בדיקת אולטרה סאונד בחקירות הרבייה ניסויים על חולדות
Summary
כתב יד זה מתאר את התועלת של שבוצעה על חולדות נקבות לעצב ניסיוניות לחקירה הרבייה, הגינקולוגית. הסבר צעד אחר צעד כיצד לבצע הערכה ultrasonographic מוצג.
Abstract
עם התפתחות הטכנולוגיה סייעה הרבייה, המגבלות האתית של מחקר על בני אדם, חייתיים חולדה היה בשימוש נרחב ברפואה הרבייה. בעבר, חקר התפתחות מערכת הרבייה אצל מכרסמים מבוסס על בחינה היסטולוגית חד פעמית של רקמות נכרת. לאחרונה, עם ההתפתחות של אולטראסאונד transabdominal ברזולוציה גבוהה, sonography באיכות גבוהה ניתן כעת לבצע כדי להעריך את אברי הרבייה של חולדות, ומאפשר שיטה חדשה ללימוד במערכת הרבייה. תמונות התקבלו באמצעות מערכת ultrasonographic ברזולוציה גבוהה. בדיקת אולטרה סאונד הגינקולוגית בוצעה על חולדות שאינה בהריון 28 בת שבוע 8 ו-5 עכברושים ספראג-Dawley בהריון. אנו נסביר כיצד לזהות את האיברים של מערכת הרבייה, מבנים המשויכים בתצוגות טיפוסי במהלך השלבים השונים של ייחום מחזור. צבע זרימת שדופלר שימש למדידת זרימת הדם עורק הרחם ולהעריך שינויים תבנית זרימת דם הרחם בשלבים שונים של ההריון. הראו כי חקר אולטרסאונד היא שיטה שימושית עבור הערכת שינויים באברי הרבייה הפנימיים. השימוש מעלה את האפשרות של ניסויים נוספים, לרבות נהלי רפואית או כירורגית, והוא מספק את היכולת לעקוב אחר השינויים sonographic לאיברים פנימיים מבלי להתפשר על בעלי חיים.
Introduction
מודלים בעלי חיים חולדה היה בשימוש נרחב ברפואה הרבייה, לרבות העובר השתלת השחלות1,2. עם זאת, בעבר, חקר התפתחות מערכת הרבייה אצל מכרסמים מבוסס על בחינה היסטולוגית חד פעמית של רקמות נכרת, המחקר האורך של איבר הרבייה היומיומית שינויים שלא היה אפשרי חולדות3. אולטרסאונד כבר בשימוש נרחב בהטכנולוגיה סייעה הרבייה אצל בני אדם במשך 30 שנה, אך זו טכנולוגיה יקר רק הוחלה על חולדות לאחרונה.
המטרה שלנו היתה ליצור גישה ultrasonographic להערכת אברי הרבייה של חולדות ספראג-Dawley לעיצוב ניסיוניות לחקירה רבייה וגניקולוגיה, כדי להדגים את הפרוצדורה כי לידע שלנו, ישנם פרסומים לא דמיינו הנוכחית לגבי הליך זה. אנו מתארים את ההליך של בחינה ultrasonographic של מערכת הרבייה הנשית של החולדה, נוכח הממצאים ultrasonographic על האנטומיה ואת זרימת הדם עורק הרחם באמצעות אולטרסאונד בהבחנה גבוהה. אנחנו במעקב המאפיינים של רירית הרחם, השחלות עורק הרחם זרימת הדם בבעלי חיים שאינה בהריון בשלבים שונים של מחזור ייחום כדי להעריך את הבדלים משמעותיים עובי רירית הרחם, השחלות מורפולוגיה, זרימת הדם ברחם בשלבים שונים של מחזור ייחום, בדומה לנשים. השתמשנו ציוד סאונד באיכות גבוהה עם תדר 70 מגה-הרץ, רמת הרזולוציה של 30 מיקרומטר. מטרתנו אחרים היה להעריך את השינויים בהתנגדות של זרימת הדם ברחם בחולדות בהריון. טכניקה זו מאפשרת לימוד יומי לשינויים איברי הרבייה מבלי להתפשר על בעלי חיים.
ישנם מספר קשיים טכניים ניצול אולטרסאונד על חולדות. קשיים אלה כוללים: רירית הרחם עכברוש הוא רזה הרבה יותר נקבה אנושית4. הקושי הדמיה השחלות של חולדות יוחסה עור עבה, מערכת השרירים של דופן הבטן אצל חולדות, אשר הביא כמעט מוחלטת הנחתה של אולטרסאונד5, ו. עורק הרחם היא הרבה יותר קשה למצוא שאינה בהריון חולדות. פתרנו הרבה בעיות טכניות עם ההליך, עבור אלה בעיות שנותרו, אנו מציגים כיצד למזער אותם.
ניטור מוצלחת של שינויים sonographic אברי הרבייה של חולדות ללא צורך להקריב חיות תיפתח האפשרות של בניית מודלים בבעלי חיים עתידיים ברפואה הרבייה, ניתוחים אחרים.
Protocol
Representative Results
Discussion
עקב השינויים פרוצדורלי ופתרון שנדרשה במחקר זה, למרות מטרתנו לזיהוי כל השלבים של ייחום מחזור אצל חולדות באמצעות אולטרסאונד, היינו מסוגלים למצוא הבדלים משמעותיים כלשהם. אנו משערים כי קשיים אלה יכול להיות בגלל מחזור ייחום נמשך רק כמה ימים אצל חולדות, בניגוד המחזור אצל נשים. אנו בטוחים כי כל ה…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
מחקר זה נתמך על ידי בעלי חיים לניסויים סעיף של מורסיה אוניברסיטת ואת יולדות מחלקת גינקולוגיה מורסיה האוניברסיטה. אנו מודים לכל הטכנאים בעבודה CEIB (en ניסיוני Centro Investigaciones Biomédicas), החלק של ניסויים בבעלי חיים של אוניברסיטת מורסיה, ששיתפו יש את הפרויקט הזה.
Materials
| Vevo3100 high-resolution in vivo micro-imaging system* | Visual Sonics, inc. | www.visualsonics.com/products | |
| Vevo integrated rail system including physiological monitoring unit. | Visual Sonics, inc. | www.visualsonics.com/products | |
| MX400 Transducter | Visual Sonics, inc. | www.visualsonics.com/products | |
| Vevo Lab Software | Visual Sonics, inc. | www.visualsonics.com/products | |
| HSD: Sprague Dawley SD | Envigo, inc. | Rat strain | |
| Lubricating Gel | General Supply | ||
| CIBERTEC CA-EAC20 Anesthesia Trolley System | Cibertec S.A | Anesthesia Machine | |
| Ecogel 100 ultrasound gel | Eco-Med Pharmaceuticals Inc. | ||
| Hair removal lotion (Nair) | General Supply | ||
| Isoflurane | Esteve Veterinaria | Inhalatory anesthesia | |
| * Required software is Vevo software including B-Mode application, pulse wave Doppler application, and vascular strain analysis tools package. |
Riferimenti
- Hunter, R. K., et al. Adipose-Derived Stromal Vascular Fraction Cell Effects on a Rodent Model of Thin Endometrium. PLoS ONE. 10 (12), e0144823 (2015).
- Wang, H., Dey, S. K. Roadmap to embryo implantation: clues from mouse models. Nat Rev Genet. 7 (3), 185-199 (2006).
- Pistner, A., Belmonte, S., Coulthard, T., Blaxall, B. C. Murine Echocardiography and Ultrasound Imaging. J Vis Exp. (42), (2010).
- Lohmiller, J. J., Swing, S. P. Reproduction and Breeding. The Laboratory Rat. , 147-164 (2006).
- Jaiswal, R. S., Singh, J., Adams, G. P. High-resolution ultrasound biomicroscopy for monitoring ovarian structures in mice. Reprod Biol Endocrinol. 7 (69), (2009).
- Kim, G. H. Murine Fetal Echocardiography. J Vis Exp. (72), (2013).
- Jing, Z., Qiong, Z., Yonggang, W., Yanping, L. Rat bone marrow mesenchymal stem cells improve regeneration of thin endometrium in rat. Fertil Steril. 101 (2), 587-594 (2014).
- Mu, J., Adamson, S. L. Developmental changes in hemodynamics of uterine artery, utero- and umbilicoplacental, and vitelline circulations in mouse throughout gestation. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 291 (3), H1421-H1428 (2006).
- Anderson, C. M., Lopez, F., Zhang, H. Y., Pavlish, K., Benoit, J. N. Reduced uteroplacental perfusion alters uterine arcuate artery function in the pregnant Sprague-Dawley rat. Biol Reprod. 72 (3), 762-766 (2005).
- Hongmei, L., et al. Ultrasound Molecular Imaging of Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 2 Expression for Endometrial Receptivity Evaluation. Theranostics. 5 (2), 206-217 (2015).
