Summary

Échographie dans des enquêtes de reproduction expérimentales chez le rat

Published: December 02, 2017
doi:

Summary

Ce manuscrit décrit l’utilité de l’échographie effectuée sur les rats femelles pour concevoir des modèles expérimentaux pour reproduction et gynécologique enquête. Une explication détaillée de la façon d’effectuer une évaluation échographique est montrée.

Abstract

Avec le développement de techniques de reproduction assistée et les limites éthiques de la recherche sur les êtres humains, des modèles animaux de rat ont été couramment en médecine de la reproduction. Dans le passé, l’étude du développement du système reproducteur chez les rongeurs a reposé sur un examen histologique des tissus excisés ponctuel. Récemment, avec le développement de l’échographie transabdominale à haute résolution, échographie de haute qualité peut désormais être effectuée afin d’évaluer les organes reproducteurs des rats, ce qui permet une nouvelle méthode pour étudier le système reproducteur. Images ont été obtenues à l’aide d’un système haute résolution échographique. Échographie gynécologique a effectué 28 huit semaines non-gestantes et 5 rates Sprague-Dawley. Nous décrivons comment reconnaître les organes du système reproducteur et des structures connexes dans des vues typiques au cours des différentes phases de l’oestrus cycle. Couleur des flux que Doppler a été utilisée pour mesurer le débit sanguin de l’artère utérine et d’évaluer les changements de modèle pour le débit sanguin utérin au cours des différentes étapes de la grossesse. Nous avons démontré que l’exploration de l’échographie est une méthode utile pour évaluer les changements dans les organes reproducteurs internes. Son utilisation soulève la possibilité de mener des expériences additionnelles, y compris les procédures médicales ou chirurgicales et offre la possibilité de suivre l’évolution échographique aux organes internes sans pour autant sacrifier les animaux.

Introduction

Modèles animaux rat ont été largement utilisées en médecine de la reproduction, y compris dans l’embryon et de l’ovaire transplantation1,2. Toutefois, dans le passé, l’étude du développement du système reproducteur chez les rongeurs a reposé sur un examen histologique des tissus excisés ponctuel, et l’étude longitudinale des variations quotidiennes d’organe reproducteur n’a pas été possible à des rats,3. L’échographie a été largement utilisé dans les techniques de reproduction assistée chez les humains depuis plus de 30 ans, mais cette précieuse technologie n’a été appliquée récemment à des rats.

Notre objectif était d’établir une approche échographique pour évaluer les organes reproducteurs des rats Sprague-Dawley pour concevoir des modèles expérimentaux pour reproduction et gynécologie d’investigations et de démontrer la procédure parce qu’à notre connaissance, Il n’y a aucune publication visualisée actuelles au sujet de cette procédure. Nous décrivons la procédure de l’examen échographique du système reproducteur de la femelle rat et résultats échographiques sur l’anatomie et le débit sanguin de l’artère utérine en utilisant des ultrasons de haute définition. Nous avons mesuré les caractéristiques de l’endomètre, des ovaires et des flux sanguin artères utérines chez les femmes non enceintes animaux à différents stades du cycle oestral afin d’évaluer les différences significatives dans l’épaisseur de l’endomètre, de la morphologie ovarienne et de débit sanguin utérin dans différentes étapes du cycle oestral, semblable aux femmes. Nous avons utilisé un appareil à ultrasons de haute qualité avec une fréquence de 70 MHz et un niveau de résolution de 30 µm. Notre autre objectif était d’évaluer les changements dans la résistance du débit sanguin utérin chez des rates gravides. Cette technique permet l’étude des variations quotidiennes dans les organes reproducteurs sans sacrifier les animaux.

Il y a plusieurs difficultés techniques en utilisant des ultrasons sur les rats. Ces difficultés incluent : l’endomètre de rat est beaucoup plus mince qu’un humain femelle4. Difficulté dans les ovaires des rats d’imagerie a été attribuée à peau plus épaisse et la musculature de la paroi abdominale chez le rat, qui a abouti à atténuation quasi-complète de l’échographie à5, et de l’artère utérine est beaucoup plus difficile de trouver des femmes enceintes rats. Nous avons résolu de nombreux problèmes techniques avec la procédure, et pour ces problèmes qui persistent, nous montrons comment minimiser.

Surveillance réussie des changements échographique dans les organes reproducteurs des rats sans avoir à sacrifier les animaux ouvrira la possibilité de construire des futurs modèles animaux de médecine de la reproduction et d’autres interventions chirurgicales.

Protocol

Cette étude a été réalisée en stricte conformité avec les recommandations du guide pour le soin et l’utilisation des animaux de laboratoire, de la National Institutes of Health et conformément à l’arrivée (Animal Research : Reporting des expériences In Vivo) lignes directrices. Le protocole a reçu une licence pour se conformer à la Directive 2010/63/UE, avec le numéro d’autorisation A13170404 (Anexo 1) de l’expérimentation animale. Toutes les expériences ont été effectuées dans un laboratoire c…

Representative Results

Il n’y a aucune différence significative dans les diamètres antéro-postérieur corne utérine ou dans l’épaisseur de l’endomètre, entre les deux rives de la corne utérine (tableau 1). Par rapport au groupe 2, l’épaisseur moyenne de l’endomètre dans le groupe 1 a des différences plus épais, mais non significatives (P > 0,05) ont été notées entre les deux groupes (Figure 3). Néanmoins, nous avons trouvé fluide à l’intérieur de l’utérus (chez les…

Discussion

En raison des modifications procédurales et dépannage qui s’imposait dans cette étude, malgré notre but d’identifier toutes les phases de l’oestrus cycle chez des rats en utilisant des ultrasons, nous n’avons pu trouver aucune différence significative. Nous émettons l’hypothèse que ces difficultés peuvent être parce que le cycle oestral ne dure que quelques jours chez le rat, à la différence du cycle chez les femmes. Nous sommes sûrs que toutes les mesures ont été effectuées exactement le bon mom…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Cette recherche a été financée par Animal Experimentation Section de l’Université de Murcia et Université de département de gynécologie de Murcie et d’obstétrique. Nous remercions tous les techniciens travaillant à la CEIB (Centro expérimentale en Investigaciones Biomédicas), la section de l’expérimentation animale de l’Université de Murcie, qui ont collaboré à ce projet.

Materials

Vevo3100 high-resolution in vivo micro-imaging system* Visual Sonics, inc. www.visualsonics.com/products
Vevo integrated rail system including physiological monitoring unit. Visual Sonics, inc. www.visualsonics.com/products
MX400 Transducter Visual Sonics, inc. www.visualsonics.com/products
Vevo Lab Software Visual Sonics, inc. www.visualsonics.com/products
HSD: Sprague Dawley SD Envigo, inc. Rat strain
Lubricating Gel General Supply
CIBERTEC CA-EAC20 Anesthesia Trolley System Cibertec S.A  Anesthesia Machine
Ecogel 100 ultrasound gel Eco-Med Pharmaceuticals Inc.
Hair removal lotion (Nair)  General Supply
Isoflurane Esteve Veterinaria Inhalatory anesthesia
* Required software is Vevo software including B-Mode application, pulse wave Doppler application, and vascular strain analysis tools package.

Riferimenti

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Citazione di questo articolo
Wang, T., Oltra-Rodríguez, L., García-Carrillo, N., Nieto, A., Cao, Y., Sánchez-Ferrer, M. L. Ultrasonography in Experimental Reproductive Investigations on Rats. J. Vis. Exp. (130), e56038, doi:10.3791/56038 (2017).

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