조직학 분석 및 대사 프로 파일링에 대 한 마우스 췌의 해 부

Summary

이 비디오 문서는 조직학 분석 및 대사 프로 파일링에 대 한 해 부는 마우스에서 췌를 성공적으로 제거 하는 데 필요한 절차의 상세한 데모를 제공 합니다.

Abstract

우리는 조사 하 고 췌 특정 전사 인자, 1a cre-recombinase; lox 그만 lox-순 영 쥐 육, aspartic 산 12 codon에 글리신 (Ptf1a^{cre / +}; LSL-Kras^{G12D / +}) 인간 췌장암의 모델로 스트레인 마우스. 우리의 현재 연구의 목표는 췌장암 진행의 소설 대사 생체 식별 하입니다. 우리는 소변, 대변, 혈액, 그리고 췌 장 조직 추출, 뿐만 아니라 암 진행을 췌 장의 조직학 분석의 대사 프로 파일링을 수행 했습니다. 마우스 췌 하지 인간, 같은 잘 정의 된 고체 기관 이지만 오히려 마우스 내부 해부학에 익숙하지 않은 개인 또는 개인 거의 또는 전혀 경험 수행에 의해 쉽게 식별 되지 않으면 만들어진다 분산된 부드러운 조직 마우스 장기 해입니다. 이 문서의 목적은 현명한 상세한 제공 하는 시각적 데모 해 부에 의해 마우스 췌 장의 제거에 초보자 가이드. 이 문서는 특히 학생과 새로운 조사 대사 프로 파일링 또는 조직학 분석에 대 한 해 부에 의해 마우스 췌의 수확 필요로 하는 연구에 귀중 한 해야 합니다.

Introduction

마우스는 인간 췌장암^1,2의 중요 한 동물 모델로 떠오르고 있다. Ptf1a에서^{cre / +}; LSL Kra^{G12D / +} 마우스 모델, 쥐 육 (K-Ras) oncogene은 췌 장, 췌 장, 췌 장 intraepithelial 형성 (PanINs), 그 진행으로 알려져 있는 전 암 병 변의 결과에서 독점적으로 활성화 하는 순 영 췌 장 ductal adenocarcinomas로 일반적으로 불린다 PDACs³. 이 마우스 모델 시스템은 인간의 췌장암^4,5는 PanINs 삶과 자주 내 PDAC 진행의 첫 5 개월 이내 등장 추가 이용에 대 한 최상의 사용 가능한 동물 모델 중 하나는 반면 췌장암 가장 자주 발생 인 간에 있는 나이의 60-70 년 년^4,5, 단일.

Ptf1a에서 해 부에 의해 췌 장의 추출^{cre / +}; LSL Kra^{G12D / +} , 췌 장의 암 개발의 자세한 경도 조직학 시험에 대 한 다양 한 연령대에서 쥐 수 까지의 초기 PanIN 단계에서 진행 PDAC^{3,4 , 5}. 15 개월에 5에서 배열 하는 나가에 수확 하는 췌도 사용할 수 있습니다 준비 조직 질병 조직 ^{건강 한에서 전환 하는 동안 발생 하는 췌 장4 물질 대사에 글로벌 변화 특징을 추출 하 6,7}.

이 문서는 마우스 췌 장 추출 하는 데 필요한 단계의 완전 한 시각적 가이드를 제공 하 고 추가 분석을 위해 췌의 저장에 대 한 지침을 제공 합니다. 이 가이드는 개인 연구를 포함 한 다른 췌 장 질환에 유형 I 당뇨병, 그리고 학생과 새로운 사용 하 여 마우스 췌의 수확과 관련 된 연구 조사에 특히 유용 해야 한다 동등 하 게 가치가 있을 것입니다. 신진 대사 프로 파일링 또는 조직학 분석에 대 한 해 부입니다.

Protocol

비디오에서 실행 하 고 아래에 설명 된 절차는 기관 동물 관리 및 사용 위원회 (IACUC) 마이애미 대학에 의해 승인. 1. 준비 및 자극 테스트 수술 절차, 수술 및 사후 작업 테이블에 대 한 구축 두 가지 영역. 모든 재료와 필요한 기구 두 영역을 무대. 배기 후드 무대 운영 테이블. 절차의 지속적이 고 한 시 빨리 벗어나게 성능을 하는 방식으로 장비와 테이블 정렬.</…

Representative Results

그림 2 는 게시물 작업 영역 및 그림 1 운영 환경 영역에 대 한 개요를 보여준다. 이 설정은 최소한의 장비를 제공 하는 동안 준비, 개인에 가장 개인적인 필요에 맞게이 변경 하도록 선택할 수 있습니다. 프로토콜은 실험의 특정 요구에 따라 최적화 되어야 합니다. 이 절차는 필요 적절 한 euthanization9, 마우스의 …

Discussion

기존의 방법에 관하여 의미
마우스 해의 다른 비공식적인 동영상 존재 하는 동안이 비디오 문서에서는 첫 번째 전문 품질, 피어 검토, 자세한 단계를 추출에 필요한 해^{10 부에 의해 마우스 췌의 수확의 모든 시각적 데모} . 신진 대사 활동 및 인슐린에 대 한 주요 기관 되 고 췌와 생산, 해 부와 췌의 수확 생리 특성¹¹의 보존에 대 한 수 있습니다. 췌,…

Materials

Glass Jar	Corning	3140-150	The glass jar used in the video has been discontinued.  This is its replacement.
Lid of Glass Jar	Corning	9985-150	The glass jar lid used in the video has been discontinued.  This is its replacement.
15 mL Falcon Tubes	Fisher Scientific	339650
Surgical Scissors	Fisher Scientific	9201
Squeeze bottle	Fisher Scientific	03-409-10DD
100% Ethanol	Fisher Scientific	22-032-103
Formalin	Fisher Scientific	245-684
Foam Boards	Therapak	562908
Forceps	Fisher Scientific	200205SHN
1 mL 21G Syringes	BD Biosciences	309624
50 mL Falcon Tubes	Fisher Scientific	339652
2.0 mL Microcentrifuge Tubes	Fisher Scientific	02-681-258
Surgical Pads	Fisher Scientific	S67011
T-Pins Length:  2"	Advance Store Products	X32T-05
Sterilizing Wipes	Professional Disposables International Inc.	Q85084
Sharps Container	Fisher Scientific	14-827-122
Analytical Balance	Marshall Scientific	ME-AE200
4L Dewar	Taylor-Wharton	4LD
Shallow Wide Mouth Dewar	Fisher Scientific	F3087-V
Floating Microtube Rack	VWR	60986-100
Cryogenic Vial 1.2 mL, Sterile	Fisher Scientific	10-500-25
Isothesia (Isoflurane)	Henry Schein Animal Health	050033
Liquid Nitrogen	Wright Brothers	NIT-60-XX
Mouse Kras Strain	The Jackson Laboratory	OO8179
Mouse Cre Strain	MMRRC	OOO435-UNC