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Fluorescence quantitative In Situ Hybridization (FISH) et Immunofluorescence (IF) de produits génétiques spécifiques dans les cellules infectées par le KSHV
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Journal JoVE Immunologie et infection
Quantitative Fluorescence In Situ Hybridization (FISH) and Immunofluorescence (IF) of Specific Gene Products in KSHV-Infected Cells
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Fluorescence quantitative In Situ Hybridization (FISH) et Immunofluorescence (IF) de produits génétiques spécifiques dans les cellules infectées par le KSHV

DOI:
10.3791/59697-v

•

00:06 min

•

August 27, 2019

•

,
1Norfolk Academy, 2Department of Molecular Biophysics and Biochemistry, Howard Hughes Medical Institute,Yale School of Medicine

Chapitres

  • 00:04Titre
  • 00:28Cell Fixation, Immunofluorescence, and Hybridization, and Viral RNA Visualization
  • 04:48Results: Representative FISH and IF Kaposi s Sarcoma-Associated Herpesvirus (KSHV) Oligonucleotide Analyses
  • 05:52Conclusion

Summary

Traduction automatique

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Nous décrivons un protocole utilisant l'hybridation in situ de fluorescence (FISH) pour visualiser les ARN herpèsvirs multiples dans les cellules humaines lytically infectées, en suspension ou adhérentes. Ce protocole comprend la quantification de la fluorescence produisant un rapport nucléocytoplasmique et peut être étendu pour la visualisation simultanée des protéines hôtes et virales avec immunofluorescence (IF).

Tags

Keywords: Quantitative FISHImmunofluorescenceKSHVHost-virus InteractionsViral Gene ProductsRNAProteinBiochemical AssaysCell CultureFixationPermeabilizationBlockingPrimary AntibodySecondary AntibodyFluorescent LabelingHybridizationOligonucleotidesDenaturation

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