Summary

ラットの生殖実験における超音波検査

Published: December 02, 2017
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Summary

本稿では、超音波の雌ラット生殖器・婦人科の調査のための実験モデルを設計する上で実行のユーティリティについて説明します。超音波検査を行う方法についてのステップバイ ステップの説明が表示されます。

Abstract

生殖補助医療技術の発展と人間の研究の倫理的な限界、ラット動物モデルは生殖医療で広く使用されています。過去には、齧歯動物に生殖システムの開発に関する研究摘出組織の病理検査を一度だけに基づいています。最近では、高解像度超音波の発展に伴い、高品質の超音波今実行できます生殖システムを研究するための新しい方法を許可するラットの生殖器官を評価します。画像は、高解像度の超音波システムを使用して得られました。婦人科の超音波検査は、28 の 8 週齢非妊娠ラットおよび 5 妊娠ラットで実行されました。生殖器系の器官を認識する方法について述べるし、発情期のさまざまなフェーズでの一般的なビューに関連付けられている構造のサイクルします。子宮動脈の血流を測定し、妊娠中のさまざまな段階で子宮の血流パターンの変化を評価する使用されたドップラー流れを色します。超音波探査が内部の生殖器の変化を評価するための有用な方法であることを確認しました。その使用は医療や外科的処置を含む、追加の実験を行うことの可能性を提起、動物を犠牲にすることがなく内部の臓器に超音波検査の変更を監視する機能を提供します。

Introduction

ラット動物モデルは、胎児の卵巣移植1,2を含む生殖医療で広く使用されています。しかし、過去には、摘出組織の病理検査を 1 回限りに基づいている齧歯動物に生殖システムの開発に関する研究、日常的な生殖器の変化に関する縦断的研究はラット3では不可能であった。超音波は 30 年以上にわたって人間の生殖補助医療技術で広く使用されていますが、この貴重な技術は最近ラットに適用されてのみ。

再現と産婦人科の調査のための実験モデルを設計し、ために、手順をデモンストレーションするラットの生殖器官を評価するための超音波のアプローチを確立する私達の目的は私達の知る限り、この手順に関する現在の可視化されたパブリケーションがありません。解剖学と高解像度超音波を用いた子宮動脈の血流の雌ラットの生殖系および所見の存在の超音波の検査の手順をについて説明します。我々 は子宮内膜の厚さ、卵巣と子宮の血流の差を評価する発情サイクルのさまざまな段階での子宮内膜、卵巣および非妊娠動物の子宮動脈の血流の特性を監視女性に似た発情サイクルのさまざまな段階。70 MHz の周波数と 30 μ m.の解像度レベルで高品質の超音波診断装置を用いてください。私たちの他の目的は、妊娠ラット子宮血流の抵抗の変化を評価するためだった。この技法は、生殖器官の毎日の変化の調査のための動物を犠牲にすることがなくできます。

ラットの超音波を利用したいくつかの技術的な問題があります。これらの難しさを含める: ラット子宮は人間女性4よりはるかに薄いです。ラットの卵巣をイメージングの難しさは、厚い皮膚と腹壁筋肉超音波5のほぼ完全な減衰につながったラットに起因しているし、子宮動脈は非妊娠の検索を非常に難しくラット。私たちは、プロシージャが多くの技術的な問題を解決しているし、それらを最小限に抑える方法を示す残っているこれらの問題。

超音波動物を犠牲にすることがなくラットの生殖器の正常なモニタリング、生殖医学の将来の動物モデルと他の外科手術の可能性を開きます。

Protocol

ガイドのケアと実験動物の使用のための勧告を健康の国民の協会および到着に従いに従い、本研究を行った (動物資源研究領域: 生体実験のレポート) のガイドライン。プロトコルは、ディレクティブ 2010年/63/EU 承認番号 A13170404 を使用 (Anexo 1) を遵守する動物実験のライセンスを受けた。すべての実験は、(EU 指令 63年/2010, RD 53/2013) 動物の倫理的な心配のための国民のガイドラインに従う欧州?…

Representative Results

子宮角 (表 1) の 2 つの側面間に有意差前後子宮角直径または子宮内膜の厚みはありませんでした。グループ 2 と比較して、グループ 1 で平均子宮内膜厚が厚い、しかし有意差 (P > 0.05) (図 3) の 2 つのグループの間に発見されました。それにもかかわらず、子宮内膜の形態 (図 2) の変更に伴う発情サイクルの近く (8 のうち 28 ラット) で?…

Discussion

手続きの変更とトラブルシューティング、発情の満ち欠けの周期、超音波を用いて、ラットのすべての私たちの目的にもかかわらず、この研究で必要だったため大きな違いを見つけることができませんでした。我々 は仮説、発情サイクルのみ女性のサイクルとは異なり、ラットでは数日を持続するのでこれらの問題可能性があります。すべての測定が正確に任意の違いを決定する適切なタイ…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

この研究は、ムルシア大学動物実験セクションと産科婦人科部のムルシア大学によって支えられました。このプロジェクトに協力している人ムルシア大学の動物実験施設部 CEIB (セントロ実験 en 研究 Biomédicas) で働くすべての技術者に感謝いたします。

Materials

Vevo3100 high-resolution in vivo micro-imaging system* Visual Sonics, inc. www.visualsonics.com/products
Vevo integrated rail system including physiological monitoring unit. Visual Sonics, inc. www.visualsonics.com/products
MX400 Transducter Visual Sonics, inc. www.visualsonics.com/products
Vevo Lab Software Visual Sonics, inc. www.visualsonics.com/products
HSD: Sprague Dawley SD Envigo, inc. Rat strain
Lubricating Gel General Supply
CIBERTEC CA-EAC20 Anesthesia Trolley System Cibertec S.A  Anesthesia Machine
Ecogel 100 ultrasound gel Eco-Med Pharmaceuticals Inc.
Hair removal lotion (Nair)  General Supply
Isoflurane Esteve Veterinaria Inhalatory anesthesia
* Required software is Vevo software including B-Mode application, pulse wave Doppler application, and vascular strain analysis tools package.

Riferimenti

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Citazione di questo articolo
Wang, T., Oltra-Rodríguez, L., García-Carrillo, N., Nieto, A., Cao, Y., Sánchez-Ferrer, M. L. Ultrasonography in Experimental Reproductive Investigations on Rats. J. Vis. Exp. (130), e56038, doi:10.3791/56038 (2017).

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