マウスの膵臓の組織学的解析と代謝プロファイリングに対する郭清
Summary
このビデオの記事は、組織学的解析と代謝プロファイリングに対する郭清によってマウスの膵臓を正常に削除に必要な手順の詳細なデモを提供します。
Abstract
膵臓特定のトランスクリプション要因、1 a cre リコンビナーゼ; を調査しています。lox 停止-lox クリステン ラット肉腫、12 のコドンでアスパラギン酸グリシン (Ptf1acre/+;LSL-KrasG12D/+) ヒト膵癌のモデルとしてのマウスのひずみ。私たちの現在の研究の目的は、膵臓癌の進行の新規代謝マーカーを識別するためにです。尿、糞便、血液、膵臓組織の抽出物と癌の進行を舞台に膵臓の組織学的解析のメタボリック ・ プロファイリングを行った。マウスの膵臓人間のような明確に定義された固形臓器ではなく、むしろ簡単にマウス内部解剖学になじみのない個人またはほとんどまたはまったく経験を実施して個人識別はないびまん性分散軟部組織マウス臓器の解剖。この資料の目的は、詳細な測定を提供する郭清によりマウスの膵臓の除去には初心者を誘導する視覚的なデモ。この記事は特にメタボリック ・ プロファイリングまたは組織学的解析のため郭清によってマウスの膵臓の収穫が必要研究に学生や新しい研究者に貴重なする必要があります。
Introduction
マウスはヒト膵癌1,2の重要な動物モデルとして登場しました。Ptf1acre/+;LSL KrasG12D/+マウス モデル、クリステンの膵臓、膵上皮内テロメラーゼ (PanINs)、その進歩と呼ばれる、膵臓の病変の開始に終って専らラット肉腫 (K ‐ Ras) 遺伝子が有効膵膵管癌は、一般的には PDACs3と呼ばれます。このマウス モデル システム、ヒト膵癌4、5生活や頻繁に PDAC に進捗状況の最初の 5 ヶ月以内、PanINs が出てくる追加の利点の最高の動物モデルの 1 つ、単一の年4、560-70 歳が人間の膵臓癌が最もよく起きるに対し。
Ptf1a から郭清による膵臓抽出cre/+;LSL KrasG12D/+パニン ・早期から進行 PDAC3,4まで様々 な年齢でのマウスは、膵臓癌の開発の詳細縦断的組織学的検討,5. 5 個から 15 ヶ月に至るまでの年齢層で膵臓の収穫も、準備組織健康から病気にかかったティッシュへの移行中に発生する膵4代謝の世界の変化の特徴を抽出する使用ことができます6,7。
この記事では、マウスの膵臓領域抽出の実行に必要な手順の完全な視覚的なガイドを提示し、膵臓がさらなる分析のための保存のためのガイドラインを提供します。個人を含む、その他の膵疾患の研究を行って I 型糖尿病、特に学生やマウスの膵臓を使っての収穫を含む研究に新しい捜査に役に立つはずのこのガイドは均等に貴重になりますメタボリック ・ プロファイリングまたは組織学的解析の郭清。
Protocol
Representative Results
Discussion
既存のメソッドの意義
マウス解剖の他の非公式の動画が存在している間このビデオ説明が最初のプロの品質、査読、郭清10 でマウスの膵臓の収穫抽出に必要な詳細な手順のすべての視覚的なデモ.代謝とインスリンの主な器官をされている膵臓に生産、郭清と膵の収穫を生理的特性11の保存のためことができます。膵臓を分離することによっ?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
MAK は、国立衛生研究所からこの作品のサポートを認めている/国立がん研究所許可番号 – 1R15CA152985 01A1。このプロジェクトは、マイアミ大学学部研究賞プログラム、奨学金プログラムとマイアミ大学夏学者プログラムにマイアミ大学博士課程工学部機会によってサポートされています。
Materials
| Glass Jar | Corning | 3140-150 | The glass jar used in the video has been discontinued. This is its replacement. |
| Lid of Glass Jar | Corning | 9985-150 | The glass jar lid used in the video has been discontinued. This is its replacement. |
| 15 mL Falcon Tubes | Fisher Scientific | 339650 | |
| Surgical Scissors | Fisher Scientific | 9201 | |
| Squeeze bottle | Fisher Scientific | 03-409-10DD | |
| 100% Ethanol | Fisher Scientific | 22-032-103 | |
| Formalin | Fisher Scientific | 245-684 | |
| Foam Boards | Therapak | 562908 | |
| Forceps | Fisher Scientific | 200205SHN | |
| 1 mL 21G Syringes | BD Biosciences | 309624 | |
| 50 mL Falcon Tubes | Fisher Scientific | 339652 | |
| 2.0 mL Microcentrifuge Tubes | Fisher Scientific | 02-681-258 | |
| Surgical Pads | Fisher Scientific | S67011 | |
| T-Pins Length: 2" | Advance Store Products | X32T-05 | |
| Sterilizing Wipes | Professional Disposables International Inc. | Q85084 | |
| Sharps Container | Fisher Scientific | 14-827-122 | |
| Analytical Balance | Marshall Scientific | ME-AE200 | |
| 4L Dewar | Taylor-Wharton | 4LD | |
| Shallow Wide Mouth Dewar | Fisher Scientific | F3087-V | |
| Floating Microtube Rack | VWR | 60986-100 | |
| Cryogenic Vial 1.2 mL, Sterile | Fisher Scientific | 10-500-25 | |
| Isothesia (Isoflurane) | Henry Schein Animal Health | 050033 | |
| Liquid Nitrogen | Wright Brothers | NIT-60-XX | |
| Mouse Kras Strain | The Jackson Laboratory | OO8179 | |
| Mouse Cre Strain | MMRRC | OOO435-UNC |
Riferimenti
- Fesinmeyer, M. D., Austin, M. A., Li, C. I., De Roos, A. J., Bowen, D. J. Differences in Survival by Histologic Type of Pancreatic Cancer. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 14 (7), 1766-1773 (2005).
- Jackson-Grusby, L. Modeling cancer in mice. Oncogene. 21 (35), 5504-5514 (2002).
- Heid, I., et al. Early requirement of Rac1 in a mouse model of pancreatic cancer. Gastroenterology. 141 (2), 719-730 (2011).
- Hingorani, S. R., et al. Preinvasive and invasive ductal pancreatic cancer and its early detection in the mouse. Cancer cell. 4 (6), 437-450 (2003).
- Shi, C., et al. KRAS2 Mutations in Human Pancreatic Acinar-Ductal Metaplastic Lesions Are Limited to Those with PanIN Implications for the Human Pancreatic Cancer Cell of Origin. Mol Cancer Res. 7 (2), 230-236 (2009).
- LaConti, J. J., et al. Distinct serum metabolomics profiles associated with malignant progression in the KrasG12D mouse model of pancreatic ductal adenocarcinoma. BMC Genomics. 16 (1), 1-10 (2015).
- Ludwig, M. R., et al. Surveying the serologic proteome in a tissue-specific kras(G12D) knockin mouse model of pancreatic cancer. Proteomics. 16 (3), 516-531 (2016).
- Taylor, D. K., Mook, D. M. Isoflurane Waste Anesthetic Gas Concentrations Associated with the Open-Drop Method. J Am Assoc Lab Anim Sci. 48 (1), 61-64 (2009).
- Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. Blood sample collection in small laboratory animals. J Pharmacol Pharmacother. 1 (2), 87-93 (2010).
- Li, D. S., Yuan, Y. H., Tu, H. J., Liang, Q. L., Dai, L. J. A protocol for islet isolation from mouse pancreas. Nature Protocols. 4 (11), 1649-1652 (2009).
- Auer, H., et al. The effects of frozen tissue storage conditions on the integrity of RNA and protein. Biotech Histochem. 89 (7), 518-528 (2014).
- Ma, J., Leung, L. S. Limbic System Participates in Mediating the Effects of General Anesthetics. Neuropsychopharmacology. 31, 1177-1192 (2006).
- Ijichi, H., et al. Aggressive pancreatic ductal adenocarcinoma in mice caused by pancreas-specific blockade of transforming growth factor-β signaling in cooperation with active Kras expression. Genes Dev. 20 (22), 3147-3160 (2006).
- Abiatari, I., et al. Moesin-dependent cytoskeleton remodelling is associated with an anaplastic phenotype of pancreatic cancer. J Cell Mol Med. 14 (5), 1166-1179 (2010).
- Goodpaster, A. M., Romick-Rosendale, L. E., Kennedy, M. A. a Statistical significance analysis of nuclear magnetic resonance-based metabonomics data. Analytical biochemistry. 401, 134-143 (2010).
- Yadav, D., et al. Idiopathic Tumefactive Chronic Pancreatitis: Clinical Profile, Histology, and Natural History After Resection. Clin Gastroenterol Hepatol. 1 (2), 129-135 (2003).
