Ecografia in indagini sperimentali riproduttive sui ratti
Summary
Questo manoscritto descrive l’utilità dell’ultrasuono eseguito su ratti femminili di progettare modelli sperimentali per ricerca riproduttiva e ginecologica. Una spiegazione dettagliata di come eseguire la valutazione ecografica è mostrata.
Abstract
Con lo sviluppo della tecnologia riproduttiva aiutata e i limiti etici della ricerca sugli esseri umani, modelli animali ratto sono stati ampiamente utilizzati in medicina riproduttiva. Nel passato, lo studio dello sviluppo del sistema riproduttivo nei roditori è stato basato su una tantum esame istologico dei tessuti asportati. Recentemente, con lo sviluppo dell’ecografia transaddominale ad alta risoluzione, l’ecografia di alta qualità ora possa essere eseguita per valutare gli organi riproduttivi dei ratti, permettendo un nuovo metodo per studiare il sistema riproduttivo. Immagini sono state ottenute utilizzando un sistema ad alta definizione ultrasonographic. Ecografia ginecologica è stata effettuata il 28 otto-settimana-vecchi ratti non gravide e 5 ratti Sprague-Dawley incinti. Descriviamo come riconoscere gli organi del sistema riproduttivo e strutture associate nelle tipiche viste durante le diverse fasi dell’estro del ciclo. Colore flusso che Doppler è stato usato per misurare il flusso sanguigno dell’arteria uterina e valutare i cambiamenti di modello del flusso di sangue uterino durante diverse fasi della gravidanza. Abbiamo dimostrato che l’esplorazione di ultrasuono è un metodo utile per la valutazione dei cambiamenti negli organi riproduttivi interni. Il suo utilizzo genera la possibilità di condurre ulteriori esperimenti, comprese le procedure mediche o chirurgiche e fornisce la possibilità di monitorare i cambiamenti ecografici agli organi interni senza sacrificare animali.
Introduction
Modelli animali di ratto sono stati ampiamente utilizzati in medicina riproduttiva, tra cui in embrione e trapianto ovarico1,2. Tuttavia, in passato, lo studio dello sviluppo del sistema riproduttivo nei roditori è stato basato su una tantum esame istologico dei tessuti asportati e studio longitudinale delle variazioni quotidiane organo riproduttivo non è stato possibile in ratti3. Ultrasuono è stato ampiamente usato in riproduzione assistita in esseri umani da oltre 30 anni, ma questa preziosa tecnologia è stata applicata ai ratti recentemente.
Il nostro obiettivo era di stabilire un approccio ultrasonographic per valutare gli organi riproduttivi dei ratti Sprague-Dawley di progettare modelli sperimentali per la riproduzione e ginecologia inchiesta e per illustrare la procedura perché a nostra conoscenza, non ci sono pubblicazioni non visualizzato in quel momento attuale per quanto riguarda questa procedura. Descriviamo la procedura di esame ultrasonographic del sistema riproduttivo del ratto femmina e presentare i risultati ultrasonographic anatomia e flusso sanguigno dell’arteria uterina usando l’ultrasuono ad alta definizione. Abbiamo monitorato le caratteristiche dell’endometrio, ovaie e flusso sanguigno dell’arteria uterina in animali non gravidi nelle diverse fasi del ciclo di estro per valutare le differenze significative nello spessore dell’endometrio, morfologia ovarica e flusso di sangue uterino in diverse fasi del ciclo di estro, simile alle donne. Abbiamo usato attrezzature ad ultrasuoni di alta qualità con una frequenza di 70 MHz e un livello di risoluzione di 30 µm. Altro nostro obiettivo era di valutare i cambiamenti nella resistenza di flusso di sangue uterino in ratti incinti. Questa tecnica consente lo studio dei cambiamenti giornalieri negli organi riproduttivi senza sacrificare animali.
Ci sono diverse difficoltà tecniche che utilizzano ultrasuoni sui ratti. Queste difficoltà sono: l’endometrio di ratto è molto più sottile di una femmina umana4. Difficoltà nell’imaging le ovaie dei ratti è stato attribuito alla pelle più spessa e muscolatura della parete addominale in ratti, che ha provocato quasi completa attenuazione di ultrasuono5, e l’arteria uterina è molto più difficile da trovare non gravide ratti. Abbiamo risolto molti problemi tecnici con la procedura, e per quei problemi che rimangono, mostreremo come loro riduzione al minimo.
Successo di monitoraggio dei cambiamenti ecografici negli organi riproduttivi dei ratti senza dover sacrificare animali si aprirà la possibilità di costruire modelli futuri animali di medicina riproduttiva e altre procedure chirurgiche.
Protocol
Representative Results
Discussion
A causa delle modifiche procedurale e risoluzione dei problemi che è stato richiesto in questo studio, nonostante il nostro scopo di individuare tutte le fasi dell’estro ciclo in ratti facendo uso dell’ultrasuono, siamo stati in grado di trovare eventuali differenze significative. Supponiamo che queste difficoltà possono essere perché il ciclo di estro dura solo pochi giorni in ratti, a differenza del ciclo nelle donne. Siamo sicuri che tutte le misurazioni sono state fatte proprio il momento giusto per determinare ev…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Questa ricerca è stata sostenuta da animale sperimentazione sezione dell’Università di Murcia e l’ostetricia e ginecologia dipartimento di Murcia Università. Ringraziamo tutti i tecnici che lavorano presso il CEIB (Centro sperimentale en Investigaciones Biomédicas), la sezione della sperimentazione animale dell’Università di Murcia, che hanno collaborato a questo progetto.
Materials
| Vevo3100 high-resolution in vivo micro-imaging system* | Visual Sonics, inc. | www.visualsonics.com/products | |
| Vevo integrated rail system including physiological monitoring unit. | Visual Sonics, inc. | www.visualsonics.com/products | |
| MX400 Transducter | Visual Sonics, inc. | www.visualsonics.com/products | |
| Vevo Lab Software | Visual Sonics, inc. | www.visualsonics.com/products | |
| HSD: Sprague Dawley SD | Envigo, inc. | Rat strain | |
| Lubricating Gel | General Supply | ||
| CIBERTEC CA-EAC20 Anesthesia Trolley System | Cibertec S.A | Anesthesia Machine | |
| Ecogel 100 ultrasound gel | Eco-Med Pharmaceuticals Inc. | ||
| Hair removal lotion (Nair) | General Supply | ||
| Isoflurane | Esteve Veterinaria | Inhalatory anesthesia | |
| * Required software is Vevo software including B-Mode application, pulse wave Doppler application, and vascular strain analysis tools package. |
Riferimenti
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