Protocole pour le développement d’un modèle d’ostéotomie fémure chez le rat albinos Wistar

Ce modèle d’ostéotomie du fémur peut aider les chercheurs à étudier le processus de guérison des fractures et à évaluer comment un médicament pourrait influencer la guérison des fractures. Il s’agit d’un modèle de rongeurs simple et facile à suivre qui peut aider les chercheurs à déterminer si un médicament a des propriétés cicatrisantes pour les os et à comprendre son mécanisme d’action. Même s’il se concentre principalement sur l’observation et l’analyse de la guérison des fractures, il peut également donner un aperçu de la pathogenèse de la maladie.

Cette méthode peut guider les recherches futures sur la guérison osseuse dans la santé et la maladie. Il peut être utilisé pour évaluer l’effet des médicaments ostéoanabolisants potentiels. Induire une ligne de rupture appropriée et une fixation de rupture avec un fil K sont difficiles.

Quelques séances d’entraînement devraient aider. La simplicité et la reproductibilité de cette méthode sont évidentes dans sa démonstration visuelle Pawan Pagaku, un résident junior de mon laboratoire, aidera à démontrer la procédure. Pour commencer, placez le bloc de cire contenant de la cire jusqu’à une profondeur de 2,5 centimètres sur la table d’opération et recouvrez-le de champs stériles.

Après avoir pratiqué une incision cutanée verticale d’un centimètre sur le côté latéral de la cuisse droite, exposez le muscle vastus lateralis en séparant le fascia profond à l’aide de ciseaux Metzenbaum. Fendez le vastus lateralis en ligne avec les fibres musculaires jusqu’à ce que la tige du fémur soit atteinte. Ensuite, utilisez l’ascenseur périosté pour libérer l’os des muscles qui y sont attachés.

Après avoir injecté une anesthésie locale dans et autour du périoste, créez une indentation dans le tiers moyen de la tige du fémur à l’aide de la lame chirurgicale numéro 15. Placez un ciseau sur l’échancrure et tapotez doucement le ciseau avec un marteau pour fracturer complètement l’os dans le tiers médian de la tige. Réparez la fracture à l’intérieur à l’aide d’un fil K stérile d’un millimètre maintenu à l’aide d’une perceuse électrique à piles.

Passez le fil K dans le canal médullaire du fragment distal à travers le site de fracture. Ensuite, percez le fil K à travers l’extrémité distale du fémur. Après avoir réduit la fracture, avancer le fil K de l’extrémité distale dans le canal du fragment proximal jusqu’à ce qu’il obtienne l’achat dans la région trochantérienne.

Coupez la partie distale du fil K qui dépasse de la peau à l’aide d’un coupe-fil. Pliez la pointe du fil K à environ 90 degrés à l’aide d’une pince et utilisez un bandage de gaze imbibé de bétadine pour le pansement du site d’épingle. Le fil K agit comme une attelle intramédullaire pour maintenir la fracture dans une position réduite.

Appliquez une pression sur la zone de saignement à l’aide d’une gaze stérile ou d’une pince artérielle pour arrêter tout saignement. Assurez-vous d’une hémostase complète avant de fermer la peau à l’aide d’une suture en nylon 4-0. Nettoyez la plaie avec de la bétadine et recouvrez-la de gaze stérile et de ruban adhésif microporé.

Pour les soins postopératoires, remettez les rats dans leurs cages et continuez à donner un régime semi-synthétique standard ainsi que des antibiotiques et des analgésiques par voie intrapéritonéale pendant cinq jours après la procédure. Enfin, évaluez la guérison osseuse par radiographie du site fracturé une fois par semaine. Les radiographies du fémur du rat avec le fil K NC2 avant d’induire la fracture, et un jour après la chirurgie sont montrées ici.

La cicatrisation des fractures est surveillée radiologiquement en prenant des radiographies hebdomadaires séquentielles du site opéré pour évaluer la formation de callosités. La fracture reste réduite et immobilisée avec le fil K intramédullaire. Après le sacrifice à un moment prédéterminé, le fémur a été soigneusement conservé dans du formol, suivi d’une décalcification osseuse.

L’os avec callosité a été obtenu après décalcification optimale. Le cal intact et la section sagittale du cal sont montrés ici. Le cal est évalué par intermittence pour assurer une décalcification optimale avant de l’évaluer à l’aide d’autres techniques.

Des images à faible grossissement et à fort grossissement de la section colorée à l’hématoxyline et à l’éosine du site de fracture sont présentées ici. Les sections colorées du site de fracture montrent un cal dur avec la formation de cartilage et de nouvel os. L’extrémité fracturée de l’os et la deuxième région corticale peuvent être vues ici.

La partie la plus sensible à la douleur du périoste de la plaie, et il est essentiel d’infiltrer le périoste au site de fracture avec un anesthésique local avant l’ostéotomie. Elle peut être suivie d’une analyse immunohistochimique et radiologique de la callosité, micro-CT pour l’histomorphométrie quantitative, analysant la force biomécanique du cal analyse du sérum. Cette technique est utile pour déterminer le potentiel ostéogénique, le mécanisme d’action et l’analyse comparative de médicaments ostéoanabolisants prometteurs.