Abdominal adhesions that form after surgery are a major cause of pain, infertility, and hospitalization and reoperation for small bowel obstruction. Our surgical procedure for creating abdominal adhesions in mice is a reliable tool to study the mechanisms underlying the formation of adhesions.
Abdominal adhesions consist of fibrotic tissue that forms in the peritoneal space in response to an inflammatory insult, typically surgery or intraabdominal infection. The precise mechanisms underlying adhesion formation are poorly understood. Many compounds and physical barriers have been tested for their ability to prevent adhesions after surgery with varying levels of success. The mouse and rat are important models for the study of abdominal adhesions. Several different techniques for the creation of adhesions in the mouse and rat exist in the literature. Here we describe a protocol utilizing abrasion of the cecum with sandpaper and sutures placed in the right abdominal sidewall. The mouse is anesthetized and the abdomen is prepped. A midline laparotomy is created and the cecum is identified. Sandpaper is used to gently abrade the surface of the cecum. Next, several figure-of-eight sutures are placed into the peritoneum of the right abdominal sidewall. The abdominal cavity is irrigated, a small amount of starch is applied, and the incision is closed. We have found that this technique produces the most consistent adhesions with the lowest mortality rate.
Abdominal adhesjoner er et skjema av arrvev som dannes i magen som respons på inflammasjon, typisk etter kirurgi eller intraabdominal infeksjon. Voksninger er en viktig årsak til kroniske magesmerter og infertilitet, og er den vanligste årsaken til tynntarmsobstruksjon en. Tilstedeværelsen av adhesjon gjør å utføre en andre bukoperasjon vanskeligere og øker sannsynligheten for komplikasjoner 2.
Til tross for mange års forskning, forblir mekanismene bak dannelsen av sammenvoksn dårlig forstått. Det er kjent at en første skade på peritoneal overflaten bevirker en utsondring av fibrin-rik væske, som deretter danner en propp som binder overflatene av tarm og bukveggen sammen tre. Senere, fibroblaster og andre celler vandrer inn i klebemidlet plass og utsondre bindevev 4. Over måneder til år vedheft modnes ved å utvikle blodårer og nerver <sup> 5.
Flere kommersielle produkter finnes som er designet for å redusere dannelsen av sammenvoksninger etter abdominal kirurgi (f.eks Seprafilm). Alle disse produkter virke som mekaniske barrierer og stoppe adhesjonsdannelse ved å hindre fysisk kontakt mellom sløyfer av tarm og bukveggen 6,7. Til tross for bevis fra en kontrollert studie som en kirurgisk adhesjonsbarriere reduserer dannelsen av sammenvoksn 8, mange kirurger anekdotisk har vært fornøyd med effekten av mekanisk barriere produkter.
Foreløpig er det ingen legemiddelbasert anti-vedheft terapier, som gjenspeiler det faktum at de nøyaktige prosesser involvert i heft formasjon er dårlig forstått. Utvikling av en behandling som er spesielt rettet mot mobilnettet eller molekylære agenter involvert i dannelsen av sammenvoksninger vil kreve en bedre forståelse av de hendelser som er involvert i dannelsen av vedheft. flere gruppes har identifisert molekylære stier som kan være viktige for vedheft dannelse 9-11. Dyremodeller gir et flott miljø for å studere dannelsen av sammenvoksninger. Mange studier har blitt publisert som beskriver den kirurgiske etableringen av vedheft i flere dyr, særlig rotter og mus 6,12-14. Gitt vår erfaring med å studere fibrose hos mus og den store tilgjengeligheten av transgene mus og musebaserte antistoffer, valgte vi den musen som vår modell for studiet av sammenvoksninger. Heri, rapporterer vi den teknikken som vi har utviklet til reproduserbart og pålitelig skape abdominal sammenvoksninger i musen.
De kritiske trinnene i denne fremgangsmåten er: grundig sliping cecum uten å forårsake perforering, plassere sting i mageveggen, og bruke riktig mengde stivelse. Bare gjelder sandpapir til cecum, eller til en liten bestemt del av tarmen. Bred bruk av sandpapir på store mengder tynntarm tendens til å forårsake betydelig ileus. Vær nøye med å slipes Blindtarm med nok kraft at overflaten blir ru, men ikke så mye at vegg tårer. Å finne denne balansen kan ta litt tid. Alltid håndtere tarmen forsiktig og unngå ?…
The authors have nothing to disclose.
CDM ble støttet av American College of Surgeons (ACS) Resident forskningsstipend. MSH ble støttet av California Institute for Regenerative Medicine (CIRM) Klinisk Fellow trening stipend TG2-01159. MSH, HPL, og MTL ble støttet av American Society of Maxillofacial Surgeons (ASMS) / Maxillofacial Surgeons Foundation (MSF) Research Grant Award. HPL ble støttet av NIH stipend R01 GM087609 og en gave fra Ingrid Lai og Bill Shu ære for Anthony Shu. HPL og MTL ble støttet av Hagey Laboratory for Pediatric Regenerative Medicine og The Oak Foundation. MTL ble støttet av Gunn / Olivier Fund.
Fisherbrand Absorbent Underpads, 20" x 24" | Fisher Scientific | 14-206-62 | |
Polylined Sterile Field, 18" x 24" | Busse Hospital Disposables | 696 | Cut a rectangular hole of the appropriate size |
Isothesia isoflurane | Henry Schein | 050033 | |
Fisherbrand Sterile cotton gauze pad, 4" x 4" | Fisher Scientific | 22-415-469 | |
Puralube petrolatum ophthalmic ointment, 1/8 oz. tube | Dechra Veterinary Products | NDC 17033-211-38 | |
Nair depilatory cream | Church & Dwight Co. | 22339-05 | |
Buprenex buprenorphine 0.3 mg/mL | Reckitt Benckiser Pharmaceuticals Inc. | NDC 12496-0757-5 | |
1 cc insulin syringe, 27G | Becton Dickinson | 329412 | |
Povidone Iodine Prep Solution | Medline | MDS093944H | |
Webcol alcohol prep swabs | Covidien | 6818 | |
General-Purpose Labarotory Labeling tape | VWR | 89097-912 | |
BioGel PI surgical gloves | Mölnlycke Health Care | ALA42675Z | |
Micro Forceps with teeth | Roboz | RS-5150 | |
Fine scissors- sharp | Fine Science Tools | 14060-09 | |
Straight serrated forceps | Fine Science Tools | 11050-10 | |
Castro-Viejo needle driver | Fine Science Tools | 12565-14 | |
100 grit 1/4 sheet sandpaper | ACE Hardware | 1010446 | Cut into strips |
4-0 silk suture, 30", SH needle | Ethicon | K831 | |
7-0 PDS II absorbable monofilament suture, 30", BV-1 needle | Ethicon | Z135 | Usually comes double-armed. Cut the suture at the midway point to generate two usable sutures. |
Rice starch | MP Biomedicals | 102955 | |
0.9% Sodium Chloride Irrigation | Baxter | BHL2F7121 | Warm to 37° C prior to use |
10 mL syringe | Becton Dickinson | 309604 | |
6-0 Vicryl absorbable braided suture, 18", RB-1 taper needle | Ethicon | J212H | |
6-0 Ethilon nylon monofilament suture, 18", P-3 needle, | Ethicon | 1698G | |
Tegaderm Transparent Film Dressing Frame Style, 6 cm x 7 cm | 3M | 1624W | Cut in half lengthwise |