी सूचक तालिका 2 में प्रस्तुत किया गया है। 9 मिनट के महाधमनी अवरोधन से चूहों ने हिंद-अंग में हल्के और प्रतिवर्ती मोटर हानि दिखायी थी। उंगलियां 10 मिनट के महाधमनी अवरोध के अधीन होती हैं जो कि मध्यम मोटर घाटे के साथ प्रस्तुत की जाती हैं, लेकिन पूरी तरह से पक्षाघात नहीं होता है। चूहों कि 11 मिनट के अवरोधन समय पूर्ण और लगातार पक्षाघात प्रदर्शित किया।
एच एंड ई के साथ दाग रीढ़ की हड्डी के विभागों की प्रतिनिधि तस्वीरों को चित्रा 1 में दिखाया गया है। रीढ़ की हड्डी के हिस्सों में मोटर न्यूरॉन्स अधिक चूहे में महाधमनी अवरोधन की छोटी अवधि के अधीन संरक्षित थे।
चित्रा 1 हिस्टोलॉजिक परीक्षारीढ़ की हड्डी की धाराओं का प्रयोग
मोटर न्यूरॉन्स अधिक चूहे में महाधमनी अवरोध (मूल आवर्धन, 200 एक्स) की छोटी अवधि के अधीन बनाए गए थे। सभी चित्रों में स्केल बार = 50 माइक्रोन इस आंकड़े के एक बड़े संस्करण को देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें
| आकलन (निचले हिस्सों के साथ चलना) | प्रतिस्थापन / स्थानांतरित करना |
| 0: सामान्य (सममित और समन्वित आकलन) | 0: सामान्य |
| 1: चलने पर शरीर के नीचे पैर की उंगलियां, लेकिन एनेक्सिया मौजूद हैं | 1: कमजोर |
| 2: अंगुली-चलना | 2: कोई कदम नहीं |
| 3: निचले हाथों में आंदोलन, लेकिन दस्तक-चलने में असमर्थ | |
| 4: कोई आंदोलन, निचले हाथों से निकलता है |
सारणी 1. आकलन और रखरखाव का मूल्यांकन / कदम पलटा
| महाधमनी अवरोधन समय | सर्जरी के बाद 24 घंटे |
| 9 मिनट (एन = 3) | 2 (2-3) |
| 10 मिनट (एन = 3) | 4 (4-4) |
| 11 मिनट (एन = 3) | 5 (5-6) |
तालिका 2. मोटर घाटे सूचकांक मूल्यों को मध्य (इंटरक्वैटाइल रेंज) के रूप में प्रस्तुत किया जाता है
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Discussion
वर्तमान अध्ययन में, हमने टेरा और मार्सला के विधि 5 पर आधारित स्पाइनल कॉर्ड इस्किमिया का चूहा मॉडल दिखाया है जो महाधमनी अवरोधन समय के आधार पर हिंद अंग में मोटर घाटे के चर डिग्री को प्रेरित करता है।
महाधमनी अवरोध की लंबाई मोटर घाटे की डिग्री को प्रभावित कर सकती है। यदि महाधमनी अवरोधन का समय अधिक है, तो मोटर घाटा अधिक गंभीर हो जाता है। इस प्रकार, शोधकर्ता इस मॉडल में महाधमनी अवरोधन समय को नियंत्रित करके एक निश्चित डिग्री मोटर घाटे को प्राप्त कर सकते हैं।
हमारे मॉडल में आम कैरोटिड धमनी और उदर धमनी के बंधन शामिल है, और इन धमनियों के बंधन से उत्पन्न न्यूरोलोगिक घाटे की संभावना एक संभावित चिंता है। हालांकि, चूहों में कुशल संपार्श्विक नेटवर्क सिस्टम हैं इस प्रकार, जब मन्या धमनी या फेफड़े धमनी ligated है, पर्याप्त रक्त प्रवाह व्यापक संपार्श्विक नेटवर्क द्वारा प्रदान किया जा सकता है। एकतरफा कार्ती डी धमनी अवरोधन मस्तिष्क के रक्त प्रवाह पर केवल मामूली प्रभाव का उत्पादन करने के लिए सूचित किया जाता है 10 , 11 हालांकि एकतरफा कैरोटिड धमनी रोधी चूहों में स्ट्रोक पैदा कर सकती है, यह केवल तभी होती है जब गंभीर प्रणालीगत हाइपोक्सिया के साथ। 12 हमारे प्रयोग के दौरान, कोई प्रणालीगत हाइपोक्सिया नहीं हुआ और मस्तिष्क रोधगलन के सूचक के साथ न्यूरोलॉजिकल घाटे के साथ प्रस्तुत चूहे में से कोई भी नहीं। इसके अलावा, जब चूहों की ऊर्ध्वाधर धमनी लंगड़ा होती है, संपार्श्विक संचलन हिंद अंग मांसपेशियों को पर्याप्त रक्त प्रवाह प्रदान करता है। 13 यह संपार्श्विक संचलन हिंद अंग की मांसपेशियों को पर्याप्त रक्त प्रवाह प्रदान करता है जब वे आराम कर लेते हैं, लेकिन व्यायाम के दौरान पर्याप्त प्रवाह प्रदान नहीं करता है। 14
इसके अलावा, स्पाइनल कॉर्ड इस्किमिया के दौरान समीपस्थ धमनी दबाव मोटर घाटे के विकास को प्रभावित करता है। पिछले अध्ययन के मुताबिक,रिफ "> 5 संधारित्र रक्त की आपूर्ति लगभग 40 एमएमएचजी के समीपस्थ धमनियों के दबाव में चूहे के रीढ़ की हड्डी के इस्किमिया मॉडल में महाधमनी क्लैंपिंग के दौरान गायब हो गई थी। इस प्रकार, बाद के अध्ययनों में रीढ़ की हड्डी की इस्किमिया के दौरान 40 एमएमएचजी पर समीपस्थ रक्तस्रावी दबाव बनाए रखा। 9 , 15 , 16 , हालांकि, इस प्रोटोकॉल में, हमने महाधमनी अवरोधन के दौरान 80 मिमीएचजी पर समानामी धमनियों का दबाव बनाए रखा क्योंकि यह रीढ़ की हड्डी के दौरान पर्याप्त रीढ़ की हड्डी के छिड़काव के संरक्षण के लिए 80 एमएमएचजी या उससे अधिक का औसत धमनी दबाव बनाए रखने के लिए अनुशंसित है। क्लिनिकल प्रैक्टिस में आइस्केमिया, 17 हालांकि इसमें एक अंतर हो सकता है कि मनुष्य और कृन्तकों के बीच एक पर्याप्त समीपस्थ दबाव क्या होता है।
रीढ़ की हड्डी vasculature और चूहे और मनुष्यों की संपार्श्विक प्रणाली समान हैं, 6 , 7 जो चूहों को एक प्रयोगात्मक रीढ़ की हड्डी की इस्किमिया मॉडल के लिए उपयुक्त विकल्प बनाती है। हालांकि, यह छूट नहीं दी जानी चाहिए कि परिणाम प्रजातियों के अनुसार भिन्न हो सकते हैं जिनमें रीढ़ की हड्डी की ischemia होती है।
अंत में, शोधकर्ता आसानी से रीढ़ की हड्डी के इस्किमिया के इस चूहे मॉडल को अपनाने और अत्यधिक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य निष्कर्ष प्राप्त कर सकते हैं। इसके अलावा, वे उत्पादित मोटर घाटे की मात्रा को अलग करने के लिए महाधमनी अवरोधन समय को संशोधित कर सकते हैं। जैसे, यह मॉडल थोरोकोआडोडोमोनियल एओर्टिक एन्यूरिज्म के बाद न्यूरोलॉजिक जटिलताओं के अंतर्निहित रोग विज्ञान की जांच के आगे के अध्ययन की सुविधा प्रदान कर सकता है, और इन जटिलताओं के विरुद्ध न्यूरोप्रोटेक्टेक्टेक रणनीतियों के विकास की अनुमति दे सकता है।
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Disclosures
लेखकों के पास कोई प्रतियोगी वित्तीय हित नहीं है इस काम को कोरियाई सरकार के राष्ट्रीय अनुसंधान संस्थान से अनुदान 2012R1A1A3014010 द्वारा समर्थित किया गया था।
Acknowledgments
लेखकों के पास कोई स्वीकार नहीं है।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Fogarty Arterial Embolectomy catheter | Edward Life Sciences | 120602F | a balloon-tipped catheter inserted into the femoral artery |
| BD Insyte-N Autoguard Shielded IV catheter | BD | 381411 | 24-gauge intravenous catheter |
| 50 mL syringe | KOREA VACCINE | KOVAX-SYRINGE 50mL | Facial mask |
| 1 mL syringe | KOREA VACCINE | KOVAX-SYRINGE 1ml | |
| Recal probe | HARVARD APPARATUS | 50-7221F | Rectal probe for temperature monitoring |
| Micro dissecting spring scissor | Jeung do bio & Plant co.LTD. | JD-S-10 | Micro-scissor |
| SCISSOR (SHARP-SHARP) | Jeung do bio & Plant co.LTD. | S-51-12-S | Scissors |
| Retractor | Jeung do bio & Plant co.LTD. | JD-S-74A | Retractor |
| Micro forcep | Jeung do bio & Plant co.LTD. | JD-S-29 | Micro-forceps |
| MOSQUITO FORCEP (Curved) | Jeung do bio & Plant co.LTD. | S-44-CPK | Curved forceps |
| DRESSING FORCEP | Jeung do bio & Plant co.LTD. | S-37-16S | Blunted forceps |
| 4/0 black silk | Woori Medical | S431 | 4.0 black silk suture |
| 3-WAY STOCK | Seonwon Medcal | D-98-01 | 3-way stopcock |
| Patient monitor | PHILIPS | MP20 | The arterial pressure monitoring device. |
| Heating blanket | Self production | Heating blanket | |
| Microtube and external reservoir | Self production | Microtube and external reservoir | |
| Heparin | JW Pharmaceutical | Heparin | |
| 0.9% NS 1000ml | JW Pharmaceutical | Normal saline | |
| Isoflurane | Hana Med | Isoflurane |
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