Summary

Fareler üzerinde deneysel üreme araştırmalarda Ultrasonografi

Published: December 02, 2017
doi:

Summary

Bu el yazması üreme ve jinekolojik soruşturma için deneysel modelleri tasarlamak için dişi fareler üzerinde yapılan ultrason, yardımcı programı açıklanır. Ultrasonografik değerlendirme gerçekleştirmek nasıl adım adım bir açıklama gösterilir.

Abstract

Yardımlı üreme teknolojisi gelişimi ve insanlar üzerinde araştırma etik sınırlamalar ile sıçan hayvan modelleri üreme tıpta yaygın olarak kullanılmıştır. Geçmişte, üreme sistemi geliştirme Rodents çalışmanın tek seferlik histolojik çıkarılan doku muayenede dayalı olmuştur. Son zamanlarda, yüksek çözünürlüklü transabdominal ultrason gelişmesiyle birlikte, yüksek kaliteli ultrason şimdi fareler, üreme sistemi eğitim için yeni bir yöntem sağlayan üreme organlarının değerlendirmek için gerçekleştirilebilir. Görüntüleri yüksek çözünürlüklü bir Ultrasonografik sistemi kullanılarak elde. Jinekolojik Ultrasonografi 28 sekiz haftalık gebe olmayan fareler ve 5 hamile Sprague-Dawley fareler üzerinde gerçekleştirildi. Biz nasıl üreme sistemi organlarının tanımak tarif ve ilişkili yapıları farklı aşamaları estrus tipik görünümlerinde döngüsü. Akış Doppler uterin arter kan akımını ölçmek ve uterin kan akışı desen değişiklikler gebelik farklı aşamalarında değerlendirmek için kullanılan renk. Ultrason keşif iç üreme organları değişimler değerlendirmek için yararlı bir yöntem olduğunu göstermiştir. Kullanımı tıbbi veya cerrahi prosedürleri dahil olmak üzere ek deneyler olasılığını yükseltir ve hayvanlar ödün vermeden iç organlarına Ultrasonografik değişiklikleri izleme olanağı sağlar.

Introduction

Sıçan hayvan modelleri embriyo ve yumurtalık nakli1,2‘ de dahil olmak üzere üreme tıpta yaygın olarak kullanılmaktadır. Ancak, geçmişte, üreme sistemi geliştirme Rodents çalışmanın tek seferlik histolojik çıkarılan doku muayenede dayalı ve gün-gün üreme organı değişiklikleri boyuna incelenmesi fareler3‘ te mümkün olmamıştır. Ultrason yaygın insanlarda yardımlı üreme teknolojisi 30 yıldır kullanılmıştır, ancak bu değerli teknoloji sadece fareler için son zamanlarda uygulanmış.

Hedefimiz Sprague-Dawley Rat için üreme ve kadın hastalıkları araştırma deneysel modelleri tasarlamak için ve çünkü yordamı göstermek için üreme organların değerlendirilmesinde Ultrasonografik bir yaklaşım kurmak oldu bizim bilgi için Bu yordamı ile ilgili hiçbir geçerli görüntülenmeyecektir yayın vardır. Biz kadın sıçan üreme sistemi ve mevcut Ultrasonografik bulgular Ultrasonografik muayene anatomi ve uterin arter kan akımı yüksek çözünürlüklü ultrason kullanarak açıklayınız. Rahim kalınlığı, yumurtalık morfoloji ve uterin kan akışında önemli farklılıkları değerlendirmek için estrus döngüsünün farklı aşamalarında endometrium, yumurtalıklar ve uterin arter kan akımı gebe olmayan hayvanlarda özellikleri takip kadınlara benzer estrus döngüsünün farklı aşamalarında. Biz 70 MHz frekans ve 30 µm. bir çözünürlük seviyesi ile yüksek kaliteli ultrason cihazları used Direnç gebe rats uterin kan akımı değişiklikleri değerlendirmek için diğer hedefimiz oldu. Hayvanlar ödün vermeden günlük değişimleri üreme organlarında çalışma için bu tekniği sağlar.

Ultrason fareler üzerinde kullanan birkaç teknik zorlukları vardır. Bu zorluklar içerir: fare endometrium çok bir insan kadın4daha incedir. Fareler yumurtalık Imaging zorluk daha kalın deri ve karın duvarı kas Sıçanlarda ultrason5zayıflama tamamlamak sonuçlanan atfedilen ve uterin arter gebe olmayan bulmak çok daha zor olduğunu fareler. Biz yordamı ile birçok teknik sorunlar çözüldü ve kalır bu sorunlar için biz bunları en aza indirmek nasıl göstereceğim.

Sıçan hayvan kurban gerek olmadan üreme organlarında Ultrasonografik değişiklikler başarılı izlenmesi diğer cerrahi ve üreme tıbbı gelecekteki hayvan modelleri oluşturma olasılığı açılır.

Protocol

Bu çalışma önerileri Kılavuzu’nda bakım ve kullanım laboratuvar hayvanları için Ulusal Sağlık enstitüleri ve uygun olarak varış ile sıkı uygun olarak gerçekleştirilmiştir (hayvan araştırma: Raporlama In Vivo deneyler) yönergeleri. Protokol hayvan deney yönergesi 2010/63/AB ile yetki numarası A13170404 ile (Anexo 1) uymak için lisans aldı. Tüm deneylerin hayvanlar (RD 53/2013, AB direktifi 63/2010) etik bakımı için ulusal yönergeleri izleyerek bir Avrupa Birliği sertifikalı laboratuvar yap…

Representative Results

Rahim boynuz (Tablo 1) iki taraf arasında antero-posterior rahim boru çapları veya endometrium kalınlığı önemli hiçbir farkı vardı. Grup 2 ile karşılaştırıldığında, ortalama rahim kalınlığı 1 grubunda kalın ama Hayır önemli farklar yapıldı (P > 0,05) (şekil 3) iki grup arasında bulundu. Yine de, endometrium Morfoloji (Şekil 2) değişiklikleri ile ilişkili estrus döngüsü yakın (8 dışarı-in 28 fareler) sıv?…

Discussion

Yordam değişiklikler ve bu çalışmada amacımız tüm ultrason, kullanarak fareler içinde estrus aşamalarını döngüsü tanımlama rağmen gerektiren sorun giderme nedeniyle biz herhangi bir önemli farklar bulamadık. Biz estrus döngüsü yalnızca Sıçanlarda kadınlar döngüsünde farklı olarak bir kaç gün sürer çünkü bu zorluklar olabileceğini öngörmekteyiz. Eminiz tüm ölçümler farklılıklarını belirlemek için tam olarak doğru zamanda yapılmıştır. Bu nedenle, biz döngüsü aşamalar…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Bu araştırma hayvan deneme Murcia Üniversitesi bölümü ve kadın doğum ve jinekoloji bölümü Murcia Üniversitesi tarafından desteklenmiştir. Kim bu proje üzerinde işbirliği var. CEIB (Centro deneysel tr Investigaciones Biomédicas), University of Murcia hayvan deney bölümünde çalışan tüm teknisyenler teşekkür ediyoruz.

Materials

Vevo3100 high-resolution in vivo micro-imaging system* Visual Sonics, inc. www.visualsonics.com/products
Vevo integrated rail system including physiological monitoring unit. Visual Sonics, inc. www.visualsonics.com/products
MX400 Transducter Visual Sonics, inc. www.visualsonics.com/products
Vevo Lab Software Visual Sonics, inc. www.visualsonics.com/products
HSD: Sprague Dawley SD Envigo, inc. Rat strain
Lubricating Gel General Supply
CIBERTEC CA-EAC20 Anesthesia Trolley System Cibertec S.A  Anesthesia Machine
Ecogel 100 ultrasound gel Eco-Med Pharmaceuticals Inc.
Hair removal lotion (Nair)  General Supply
Isoflurane Esteve Veterinaria Inhalatory anesthesia
* Required software is Vevo software including B-Mode application, pulse wave Doppler application, and vascular strain analysis tools package.

Riferimenti

  1. Hunter, R. K., et al. Adipose-Derived Stromal Vascular Fraction Cell Effects on a Rodent Model of Thin Endometrium. PLoS ONE. 10 (12), e0144823 (2015).
  2. Wang, H., Dey, S. K. Roadmap to embryo implantation: clues from mouse models. Nat Rev Genet. 7 (3), 185-199 (2006).
  3. Pistner, A., Belmonte, S., Coulthard, T., Blaxall, B. C. Murine Echocardiography and Ultrasound Imaging. J Vis Exp. (42), (2010).
  4. Lohmiller, J. J., Swing, S. P. Reproduction and Breeding. The Laboratory Rat. , 147-164 (2006).
  5. Jaiswal, R. S., Singh, J., Adams, G. P. High-resolution ultrasound biomicroscopy for monitoring ovarian structures in mice. Reprod Biol Endocrinol. 7 (69), (2009).
  6. Kim, G. H. Murine Fetal Echocardiography. J Vis Exp. (72), (2013).
  7. Jing, Z., Qiong, Z., Yonggang, W., Yanping, L. Rat bone marrow mesenchymal stem cells improve regeneration of thin endometrium in rat. Fertil Steril. 101 (2), 587-594 (2014).
  8. Mu, J., Adamson, S. L. Developmental changes in hemodynamics of uterine artery, utero- and umbilicoplacental, and vitelline circulations in mouse throughout gestation. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 291 (3), H1421-H1428 (2006).
  9. Anderson, C. M., Lopez, F., Zhang, H. Y., Pavlish, K., Benoit, J. N. Reduced uteroplacental perfusion alters uterine arcuate artery function in the pregnant Sprague-Dawley rat. Biol Reprod. 72 (3), 762-766 (2005).
  10. Hongmei, L., et al. Ultrasound Molecular Imaging of Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 2 Expression for Endometrial Receptivity Evaluation. Theranostics. 5 (2), 206-217 (2015).
check_url/it/56038?article_type=t

Play Video

Citazione di questo articolo
Wang, T., Oltra-Rodríguez, L., García-Carrillo, N., Nieto, A., Cao, Y., Sánchez-Ferrer, M. L. Ultrasonography in Experimental Reproductive Investigations on Rats. J. Vis. Exp. (130), e56038, doi:10.3791/56038 (2017).

View Video