Diese Studie enthüllt den Mechanismus von Trichosanthes-Fritillaria thunbergii bei der Behandlung von Lungenadenokarzinomen auf der Grundlage von Netzwerkpharmakologie und experimenteller Überprüfung. Die Studie zeigt auch, dass der PI3K/AKT-Signalweg eine wichtige Rolle bei der Wirkung von Trichosanthes-Fritillaria thunbergii bei der Behandlung des Lungenadenokarzinoms spielt.
Unser Ziel war es, den Mechanismus von Trichosanthes-Fritillaria thunbergii bei der Behandlung des Lungenadenokarzinoms (LUAD) auf der Grundlage von Netzwerkpharmakologie und experimenteller Verifizierung zu untersuchen. Die wirksamen Komponenten und potentiellen Targets von Trichosanthis und Fritillaria thunbergii wurden mittels Hochdurchsatz-Experiment und referenzgeführter (HERB) Datenbank der Traditionellen Chinesischen Medizin und einer SEA-Datenbank (Similarity Ensemble Approach) gesammelt, und die LUAD-bezogenen Targets wurden von den Datenbanken GeneCards und Online Mendelian Inheritance in Man (OMIM) abgefragt. Ein Drug-Component-Disease-Target-Netzwerk wurde mit der Cytoscape-Software aufgebaut. Protein-Protein-Interaktionsnetzwerke (PPI), Genontologie-Funktionen (GO) und Analysen der Kyoto-Enzyklopädie der Gene und Genome (KEGG)-Signalwege wurden durchgeführt, um Kernziele und Schlüsselsignalwege zu erhalten. Für die anschließende experimentelle Validierung wurden ein wässriger Extrakt aus Trichosanthes-Fritillaria thunbergii und A549-Zellen verwendet. Durch die HERB-Datenbank und die Literaturrecherche wurden 31 wirksame Verbindungen und 157 potenzielle Zielgene von Trichosanthes-Fritillaria thunbergii untersucht, von denen 144 regulatorische Ziele von Trichosanthes-Fritillaria thunbergii bei der Behandlung des Lungenadenokarzinoms waren. Die GO-funktionelle Anreicherungsanalyse zeigte, dass der Wirkmechanismus von Trichosanthes-Fritillaria thunbergii gegen das Lungenadenokarzinom hauptsächlich in der Proteinphosphorylierung besteht. Die Analyse der Anreicherung des KEGG-Signalwegs deutete darauf hin, dass die Behandlung des Lungenadenokarzinoms mit Trichosanthes-Fritillaria thunbergii hauptsächlich den PI3K/AKT-Signalweg beinhaltet. Die experimentelle Validierung zeigte, dass ein wässriger Extrakt von Trichosanthes-Fritillaria thunbergii die Proliferation von A549-Zellen und die Phosphorylierung von AKT hemmen kann. Durch Netzwerkpharmakologie und experimentelle Validierung konnte nachgewiesen werden, dass der PI3K/AKT-Signalweg eine wichtige Rolle bei der Wirkung von Trichosanthes-Fritillaria thunbergii bei der Behandlung des Lungenadenokarzinoms spielt.
Lungenkrebs bezieht sich auf bösartige Tumoren, die von der Bronchialschleimhaut der Lunge ausgehen, einschließlich Plattenepithelkarzinom, Adenokarzinom, großzelligem Karzinom und kleinzelligem Karzinom1. Das Lungenadenokarzinom (LUAD) ist die häufigste Form von Lungenkrebs und macht etwa 40 % aller Lungenkrebsfälleaus 2. Die meisten Patienten werden in einem fortgeschrittenen Stadium diagnostiziert oder haben Fernmetastasen und verlieren so die Möglichkeit einer Operation3. In der aktuellen klinischen Behandlung ist die gleichzeitige Radiochemotherapie die häufigste Strategie zur Behandlung von LUAD, ihre Anwendung ist jedoch aufgrund schwerwiegender Nebenwirkungen begrenzt4.
Die Traditionelle Chinesische Medizin (TCM) kann die klinischen Symptome von LUAD-Patienten wirksam lindern und die durch Strahlen- und Chemotherapie verursachten Nebenwirkungen reduzieren und ist damit zu einem Forschungs-Hotspot geworden 5,6,7. In der traditionellen chinesischen Medizin gehört Lungenkrebs in die Kategorie der “Lungenansammlung” und “Lungensteinwasser”. Der Mangel an Qi und das Zusammenspiel von Schleim, Stase und Gift sind wichtig für die Pathogenese von Lungenkrebs. Daher sind die Tonisierung des Qi und die Beseitigung von Schleim und Blutstau die wichtigsten klinischen Behandlungsmethoden8 für Lungenkrebs gemäß der TCM-Theorie9. Trichosanthes kirilowii Maxim (Gualou) und Fritillaria thunbergii Miq (Zhebeimu) stellen ein häufiges Medikamentenpaar bei der Behandlung von Lungenkrebs dar, und diese Kombination hat die Wirkung, die Hitze zu beseitigen und den Schleim zu reduzieren10,11,12. Der Wirkmechanismus ist jedoch noch unklar, und es muss noch weiter geforscht werden.
Die Netzwerkpharmakologie ist eine umfassende, auf der Theorie der Systembiologie und der multidirektionalen Pharmakologie basierende Methode, die darauf abzielt, komplexe Netzwerkbeziehungen zwischen mehreren Medikamenten und Krankheiten aufzudecken13. Traditionelle chinesische Verschreibungen haben die Eigenschaften, dass sie Mehrkomponenten- und Multi-Target-Verschreibungen sind, was bedeutet, dass sie sich sehr gut für das Studium der Netzwerkpharmakologie eignen14,15. In jüngster Zeit hat sich die Netzwerkpharmakologie zu einem leistungsstarken Ansatz bei der Erforschung von TCM-Rezepturen entwickelt und ist zu einem Forschungs-Hotspot geworden16,17.
Nach unserem besten Wissen werden jedoch alle Forschungen zur Netzwerkpharmakologie als Text dargestellt. Die Präsentation dieser Technologie per Video wird die Lernschwelle erheblich verringern und die Förderung dieser Technologie erleichtern, was einer der Vorteile dieses Artikels ist. In dieser Studie haben wir Trichosanthes-Fritillaria thunbergii gegen Lungenadenokarzinome als Beispiel genommen, um eine netzwerkpharmakologische Vorhersage und experimentelle Validierung durchzuführen.
Im Allgemeinen umfasst eine vollständige netzwerkpharmakologische Studie die Identifizierung von Wirkstoffen aus Datenbanken, die Erfassung von Zielen, die den Wirkstoffen und Krankheiten entsprechen, den Aufbau eines Netzwerks von Wirkstoffkomponenten-Krankheitszielen und die Vorhersage von Kernzielen und -wegen. Die Assoziation zwischen Wirkstoffen und Kernproteinen (molekulares Docking) wird mit Hilfe von Computertechnik vorläufig vorhergesagt und die abschließende Verifizierung mit einem Experiment durchgeführt.<…
The authors have nothing to disclose.
Diese Studie wurde durch das Innovation Training Program der Beijing University of Chinese Medicine (Nr.: 202110026036) unterstützt.
0.25% trypsin-EDTA | Gibco | R001100 | |
A549 cell line | Procell | CL-0016 | |
AKT antibody | CST | 4691S | |
BCA Protein Assay Kit | Solarbio | PC0020 | |
Chemiluminescence detection system | Shanghai Qinxiang Scientific Instrument Factory | ChemiScope 6100 | |
Dulbecco's modified eagle medium (DMEM) | Solarbio | 11995 | |
Enhanced chemiluminescence (ECL) kit | ABclonal | RM00021 | |
Fetal bovine serum | ScienCell | 0025 | |
HRP Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) | ABclonal | AS014 | |
MTS assay kit | Promega | G3580 | |
p-AKT antibody | CST | 6040S | |
Penicillin streptomycin | Gibco | C14-15070-063 | |
Phenylmethanesulfonyl fluoride (PMSF) | Solarbio | P0100 | |
Phosphatase inhibitor | Beyotime | P1081 | |
Phosphate buffered saline (PBS) | Solarbio | P1020 | |
Polyvinylidene difluoride (PVDF) membranes | Millipore | ISEQ00010 | |
RIPA lysis solution | Solarbio | R0010 | |
Rotary evaporator | Shanghai Yarong Biochemical Instrument Factory | RE52CS-1 | |
Vacuum freeze-drying mechanism | Ningbo Scientz Biotechnology | SCIENTZ-10 | |
β-Actin antibody | ABclonal | AC026 |