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Quantitative Fluoreszenz In Situ Hybridisierung (FISH) und Immunfluoreszenz (IF) spezifischer Genprodukte in KSHV-infizierten Zellen
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Journal JoVE Immunologie et infection
Quantitative Fluorescence In Situ Hybridization (FISH) and Immunofluorescence (IF) of Specific Gene Products in KSHV-Infected Cells
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Quantitative Fluoreszenz In Situ Hybridisierung (FISH) und Immunfluoreszenz (IF) spezifischer Genprodukte in KSHV-infizierten Zellen

DOI:
10.3791/59697-v

•

00:06 min

•

August 27, 2019

•

,
1Norfolk Academy, 2Department of Molecular Biophysics and Biochemistry, Howard Hughes Medical Institute,Yale School of Medicine

Chapitres

  • 00:04Titre
  • 00:28Cell Fixation, Immunofluorescence, and Hybridization, and Viral RNA Visualization
  • 04:48Results: Representative FISH and IF Kaposi s Sarcoma-Associated Herpesvirus (KSHV) Oligonucleotide Analyses
  • 05:52Conclusion

Summary

Traduction automatique

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Wir beschreiben ein Protokoll, das fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung (FISH) verwendet, um mehrere herpesvirale RNAs in lytisch infizierten menschlichen Zellen zu visualisieren, entweder in Suspension oder anhaftend. Dieses Protokoll enthält die Quantifizierung der Fluoreszenz, die ein nukleozytoplasmatisches Verhältnis erzeugt, und kann für die gleichzeitige Visualisierung von Wirts- und viralen Proteinen mit Immunfluoreszenz (IF) erweitert werden.

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Keywords: Quantitative FISHImmunofluorescenceKSHVHost-virus InteractionsViral Gene ProductsRNAProteinBiochemical AssaysCell CultureFixationPermeabilizationBlockingPrimary AntibodySecondary AntibodyFluorescent LabelingHybridizationOligonucleotidesDenaturation

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