Livraison Intracanalaire le lapin glande mammaire
Summary
Here, we describe a technique for the localized delivery of reagents to the rabbit mammary gland via an intraductal injection. In addition, we describe a protocol for visualization and the confirmation of delivery by high-resolution ultrasound imaging of contrast agents.
Abstract
Intracanalaires traitements localisés pour le cancer du sein présentent des avantages potentiels, y compris une livraison efficace de la tumeur et une toxicité systémique réduite et des effets secondaires 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7. Cependant, plusieurs défis restent à relever avant que ces traitements peuvent être appliqués plus largement. Le développement et la validation de la thérapeutique intracanalaires dans un modèle animal approprié de faciliter le développement de stratégies thérapeutiques pour les patients intracanalaires. Alors que la glande mammaire de la souris a été largement utilisé comme système de modèle de développement mammaire et la tumorigenèse, l'anatomie est distincte de la glande humaine. Un modèle animal plus grand, comme le lapin, peut servir de modèle pour améliorer la structure de la glande mammaire et le développement thérapeutique intracanalaire. en contrast à des souris, dans laquelle dix arbres canalaires sont spatialement répartis le long de l'axe du corps, chacune se terminant dans un trayon distinct, la glande de lapin mammaire ressemble plus étroitement à la glande humaine avec de multiples systèmes canalaires qui se chevauchent et sortent à travers des ouvertures distinctes dans une tétine. Ici, nous présentons les méthodes peu invasives pour la fourniture de réactifs directement dans le conduit mammaire de lapin et pour la visualisation de la livraison lui-même avec imagerie par ultrasons à haute résolution.
Introduction
La livraison intracanalaire d'agents thérapeutiques a été étudié dans des modèles de rongeurs et à un stade précoce des essais humains 3, 4, 5, 6, 11, 12. Une récente étude de phase I a démontré la sécurité et la faisabilité de carboplatine intracanalaire ou intracanalaire doxorubicine liposomale pégylée chez les femmes en attente d'une mastectomie pour le traitement du cancer invasif 2.
Protocoles précédents pour la livraison intracanalaire ont été développés pour la souris et mammaires de rat glandes 6, 7, 8, 9. À des fins de recherche, intracanalaires injections de cellules tumorales et de la délivrance de vecteur lentiviral d'oncogènes ont également été effectuées dans des modèles de rongeursref "> 13, 14, 15, 16. Cependant, un idéal modèle in vivo du processus de livraison intracanalaire devrait permettre le développement de nouvelles classes de composés thérapeutiques et de faciliter l' évaluation préclinique. Les différences anatomiques entre les rongeurs et les humains ont compliqué la traduction de ces études.
Contrairement aux souris, dans lequel chaque canal se termine à un trayon distinct, le sein humain est constitué de 5 à 9 canalaires systèmes indépendants, chacun avec une ouverture séparée qui se termine à la tétine. Lapin glandes mammaires abritent quatre systèmes canalaires indépendants, chacun accessible séparément par l'un des quatre orifices dans un seul trayon. Un modèle de lapin correspond plus étroitement l'anatomie humaine et permet l'étude de la délivrance du médicament intracanalaire dans un contexte plus pertinent.
Ici, nous utilisons deux techniques pour évaluer la prestation intracanalaire. La co-administration d'uncolorant vital permet la visualisation à travers la peau et donne une confirmation simple et rapide de la méthode. Pour certaines applications, la cartographie résolution plus élevée des canaux peut être préférée. Nous présentons ici un protocole d'imagerie par ultrasons des conduits grâce à la fourniture d'un réactif intracanalaire non ciblé contraste.
Protocol
Representative Results
Discussion
Cette méthode de livraison intracanalaire au lapin glande mammaire peut être utilisé pour des réactifs de contraste pour ultrasons et bien d'autres solutions aqueuses, y compris des colorants et des agents thérapeutiques vitaux. Des études antérieures ont démontré la fourniture intracanalaire des hormones 17, 18, 19. Chez les rongeurs, la livraison intracanalaire d'acides nucléiques 8, …
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
The authors acknowledge support from a Translational Breast Cancer Research Grant (14-60-26-BROC to AB) from the Breast Cancer Research Foundation and the American Association for Cancer Research.
Materials
| MicroMarker non-targeted contrast reagent | VisualSonics | VS-11694 | |
| Luer Lock 1mL Syringes | BD | 309628 | |
| Glycopyrrolate 0.2mg/mL | Wedgewood Compounding Pharmacy | GLYCOP-INJ013VC | 6 month shelf life, supply may be limited. |
| Atropine Sulfate 0.5 mg/mL | Animal Health International | 15320764 | If glycopyrrolate is unavailable. Not to be combined with glycopyrrolate. |
| Ketamine HCL 100mg/mL | Animal Health International | 21250699 | http://www.animalhealthinternational.com/ |
| Acepromazine 10mg/mL | Animal Health International | 17640541 | |
| Xylazine 20mg/mL | Animal Health International | 20101547 | |
| Yohimbine 0.2mg/mL | Animal Health International | 14588965 | |
| Hair Removing Cream | Veet | Sensitive skin solution. Available through local retailers. | |
| Blunt tip infusion needles | Sai Infusion Technology | B14-50 | http://www.sai-infusion.com/collections/blunt-needles |
| Veterinary Pulse Oximeter | EdanUSA | VE-H100B | http://www.edanusa.com/Product/VE-H100B-Veterinary-Pulse-Oximeter.html |
| Warm Water Pump | Gaymar | TP700 | |
| Warm Water Blanket | Animal Health International | 21232696 | Maxi-Therm Lite Warming Pads |
| Ultrasound system | VisualSonics | Vevo 2100 |
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