Rabbit Meme Bezi için İntraduktal Teslimat
Summary
Here, we describe a technique for the localized delivery of reagents to the rabbit mammary gland via an intraductal injection. In addition, we describe a protocol for visualization and the confirmation of delivery by high-resolution ultrasound imaging of contrast agents.
Abstract
Göğüs kanseri için lokalize intraduktal tedavi tümör verimli verme ve düşük sistemik toksisite ve yan etkileri, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 de dahil olmak üzere, potansiyel avantajlar sunar. Bu tedavilerin daha yaygın olarak uygulanabilir önce Ancak, bazı zorluklar devam etmektedir. Uygun bir hayvan modelinde geliştirilmesi ve intraduktal tedavilerin doğrulama hastalar için intraduktal tedavi stratejilerinin geliştirilmesini kolaylaştırır. fare meme bezi geniş meme gelişimi ve kanser oluşumunda bir model sistem olarak kullanılmış olsa da, anatomi insan bezi ayrıdır. Daha büyük bir hayvan modeli, örneğin tavşan gibi, meme bezi yapısı ve intraduktal terapötik gelişim için iyi bir model olarak hizmet edebilir. c'defarelere ontrast, hangi on duktal ağaçları uzamsal ayrı bir meme her sonlandırıcı, tavşan meme bezi daha yakından bir emzik ayrı deliklerden bu çıkış Birden fazla örtüşen duktal sistemi ile, insan bezi benzer, vücut ekseni boyunca dağıtılır. Burada, doğrudan tavşan meme kanala ve yüksek çözünürlüklü ultrason görüntüleme ile teslimat kendisi görselleştirme için reaktiflerin teslimat için minimal invaziv yöntemler sunuyoruz.
Introduction
Terapötik maddelerin intraduktal dağıtım kemirgen modellerinde ve erken evre insan denemelerinde 3, 4, 5, 6, 11, 12 olarak ele alınmıştır. Eğitim Bir son Faz intraduktal karboplatin veya invaziv kanser 2 tedavisi için mastektomi bekleyen kadınların intraduktal pegile lipozomal doksorubisin güvenliğini ve uygulanabilirliğini göstermiştir.
Intraduktal teslimat için mi protokoller, fare ve sıçan meme bezleri 6, 7, 8, 9 için geliştirilmiştir. araştırma amaçlı, intraduktal tümör hücre enjeksiyonları ve onkogenler lentiviral vektör dağıtımı için de kemirgen modellerinde yapılmıştırref "> 13, 14, 15, 16. Bununla birlikte, intraduktal dağıtım işleminin in vivo model bir yere tedavi bileşiklerin yeni sınıfları gelişimine olanak ve klinik öncesi değerlendirilmesini kolaylaştıracaktır. Kemirgenlerde ve insanlardaki arasındaki anatomik farklılıklara bu çeviri karmaşık bir hale getirmiştir çalışmaları.
Farelerde farklı olarak, her kanalı ayrı bir memesinden sona erer, insan meme 5 ila 9, bağımsız duktal sistemleri, meme sonlanan ayrı açıklık ile, her oluşur. Tavşan meme bezleri dört bağımsız duktal sistemleri, tek bir meme dört menfez biri aracılığıyla ayrı ayrı erişilebilir liman. Bir tavşan modeli daha yakından insan anatomisi ile eşleşir ve daha alakalı bir bağlamda intraduktal ilaç dağıtım çalışmasına izin verir.
Burada, intraduktal teslim değerlendirmek için iki tekniklerini kullanın. Bir eş zamanlı uygulanmasıvital boya deri yoluyla görselleştirme izin verir ve yöntemin basit ve hızlı onay sağlar. Bazı uygulamalar için, kanalların yüksek çözünürlük eşleme tercih edilebilir. Biz olmayan bir hedefli kontrast reaktif intraduktal teslim yoluyla burada kanalların ultrason görüntüleme için bir protokol mevcut.
Protocol
Representative Results
Discussion
Tavşan meme bezi ile intraduktal verme metodu, vital boyaların ve terapötik içeren ultrason kontrast reaktifler ve diğer sulu çözeltiler için kullanılabilir. Daha önceki çalışmalar, hormonlar 17, 18, 19 intraduktal teslim göstermiştir. Kemirgen modellerinde, nükleik asitler, 8 intraduktal teslimat, kemoterapötikler 6, 7, ve nanop…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
The authors acknowledge support from a Translational Breast Cancer Research Grant (14-60-26-BROC to AB) from the Breast Cancer Research Foundation and the American Association for Cancer Research.
Materials
| MicroMarker non-targeted contrast reagent | VisualSonics | VS-11694 | |
| Luer Lock 1mL Syringes | BD | 309628 | |
| Glycopyrrolate 0.2mg/mL | Wedgewood Compounding Pharmacy | GLYCOP-INJ013VC | 6 month shelf life, supply may be limited. |
| Atropine Sulfate 0.5 mg/mL | Animal Health International | 15320764 | If glycopyrrolate is unavailable. Not to be combined with glycopyrrolate. |
| Ketamine HCL 100mg/mL | Animal Health International | 21250699 | http://www.animalhealthinternational.com/ |
| Acepromazine 10mg/mL | Animal Health International | 17640541 | |
| Xylazine 20mg/mL | Animal Health International | 20101547 | |
| Yohimbine 0.2mg/mL | Animal Health International | 14588965 | |
| Hair Removing Cream | Veet | Sensitive skin solution. Available through local retailers. | |
| Blunt tip infusion needles | Sai Infusion Technology | B14-50 | http://www.sai-infusion.com/collections/blunt-needles |
| Veterinary Pulse Oximeter | EdanUSA | VE-H100B | http://www.edanusa.com/Product/VE-H100B-Veterinary-Pulse-Oximeter.html |
| Warm Water Pump | Gaymar | TP700 | |
| Warm Water Blanket | Animal Health International | 21232696 | Maxi-Therm Lite Warming Pads |
| Ultrasound system | VisualSonics | Vevo 2100 |
Riferimenti
- Flanagan, M., Love, S., Hwang, E. S. Status of Intraductal Therapy for Ductal Carcinoma in Situ. Curr Breast Cancer Rep. 2 (2), 75-82 (2010).
- Love, S. M., et al. A Feasibility Study of the Intraductal Administration of Chemotherapy. Cancer Prevention Research. 6 (1), 51-58 (2013).
- Stearns, V., et al. Preclinical and Clinical Evaluation of Intraductally Administered Agents in Early Breast Cancer. Sci Transl Med. 3 (106), 106ra108 (2011).
- Zhang, B., et al. The Safety Parameters of the Study on Intraductal Cytotoxic Agent Delivery to the Breast before Mastectomy. Chin J Cancer Res. 26 (5), 579-587 (2014).
- Mahoney, M. E., Gordon, E. J., Rao, J. Y., Jin, Y., Hylton, N., Love, S. M. Intraductal Therapy of Ductal Carcinoma In Situ: a Presurgery Study. Clin Breast Cancer. 13 (4), 280-286 (2013).
- Murata, S., et al. Ductal Access for Prevention and Therapy of Mammary Tumors. Cancer Res. 66 (2), 638-645 (2006).
- Chun, Y. S., et al. Intraductally Administered Pegylated Liposomal Doxorubicin Reduces Mammary Stem Cell Function In the Mammary Gland but in the Long Term, Induces Malignant Tumors. Breast Cancer Res Treat. 135 (1), 201-208 (2012).
- Brock, A., et al. Silencing HoxA1 by Intraductal Injection of siRNA Lipidoid Nanoparticles Prevents Mammary Tumor Progression in Mice. Sci Trans Med. 6 (217), 2172a2 (2014).
- Krause, S., Brock, A., Ingber, D. E. Intraductal Injection For Localized Drug Delivery To The Mouse Mammary Epithelium. J Vis Exp. (80), e50692 (2013).
- Brock, A., Goh, H. T., Yang, B., Yu, L., Li, H., Loh, Y. H. Cellular Reprogramming: A New Technology Frontier In Pharmaceutical Research. Pharm Res. 29 (1), 35-52 (2012).
- Silverstein, M. J., et al. Ductal Carcinoma In Situ of the Breast. Annu. Rev Med. 51, 17-32 (2000).
- Love, S. M., Barsky, S. H. Anatomy of the Nipple And Breast Ducts Revisited. Cancer. 101 (9), 1947-1957 (2004).
- Virnig, B. A., Shamliyan, T., Tuttle, T. M., Kane, R. L., Wilt, W. J. Diagnosis and Management of Ductal Carcinoma In Situ (DCIS). Evidence Report/Technology Assessment. , 185 (2009).
- Mills, D., et al. Examination of Duct Physiology in the Human Mammary Gland. PLoS One. 11 (4), e0150653 (2016).
- King, B. L., Love, S. M. The Intraductal Approach to the Breast: Raison d’Etre. Breast Cancer Res. 8 (2), 206 (2006).
- Bu, W., Xin, L., Toneff, M., Li, L., Li, Y. Lentivirus vectors for stably introducing genes into mammary epithelial cells in vivo . J Mammary Gland Biol Neoplasia. 14, 401-404 (2009).
- Lyons, W. R. The Direct Mammotrophic Action of Lactogenic Hormone. Proc. Soc. Exp. Bio. Med. 51 (2), 308-311 (1942).
- Fiddler, T. J., Birkinshaw, M., Falconer, I. R. Effects Of Intraductal Prolactin On Some Aspects of the Ultrastructure and Biochemistry of Mammary Tissue in the Pseudopregnant Rabbit. J Endocrinol. 49 (3), 459-469 (1971).
- Falconer, I. R., Fiddler, T. J. Effects of Intraductal Administration Of Prolactin, Actinomycin D and Cycloheximide on Lipoprotein Lipase Activity in the Mammary Glands of Pseudopregnant Rabbits. Biochim Biophys Acta. 218 (3), 508-514 (1970).
- Singh, Y. Influence of Molecular Size on the Retention of Polymeric Nanocarrier Diagnostic Agents in Breast Ducts. Pharm Res. 29 (9), 2377-2388 (2012).
- Jain, R., et al. Atypical Ductal Hyperplasia: Interobserver and Intraobserver Variability. Mod Pathol. 24 (7), 917-923 (2011).
- Betsill, W. L., Rosen, P. P., Lieberman, P. H., Robbins, G. F. Intraductal Carcinoma. Long-term Follow-up After Treatment by Biopsy Alone. JAMA. 239 (18), 1863-1867 (1978).
- Eusebi, V., et al. Long-term Follow-up of In Situ Carcinoma of the Breast. Semin Diagn Pathol. 11 (3), 223-235 (1994).
- Sanders, M., et al. The Natural History Of Low-Grade Ductal Carcinoma In Situ Of The Breast In Women Treated By Biopsy Only Revealed Over 30 Years Of Long-Term Follow-Up. Cancer. 103 (12), 2481-2484 (2005).
- Esserman, L. J., et al. Addressing Overdiagnosis and Overtreatment in Cancer: A Prescription For Change. Lancet Oncol. 15 (6), e234-e242 (2014).
