Summary
Nous présentons ici un protocole d’électroacupuncture (EA) efficace et rapide chez la souris ou le jeune rat à l’aide d’un support imprimé en trois dimensions (3D). Cette technique permet une opération simultanée sur plusieurs animaux, ce qui permet de gagner du temps et d’augmenter l’efficacité expérimentale.
Abstract
L’électroacupuncture (EA) est largement utilisée pour traiter divers problèmes de santé. Cependant, le mécanisme sous-jacent du traitement de l’EA reste flou, ce qui entrave sa promotion. L’étude mécaniste nécessite des modèles de souris ou de rats pour résoudre ce problème. Cependant, ces animaux n’obéissent pas au processus expérimental, qui prend du temps. Pour résoudre ces problèmes, nous avons conçu un fixateur de corps de petits animaux imprimé en 3D pour améliorer l’efficacité des expériences sur les animaux d’EA. Cette vidéo montre en détail comment utiliser le fixateur pour effectuer une EA en masse sur des souris ou de jeunes rats. Pour la sélection des points d’acupuncture, la ligne oblique antérieure du vertex temporal (tête MS6) et le point Tianshu (ventre ST25) ont été choisis pour vérifier l’effet du dispositif de fixation avec un positionnement en décubitus ventral et en décubitus dorsal. L’utilisation du support pour petits animaux imprimé en 3D permet d’immobiliser et de traiter plusieurs rongeurs simultanément, ce qui réduit le temps et les ressources nécessaires à l’expérience. Cette technique pourrait être appliquée à d’autres modèles animaux en imprimant en 3D différentes tailles et pourrait potentiellement être utilisée pour diverses conditions de fixation. L’appareil est bénéfique pour la promotion de la recherche scientifique expérimentale en EA.
Introduction
La thérapie d’électroacupuncture (EA) est une méthode unique dans laquelle des aiguilles d’acupuncture sont insérées dans le cuir chevelu et connectées à une électro-machine pour stimuler des points spécifiques1. Contrairement à la stimulation manuelle, l’EA permet un meilleur contrôle de la stimulation en stabilisant des fréquences et des formes d’onde spécifiques pour obtenir des effets thérapeutiques optimaux2. Selon une enquête, 81,2 % des établissements médicaux en Chine utilisent l’EA ou l’acupuncture manuelle pour traiter la paralysie cérébrale, la névralgie, la paralysie faciale et d’autres affections. Malgré sa popularité, le mécanisme spécifique d’efficacité de l’EA est encore inconnu, ce qui a entravé sa promotion et son application dans le traitement de réadaptation des maladies neurologiques 1,2,3. D’autres recherches sont nécessaires pour bien comprendre le mécanisme de l’efficacité de l’EA et promouvoir son utilisation dans le traitement de réadaptation des maladies neurologiques.
Alors que l’influence de l’acupuncture s’étend dans le monde entier, de nombreuses études ont déjà étudié les mécanismes de l’EA réalisée sur des modèles de rongeurs, tels que des modèles de rats ou de souris 1,2,3. Plusieurs problèmes sont souvent rencontrés dans les expériences d’EA sur les rongeurs. La première est de savoir comment immobiliser les rongeurs sans anesthésie, car l’acupuncture pratiquée sur des sujets éveillés reflète davantage la pratique clinique. De plus, certaines expériences exigent que les animaux soient éveillés pour observer les effets du traitement 2,3. Un autre défi consiste à localiser avec précision les points d’acupuncture chez la souris ou le rat qui correspondent à ceux de l’homme. La localisation précise des points d’acupuncture chez les rongeurs expérimentaux est actuellement étudiée par de nombreux chercheurs 4,5. Dans ce protocole, MS6 et ST25 ont été sélectionnés, qui ont été clairement définis chez les rongeurs par la transformation de la localisation anatomique humaine. MS6 est couramment utilisé pour le traitement de certaines maladies du cerveau, telles que la maladie de Parkinson6. Le ST25 est généralement utilisé pour traiter les problèmes gastro-intestinaux, tels que la diarrhée7. Ces deux points d’acupuncture ont été choisis principalement pour démontrer comment les rongeurs peuvent être efficacement immobilisés en position couchée et couchée. De plus, ces points d’acupuncture ont été largement étudiés et offrent des informations importantes à des fins de recherche 6,7.
La méthode précédente d’immobilisation d’un seul rat pour des expériences est non seulement chronophage, mais aussi difficile à manipuler par une seule personne8. De plus, en raison de la non-coopération des animaux, le taux de réussite est relativement faible dans la pratique. Par conséquent, il est essentiel de créer un modèle animal facile à établir avec des caractéristiques stables pour améliorer l’efficacité de l’expérience. Dans cet article, un support imprimé en 3D pour les petits animaux a été présenté qui pourrait facilement immobiliser plusieurs rongeurs, entraînant une restriction motrice. L’objectif de cet article est d’administrer des traitements EA à un lot de jeunes rats ou souris, en se concentrant sur les stratégies de restriction en vrac des souris, l’identification et la stimulation des points d’acupuncture MS6 et ST25.
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Protocol
Les expériences de cette étude sont conformes au principe des « 3R » de l’éthique animale et ont été approuvées par le Comité du bien-être des animaux de laboratoire et des ethnies de l’Université de médecine de l’armée (AMUWEC20234543).
1. Préparation du dispositif de fixation du corps des rongeurs
- Concevoir un porte-petit animal basé sur le brevet de modèle d’utilitéchinois 9.
- Produisez l’appareil grâce à la technologie d’impression 3D.
- Préparez une corde de 2 m de long et divisez-la en 6 cordes. Enfilez ces 6 cordes dans les trous du fixateur. Utilisez la boucle à ressort pour fixer les extrémités de la corde, facilitant ainsi le réglage de la taille de la boucle.
REMARQUE : Le fixateur peut être fabriqué par n’importe quelle entreprise équipée de la technologie d’impression 3D sur la base d’un dessin de conception. Le dessin de conception de l’appareil est illustré à la figure 1. Le fixateur utilisé dans cette étude a été produit par une imprimante 3D par une méthode d’impression appelée modélisation par dépôt de fil fondu (FDM), également connue sous le nom de fabrication de filaments fondus (FFF)10. Cette méthode de fabrication additive imprime les pièces de la conception couche par couche en déposant sélectivement le matériau sous forme fondue dans un chemin prédéterminé. Le processus utilise des polymères thermoplastiques qui se présentent sous forme de filaments pour créer la structure physique finale. L’appareil d’immobilisation utilisé dans cette étude peut sécuriser trois animaux simultanément, nécessitant six cordes, chaque animal nécessitant une paire de cordes : une pour le cou et une pour le tronc.
2. Préparation des rongeurs
- Achetez 3 rats Sprague-Dawley (10-40 g, âgés de 7 à 45 jours) et 3 souris C57 BL/C (5-40 g).
- Élevez les animaux dans une pièce avec un cycle jour/nuit de 12 heures, une température ambiante de 21-23 °C et une humidité de 45 % à 60 %. Désinfectez et ventilez régulièrement l’environnement d’alimentation et laissez les animaux manger et boire librement.
3. Fixation des rongeurs au fixateur (position couchée)
- Placez la tête du rongeur dans le trou en forme de U devant le fixateur, avec le rongeur en position couchée. Passez le corps du rongeur à travers deux boucles de corde.
- Attachez les cordes autour du cou et de l’abdomen du rongeur, en veillant à ce qu’il ne puisse pas s’échapper, mais pas trop serré pour ne pas provoquer de détresse respiratoire et la mort.
- L’étape clé consiste à fixer le manche en place. Laissez un espace de 2 à 5 mm entre le cou du rongeur et la corde. Assurez-vous que la corde n’est pas trop serrée pour que les animaux puissent s’étrangler ou trop lâche pour s’échapper.
- Fixez les autres rongeurs de la même manière dans l’appareil.
- Répétez les étapes de fixation ci-dessus (3.1-3.2) pendant 3 jours pour minimiser la réaction de stress potentielle causée par la procédure de fixation. Répétez la procédure de fixation pendant 3 jours consécutifs, chaque séance durant 5 minutes par jour.
REMARQUE : Pour nous assurer que les rongeurs n’étaient pas trop stressés pendant la procédure de fixation, nous avons répété la procédure pendant 3 jours consécutifs. Chaque séance durait 5 minutes par jour, ce qui donnait suffisamment de temps aux souris ou aux rats pour s’acclimater à la procédure et minimisait tout inconfort potentiel. - Strat EA du jour 4.
- Pour éviter la propagation de maladies, plongez un coton-tige stérile ou une boule dans de l’alcool à 75 % et essuyez soigneusement le support pour le nettoyer et le désinfecter avant et après chaque utilisation. Utilisez des gants et d’autres équipements de protection pour éviter les risques potentiels pour la santé lorsque vous manipulez des rongeurs.
4. Réalisation d’EA chez la souris ou les jeunes rats (MS6)
- Choisissez des aiguilles d’acupuncture stériles jetables de 0,25 mm x 13 mm.
- Trouvez les points d’acupuncture par emplacement anatomique et confirmez la profondeur d’insertion au niveau du point d’acupuncture.
REMARQUE : MS6 est situé sur le côté latéral de la tête. Cette région de la tête passe par la connexion entre Shencong (Ex-hn1) et Xuanli (GB6), également connue sous le nom de pariétal antérieur (Du21). MS6 correspond à l’expression du gyrus précentral du cortex cérébral sur le cuir chevelu. Ex-hn1 est situé à 0,5 cm derrière le point médian de la ligne médiane antéro-postérieure de la tête. GB6 est situé au milieu de l’avant de l’oreille et de l’angle final de l’œil. Le nerf supratrochléaire supérieur, le nerf supraorbitaire, le nerf occipital et le nerf auriculotemporal y sont distribués. MS6 est principalement utilisé pour traiter les accidents vasculaires cérébraux et l’encéphalopathie, tels que les troubles moteurs. - Tournez lentement et insérez des aiguilles stériles bilatérales dans MS6 à une profondeur de 3/5 du Shenchong antérieur (Exhn1) au Xuanli (GB6) le long de la sous-cutanée chez 3 rongeurs, respectivement.
- Connectez un côté du câble de connexion à l’instrument EA.
- Connectez un autre côté du câble de connexion contenant les clips EA positifs et négatifs aux tiges d’aiguille d’acupuncture sur les MS6 gauche et droit.
- Allumez l’instrument EA.
- Tournez le bouton (Fonction/Choisir un commutateur) pour régler la fréquence et le mode de fonction.
- Réglez la fréquence sur 10 Hz et choisissez un mode d’onde continue .
- Tournez le bouton correspondant (Ajuster l’intensité) pour régler l’intensité. Chaque bouton de réglage de l’intensité contrôle la force du courant des rongeurs du fil connecté en dessous. Ajustez l’intensité du courant à la plage acceptable de rongeurs, généralement 1-2 mA, pendant 5 minutes.
REMARQUE : Il est important de surveiller la respiration et le comportement des rongeurs pendant la procédure pour s’assurer qu’ils ne ressentent pas de détresse ou d’inconfort. Si le rat semble se débattre ou souffrir, la procédure doit être arrêtée immédiatement.
5. Fixation des rongeurs au fixateur (position couchée)
- Placez les têtes du rongeur dans le trou en forme de U devant le fixateur, avec le rongeur en position couchée. Passez le corps du rongeur à travers deux boucles de corde.
- Attachez la corde autour du cou et de l’abdomen du rongeur, en vous assurant qu’il ne peut pas s’échapper, mais pas trop serré pour ne pas causer de détresse respiratoire et la mort.
REMARQUE : Les points à noter lors de la fixation sont les mêmes qu’à l’étape 3.2. - Fixez les autres rongeurs de la même manière.
- Comme à l’étape 3.4, répétez les étapes de fixation ci-dessus pendant 3 jours pour réduire la réponse au stress des rongeurs.
- Strat EA du jour 4.
REMARQUE : La désinfection est effectuée comme mentionné à l’étape 3.6.
6. Exécution de l’EA (ST25)
- Choisissez des aiguilles d’acupuncture stériles jetables de 0,25 mm x 13 mm.
- Trouvez les points d’acupuncture par emplacement anatomique et confirmez la profondeur d’insertion au niveau du point d’acupuncture.
REMARQUE : ST25 est situé au niveau de l’ombilic. Pour positionner ce point chez les rongeurs, il faut d’abord mesurer la longueur de la patte du rongeur. ST25 est situé aux 2/3 de la longueur de la patte à côté du nombril. Par exemple, si la patte mesurée du rongeur est de 0,6 cm, alors ST25 est situé à 0,4 cm à droite et à gauche de l’ombilic. - Tournez et pénétrez lentement les aiguilles stériles dans ST25 bilatérales à une profondeur de 4 à 8 mm sur 3 rongeurs, respectivement.
- Connectez un côté du câble de connexion à l’instrument EA.
- Connectez un autre côté du câble de connexion contenant les clips EA positifs et négatifs aux tiges d’aiguille d’acupuncture à gauche et à droite ST25.
- Allumez l’instrument EA.
- Tournez le bouton (Fonction/Choisir un commutateur) pour régler la fréquence et le mode de fonction.
- Réglez la fréquence sur 10 Hz et choisissez le mode onde continue.
- Tournez le bouton correspondant (Ajuster l’intensité) pour régler l’intensité. Chaque bouton de réglage de l’intensité contrôle l’intensité du rat du fil connecté en dessous. Ajustez l’intensité du courant à la plage acceptable de rongeurs, généralement 1-2 mA, pendant 5 minutes.
NOTE : Les observations étaient les mêmes qu’à l’étape 4.6.
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Representative Results
Le plan d’étage du fixateur de corps d’animal que nous avons conçu est illustré à la figure 1. De plus, un modèle graphique 3D de ce fixateur a été soumis pour fournir une vue complète de la conception (dossier supplémentaire 1). Il s’agit d’un dispositif qui permet d’immobiliser 3 rongeurs et d’effectuer simultanément des EA. Les rats et les souris étaient confinés au fixateur à l’état éveillé, et les positions couchées et couchées pouvaient être fermement fixées sans blesser les rongeurs (Figure 2 et Figure 3). À l’aide du fixateur, les points d’acupuncture MS6 et ST25 ont été localisés avec succès et piqués chez les rongeurs (Figure 4 et Figure 5).
Pour contrôler les variables et valider l’efficacité de cette approche de fixation, un expérimentateur a immobilisé 3 rats (vidéo 1) ou 3 souris pendant trois essais consécutifs dans une étude comparative (tableau 1). Le résultat a démontré que le temps moyen d’immobilisation de 3 rats en position couchée et couchée à l’aide de cet outil était de 77,1 s ± 7,8 s et de 74,9 s ± 8,6 s, respectivement (moyenne ± écart-type). Comme pour 3 souris, le temps moyen d’immobilisation en position couchée et couchée sur le ventre à l’aide de ce fixateur était de 72,0 s ± 10,5 s et de 62,3 ± 4,2 s, respectivement (moyenne ± SD). Les deux groupes de rats et de souris ont été immobilisés avec succès sur l’appareil et ne se sont pas échappés pendant le traitement EA de 5 minutes (Figure 2 et Figure 3). À une intensité de 1 à 2 mA EA, les souris et les rats se sont sentis à l’aise et ne se sont pas débattus violemment. La respiration chez les souris et les rats était stable et aucune mort subite n’est survenue chez les animaux. Après le traitement, les souris et les rats sont restés en bonne santé et ont survécu.
Graphique 1. Plan d’étage du fixateur de rongeurs par lots. (1) Dispositif de support de rongeurs, divisé en trois parties. (2,3) Piliers : utilisés pour fixer les membres des souris ou des jeunes rats. (4) Grotte : utilisée pour fixer la tête. (5) Trou : utilisé pour fixer le cou des jeunes rats. (6) Trou : utilisé pour fixer le corps. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.
Figure 2 : Jeunes rats fixes en position couchée et couchée. (A-C) Traitement EA sur acupoint MS6. (D-F) Traitement EA sur acupoint ST25. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.
Figure 3 : Souris fixes en position couchée et couchée. (A-C) Traitement EA sur l’acupoint MS6. (D-F) Traitement EA sur acupoint ST25. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.
Figure 4 : MS6 dans la région cérébrale. MS6 est situé sur le côté latéral de la tête et est positionné au point de connexion entre Shencong (Ex-hn1) et Xuanli (GB6), également connu sous le nom de région pariétale antérieure (Du21). Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.
Figure 5 : Point bilatéral ST25 en rouge. Le ST25 est situé au niveau de l’ombilic. Positionner ce point chez le rongeur nécessite d’abord de mesurer la longueur de la patte du rongeur. ST25 est situé aux 2/3 de la longueur de la patte à côté du nombril. Par exemple, si la patte de mesure du rongeur est de 0,6 cm, alors le ST25 est de 0,4 à droite et à gauche de l’ombilic. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.
| Essais | Rats | Souris | ||
| Position couchée | Position couchée | Position couchée | Position couchée | |
| (temps en secondes) | (temps en secondes) | (temps en secondes) | (temps en secondes) | |
| Essai 1 | 75.5 | 65.1 | 60.2 | 62.3 |
| Essai 2 | 70.2 | 80.3 | 80.1 | 70.6 |
| Essai 3 | 85.5 | 79.5 | 75.7 | 65.9 |
| Temps moyen (moyenne ± écart-type) | 77,1 ± 7,8 | 74,9 ± 8,6 | 72,0 ± 10,5 | 62,3 ± 4,2 |
Tableau 1 : Temps consacré à la fixation des rats et des souris en position couchée et couchée. Les données (temps en secondes) ont été obtenues par un expérimentateur qui a immobilisé 3 rats et 3 souris pendant 3 essais consécutifs, respectivement. Le temps moyen nécessaire a été déterminé en calculant la moyenne et l’écart-type du temps nécessaire pour les 3 essais.
Fichier supplémentaire 1 : Fichier de conception de fixateur de rongeur de bain imprimé en 3D. Ce modèle 3D peut être déplacé pour obtenir une vue complète à 360° de la conception. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.
Vidéo 1 : Film de la fixation en position couchée et couchée de jeunes rats SD, comme décrit en détail dans la légende de la figure 2 . Cette vidéo montre un expérimentateur retenant 3 rats en position couchée et couchée. Veuillez cliquer ici pour télécharger cette vidéo.
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Discussion
L’électroacupuncture (EA) est une forme d’acupuncture qui implique l’utilisation d’une stimulation électrique sur des aiguilles d’acupuncture11. Cette technique implique l’utilisation de micro-courants d’impulsion d’intensité et de fréquence spécifiques pour stimuler les points d’acupuncture et obtenir des effets thérapeutiques améliorés3. Cependant, le mécanisme de guérison de l’EA est limité et nécessite des recherches fondamentales approfondies pour prouver 1,2,3. Les modèles de rongeurs sont couramment utilisés dans les études de base sur l’EA 8,12,13, et nous visons à fournir une méthode rapide et efficace pour mener ces expériences chez les rats et les souris.
Actuellement, l’expérience EA est confrontée à de nombreux défis. Le principal défi est d’immobiliser efficacement les rongeurs sans anesthésie. L’immobilisation stable des animaux est cruciale et a un impact significatif sur le résultat de l’expérimentation animale. Sinon, les fonctions physiologiques des animaux anesthésiés sont différentes de celles des animaux éveillés, et le traitement clinique d’acupuncture est toujours effectué sur des patients éveillés. Par conséquent, les études expérimentales sur des animaux éveillés sont plus pratiques à des fins cliniques. Auparavant, l’immobilisation avec une plaque de fixation était la méthode préférée, mais elle prenait du temps et ne permettait que l’utilisation d’un seul rongeur14. Les antidémarrages traditionnels nécessitaient également d’attacher les membres du rongeur, ce qui prenait du temps et entraînait souvent des douleurs en raison de la fixation serrée. Plusieurs études ont mis en place du ruban adhésif pour les souris, mais leur capacité à s’échapper facilement pose des défis importants, en particulier lors des procédures d’acupuncture8. Lorsqu’il y a plus de sujets expérimentaux, le fonctionnement par lots est souvent nécessaire pour économiser du temps et des efforts2. Par conséquent, nous avons développé un fixateur de lots de corps de petits animaux imprimé en 3D qui offre plusieurs avantages par rapport aux méthodes de fixation traditionnelles15 : 1) il raccourcit le temps de fixation, améliorant considérablement l’efficacité expérimentale16 ; 2) il est simple et facile à utiliser et n’est pas affecté par des facteurs subjectifs15,16 ; 3) Il a conduit moins nocif pour les rongeurs ; 4) Une fois fixée, l’opération EA peut être réalisée sur plusieurs jeunes rats en même temps, ce qui permet de gagner du temps et d’observer simultanément les résultats du traitement.
L’utilisation de la technologie d’impression 3D pour les études expérimentales de l’EA est une expansion précieuse dans le domaine de la recherche en acupuncture. L’appareil peut être ajusté à n’importe quelle taille lorsqu’il est imprimé en 3D, ce qui permet de réaliser plus efficacement l’acupuncture expérimentale. La modélisation par dépôt de fil fondu (FDM), également connue sous le nom de fabrication de filaments fondus (FFF), une méthode de fabrication additive10, est utilisée pour imprimer en 3D le fixateur. Cet appareil convient non seulement à cette expérience, mais également à la réalisation d’expériences telles que la tomodensitométrie ou l’IRM sur des rongeurs17,18. De plus, il peut également être appliqué à toutes les situations où une fixation en vrac est nécessaire, à l’exception des études d’EA. En raison de la prévalence de la technologie d’impression 3D, cet appareil est facilement disponible. Il peut être fabriqué par un fabricant local d’impression 3D. De plus, ce dispositif de fixation peut être modifié et personnalisé en fonction du dessin de conception. Dans cette étude, le dispositif de fixation est composé de trois sections, chacune capable de fixer un seul rongeur. Si des rongeurs ou d’autres animaux supplémentaires doivent être inclus, l’appareil peut être mis à l’échelle proportionnellement pour accueillir le plus grand nombre. Par exemple, il peut être conçu comme un dispositif pouvant fixer 5 souris ou même comme un dispositif de fixation pour d’autres animaux comme les lapins.
Un autre défi consiste à trouver chez les rongeurs des points d’acupuncture qui correspondent aux humains. Les points d’acupuncture MS6 et ST25 ont été choisis pour examiner les effets de la fixation en décubitus ventral et en décubitus dorsal. De plus, ces deux points d’acupuncture ont été étudiés par de nombreux chercheurs 6,7,19. MS6 est le plus souvent utilisé dans la recherche sur les maladies du cerveau, telles que la maladie de Parkinson, le dysfonctionnement après un accident vasculaire cérébral, etc. 6,13,19. MS6 pourrait améliorer la fonction neurologique des rats souffrant d’un AVC ischémique via la modulation de la voie de signalisation JAK/STAT médiée par l’IL-12 dans une étude précédente13. Le ST25 est généralement utilisé pour le traitement du tractus gastro-intestinal, comme la diarrhée et le syndrome du côlon irritable (SCI)7,12. Une étude antérieure a rapporté que l’EA appliqué uniquement au point ST25 a montré le potentiel d’atténuer l’hypersensibilité viscérale tout en rétablissant la fréquence normale des ondes lentes et le rythme du côlon chez les rats SCI12. Ces deux points d’acupuncture sont également capables de démontrer de manière appropriée les effets du positionnement en décubitus dorsal et couché sur le ventre chez les rongeurs. De plus, ces deux points d’acupuncture ont la signification de l’affichage 6,7,19. Étant donné que ces deux points d’acupuncture ont été étudiés par de nombreux chercheurs, nous fournissons un protocole sur la façon de localiser ces deux points d’acupuncture chez les rongeurs. Il est utile pour les expériences sur les animaux où des études MS6 et ST25 sont menées. Cependant, la présente étude présente certaines limites. Par exemple, la position et la profondeur de l’aiguille ne peuvent pas être mesurées objectivement et peuvent varier en fonction du niveau d’expérience de l’opérateur.
Nos expériences respectent le principe des « 3R » de l’éthique animale et ont été approuvées par le Comité du bien-être des animaux de laboratoire et de l’ethnie de l’Université de médecine de l’armée. L’étape la plus difficile et la plus cruciale de cette expérience est de trouver une méthode fiable et efficace pour immobiliser les rongeurs en toute sécurité. En effet, toute tentative d’évasion ou de mort des rongeurs pendant la stimulation EA de 5 minutes entraînera l’échec de l’expérience. La conception de la grotte avant tire parti de la préférence des rongeurs pour creuser des trous. Placer la tête des rongeurs à l’intérieur de la grotte a pour but d’apporter un confort psychologique. De plus, les cordes utilisées pour attacher la tête et le corps des rongeurs doivent être modérément sûres, ne restant ni excessivement lâches ni trop serrées pour éviter la fuite du rongeur et prévenir la détresse respiratoire. Après la stimulation électrique, les comportements et les réponses des rongeurs ont été soigneusement surveillés. Idéalement, lors de l’application d’un courant de 1 à 2 mA, les rongeurs ne présenteraient pas de lutte agressive ou de vocalisations en réponse à un choc électrique20. Le fixateur peut également être utilisé pour fixer les rongeurs en position couchée sur le dos et sur le ventre et d’autres types de fixations selon les besoins. Il convient à une variété de besoins expérimentaux, et l’opération de fixation est facile à réaliser21. Cependant, cela a conduit à une limitation selon laquelle les animaux de différentes tailles nécessitent un équipement d’immobilisation sur mesure de différentes tailles. Seuls les animaux présentant de légères différences de taille peuvent être immobilisés à l’aide du même appareil. Le fixateur d’immobilisation par lots utilisé dans ce protocole immobilise efficacement et de manière fiable les rongeurs dans la plage de poids de 10 à 40 g. Pour les animaux en dehors de cette gamme de poids, des fixateurs d’immobilisation par lots personnalisés sont nécessaires pour répondre à leurs besoins spécifiques.
De plus, la fixation par lots pour rongeurs imprimée en 3D utilisée pour les opérations d’EA en vrac sur les rongeurs offre une sécurité accrue car elle résiste aux rayures et aux morsures de rongeurs. Les études sur l’EA chez les rongeurs ont fourni des informations précieuses sur les avantages potentiels de cette modalité thérapeutique chez l’homme 1,2,3,6,7,11,14. L’appareil est bénéfique pour la promotion de la recherche scientifique expérimentale en EA. Cette technique permet aux chercheurs de mener des expériences sur les animaux qui nécessitent l’immobilisation des animaux. De plus, il présente l’emplacement exact de ST25 et MS6, qui peut servir de référence pour ceux qui étudient ces deux points d’acupuncture à l’avenir. En fin de compte, cette méthodologie devrait conduire à des modèles animaux précieux pour la recherche sur l’EA.
Le fixateur de souris par lots imprimé en 3D décrit dans cet article offre une méthode simple et efficace pour mener des expériences d’EA chez le rat ou la souris. Sa conception tient compte du confort et de la sécurité des animaux, ainsi que de la nécessité d’une fixation rapide et efficace. Cet appareil a le potentiel d’économiser du temps et des efforts dans la conduite d’expériences sur les animaux, favorisant l’avancement de la recherche en électroacupuncture et, en fin de compte, conduisant à de meilleurs traitements pour diverses maladies.
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Disclosures
Les auteurs ont déclaré qu’il n’existe aucun conflit d’intérêts concurrent.
Acknowledgments
Merci au département de neurochirurgie du deuxième hôpital affilié de l’Université médicale de l’armée pour le soutien du site. Financement : Ce travail a été soutenu par la Fondation des sciences naturelles de Chine (82104696).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 3D printing batch mice fixator | MESH INVENT | Custom made | The fixator produced by 3D printer. The printing method is called fused deposition modeling (FDM), also known as fused filament fabrication (FFF). |
| Electroacupuncture instrument | Hwato, Suzhou Medical Appliance Factory | SDZ-III | www.Hwato-med.com |
| Disposable sterile acupuncture needle | Suzhou Medical Appliance Factory | N/A | 0.25 mm x 13 mm |
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