マウスの腹部癒着の作成
Summary
Abdominal adhesions that form after surgery are a major cause of pain, infertility, and hospitalization and reoperation for small bowel obstruction. Our surgical procedure for creating abdominal adhesions in mice is a reliable tool to study the mechanisms underlying the formation of adhesions.
Abstract
Abdominal adhesions consist of fibrotic tissue that forms in the peritoneal space in response to an inflammatory insult, typically surgery or intraabdominal infection. The precise mechanisms underlying adhesion formation are poorly understood. Many compounds and physical barriers have been tested for their ability to prevent adhesions after surgery with varying levels of success. The mouse and rat are important models for the study of abdominal adhesions. Several different techniques for the creation of adhesions in the mouse and rat exist in the literature. Here we describe a protocol utilizing abrasion of the cecum with sandpaper and sutures placed in the right abdominal sidewall. The mouse is anesthetized and the abdomen is prepped. A midline laparotomy is created and the cecum is identified. Sandpaper is used to gently abrade the surface of the cecum. Next, several figure-of-eight sutures are placed into the peritoneum of the right abdominal sidewall. The abdominal cavity is irrigated, a small amount of starch is applied, and the incision is closed. We have found that this technique produces the most consistent adhesions with the lowest mortality rate.
Introduction
腹部癒着は、通常、手術や腹腔内感染後、炎症に反応して腹部に形成瘢痕組織の形態です。癒着は、慢性腹痛や不妊症の主な原因であり、小腸閉塞1の最も一般的な原因です。癒着の存在は、第二の開腹手術を行うより困難になり、合併症2の可能性を増大させます。
長年の研究にもかかわらず、癒着の形成の基礎となるメカニズムはよくわかっていないままです。腹膜表面への初期の損傷は、その後腸腹壁一緒3の表面に結合する血餅を形成するフィブリンに富む流体の浸出を引き起こすことが知られています。その後、線維芽細胞および他の細胞は、接着剤空間に移行し、結合組織4を分泌します 。年に数ヶ月にわたり接着は血管や神経を開発することによって、成熟します<suP> 5。
いくつかの市販の製品は、腹部手術（ 例えば 、Seprafilm）後の癒着の形成を減少させるように設計されているものが存在します。これらの製品のすべては、機械的障壁として作用し、腸のループと腹壁6,7間の物理的接触を防止することによって、癒着形成を停止させます。外科的癒着バリアは、癒着8の形成を減少させる対照試験からの証拠にもかかわらず、多くの外科医は、逸話的、機械的障壁製品の有効性に失望されています。
現在、癒着形成に関与する正確なプロセスが十分に理解されていないという事実を反映しない薬剤ベースの抗接着療法は、存在しません。具体的に接着の形成に関与しているイベントの理解向上を必要とする癒着の形成に関与する細胞または分子薬剤を標的に治療を開発します。いくつかのグループSは、癒着形成9-11にとって重要である分子経路を同定しました。動物モデルは、癒着の形成を研究するための優れた環境を提供します。多くの研究は、いくつかの動物、特にラットおよびマウス6,12-14に接着の外科的な作成を記述する公開されています。マウスやトランスジェニックマウスとマウスベースの抗体の広い可用性における線維症を研究して私たちの経験を考えると、我々は癒着の研究のための我々のモデルとしてマウスを選択しました。ここで、我々は再現性と確実マウスにおける腹部癒着を作成するために開発した技術を報告しています。
Protocol
Representative Results
Discussion
この手順の重要なステップは次のとおりです。徹底的に、穿孔を引き起こすことなく、盲腸を研磨腹部側壁に縫合糸を配置し、及びデンプンの適切な量を適用します。盲腸まで、または腸の小さな特定の部分に紙やすりをのみ適用されます。小腸大量のサンドペーパーの普及が著しいイレウスを引き起こす傾向があります。表面が粗くなり、十分な力で盲腸を研磨するように注意してくださ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
CDMは、外科医のアメリカの大学（ACS）常駐研究奨学金によってサポートされていました。 MSHは、再生医療のためのカリフォルニア工科大学（CIRM）臨床フェロー研修助成金TG2-01159によってサポートされていました。 MSH、HPL、およびMTLは、顎顔面外科学会（ASMS）/顎顔面外科財団（MSF）研究助成賞によってサポートされていました。 HPLは、NIHの助成金R01 GM087609とアンソニーシュウの名誉でイングリッド・ライとビル・シュウからの贈り物によってサポートされていました。 HPLとMTLは小児再生医療のためのHagey研究所とオーク財団によってサポートされていました。 MTLは、ガン/オリヴィエ・ファンドによってサポートされていました。
Materials
| Fisherbrand Absorbent Underpads, 20" x 24" | Fisher Scientific | 14-206-62 | |
| Polylined Sterile Field, 18" x 24" | Busse Hospital Disposables | 696 | Cut a rectangular hole of the appropriate size |
| Isothesia isoflurane | Henry Schein | 050033 | |
| Fisherbrand Sterile cotton gauze pad, 4" x 4" | Fisher Scientific | 22-415-469 | |
| Puralube petrolatum ophthalmic ointment, 1/8 oz. tube | Dechra Veterinary Products | NDC 17033-211-38 | |
| Nair depilatory cream | Church & Dwight Co. | 22339-05 | |
| Buprenex buprenorphine 0.3 mg/mL | Reckitt Benckiser Pharmaceuticals Inc. | NDC 12496-0757-5 | |
| 1 cc insulin syringe, 27G | Becton Dickinson | 329412 | |
| Povidone Iodine Prep Solution | Medline | MDS093944H | |
| Webcol alcohol prep swabs | Covidien | 6818 | |
| General-Purpose Labarotory Labeling tape | VWR | 89097-912 | |
| BioGel PI surgical gloves | Mölnlycke Health Care | ALA42675Z | |
| Micro Forceps with teeth | Roboz | RS-5150 | |
| Fine scissors- sharp | Fine Science Tools | 14060-09 | |
| Straight serrated forceps | Fine Science Tools | 11050-10 | |
| Castro-Viejo needle driver | Fine Science Tools | 12565-14 | |
| 100 grit 1/4 sheet sandpaper | ACE Hardware | 1010446 | Cut into strips |
| 4-0 silk suture, 30", SH needle | Ethicon | K831 | |
| 7-0 PDS II absorbable monofilament suture, 30", BV-1 needle | Ethicon | Z135 | Usually comes double-armed. Cut the suture at the midway point to generate two usable sutures. |
| Rice starch | MP Biomedicals | 102955 | |
| 0.9% Sodium Chloride Irrigation | Baxter | BHL2F7121 | Warm to 37° C prior to use |
| 10 mL syringe | Becton Dickinson | 309604 | |
| 6-0 Vicryl absorbable braided suture, 18", RB-1 taper needle | Ethicon | J212H | |
| 6-0 Ethilon nylon monofilament suture, 18", P-3 needle, | Ethicon | 1698G | |
| Tegaderm Transparent Film Dressing Frame Style, 6 cm x 7 cm | 3M | 1624W | Cut in half lengthwise |
References
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