УЗИ в экспериментальной репродуктивной исследования на крысах
Summary
Эта рукопись описывается утилита УЗИ на самок крыс в разработке экспериментальной модели для репродуктивного и гинекологических расследования. Приводится подробное объяснение о том, как выполнять ультрасонографическая оценки.
Abstract
С развитием вспомогательных репродуктивных технологий и этических ограничений исследований на людях крыса Животные модели широко используются в репродуктивной медицине. В прошлом изучение развития репродуктивной системы у грызунов была основана на одноразовый гистологическом подакцизным тканей. Недавно с развитием разрешением трансабдоминального ультразвука, сонография высокого качества теперь могут быть выполнены для оценки репродуктивных органов у крыс, позволяя новый метод для изучения репродуктивной системы. Изображения были получены с помощью систему с высоким разрешением эндокринологом. Гинекологическое УЗИ была проведена 28 8 недельных небеременных крыс и 5 беременных крысах Sprague-Dawley. Мы опишем, как признать органов репродуктивной системы и связанные с ними структуры в типичных представлениях на различных этапах эструса цикла. Цвет потока Doppler был использован для измерения потока крови маточной артерии и оценки матки шаблон изменения кровотока на различных стадиях беременности. Мы продемонстрировали, что ультразвуковое исследование является полезным методом для оценки изменений в внутренних половых органов. Его применение повышает возможность проведения дополнительных экспериментов, в том числе медицинские или хирургические процедуры и предоставляет возможность контролировать сонографические изменения внутренних органов без ущерба для животных.
Introduction
Крыса Животные модели широко используются в репродуктивной медицине, в том числе эмбриона и яичников трансплантации1,2. Однако в прошлом, изучение развития репродуктивной системы у грызунов была основана на одноразовый гистологическом подакцизным тканей и продольное исследование изменения повседневной репродуктивный орган не удалось в крыс3. УЗИ широко использовался в вспомогательных репродуктивных технологий в организме человека на протяжении более 30 лет, но это ценные технологии только был применен к крысам недавно.
Наша цель заключалась в создании ультрасонографическая подхода для оценки репродуктивных органов крысах Sprague-Dawley для разработки экспериментальных моделей для репродукции и гинекологии расследования и чтобы продемонстрировать порядок, потому что наши знания, Существует нет текущий визуализированных публикаций относительно этой процедуры. Мы описываем процедуры ультрасонографическое обследование женского пола крыса репродуктивной системы и настоящем ультрасонографическая выводы по анатомии и маточные артерии кровотока с помощью ультразвука высокой четкости. Мы мониторинг характеристики эндометрия, яичников и маточных артерий кровотока в небеременных животных на разных этапах цикла эструса оценить значительные различия в толщине эндометрия, яичников морфология и матки кровотока в различные этапы цикла эструса, похож на женщин. Мы использовали высококачественные ультразвуковое оборудование с частотой 70 МГц и уровнем резолюции 30 мкм. Наша цель заключалась в оценке изменений в сопротивлении матки кровотока в беременных крыс. Эта техника позволяет для изучения ежедневных изменений в репродуктивных органов без ущерба для животных.
Существует несколько технических трудностей в использовании ультразвука на крыс. Эти трудности включают в себя: Крыса эндометрия намного тоньше, чем человеческий девушки4. Трудности в imaging яичников у крыс было обусловлено толще кожи и мышц брюшной стенки у крыс, которые привели к почти полной затухания ультразвука5, и маточных артерий является гораздо более сложным найти в небеременных крысы. Мы решили многие технические проблемы с процедурой, и для тех проблем, которые остаются, мы покажем, как их минимизации.
Успешное мониторинг сонографические изменений в репродуктивных органах крыс без необходимости приносить в жертву животных будет открыта возможность строительства будущего животных моделей репродуктивной медицины и других хирургических процедур.
Protocol
Representative Results
Discussion
Из-за процедурных изменений и устранения неполадок, что требуется в этом исследовании, несмотря на нашей целью выявления все стадии эструса цикла у крыс с помощью ультразвука мы не смогли найти каких-либо существенных различий. Мы предполагаем, что эти трудности могут быть потому что ц?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Это исследование было поддержано животных экспериментов раздел Университета Мурсии и акушерства и гинекологии департамента Мурсия университета. Мы благодарим всех техников, работающих в CEIB (экспериментальный центр Ан Investigaciones Biomédicas), в разделе экспериментов на животных Университета Мурсии, которые сотрудничали на этот проект.
Materials
| Vevo3100 high-resolution in vivo micro-imaging system* | Visual Sonics, inc. | www.visualsonics.com/products | |
| Vevo integrated rail system including physiological monitoring unit. | Visual Sonics, inc. | www.visualsonics.com/products | |
| MX400 Transducter | Visual Sonics, inc. | www.visualsonics.com/products | |
| Vevo Lab Software | Visual Sonics, inc. | www.visualsonics.com/products | |
| HSD: Sprague Dawley SD | Envigo, inc. | Rat strain | |
| Lubricating Gel | General Supply | ||
| CIBERTEC CA-EAC20 Anesthesia Trolley System | Cibertec S.A | Anesthesia Machine | |
| Ecogel 100 ultrasound gel | Eco-Med Pharmaceuticals Inc. | ||
| Hair removal lotion (Nair) | General Supply | ||
| Isoflurane | Esteve Veterinaria | Inhalatory anesthesia | |
| * Required software is Vevo software including B-Mode application, pulse wave Doppler application, and vascular strain analysis tools package. |
Riferimenti
- Hunter, R. K., et al. Adipose-Derived Stromal Vascular Fraction Cell Effects on a Rodent Model of Thin Endometrium. PLoS ONE. 10 (12), e0144823 (2015).
- Wang, H., Dey, S. K. Roadmap to embryo implantation: clues from mouse models. Nat Rev Genet. 7 (3), 185-199 (2006).
- Pistner, A., Belmonte, S., Coulthard, T., Blaxall, B. C. Murine Echocardiography and Ultrasound Imaging. J Vis Exp. (42), (2010).
- Lohmiller, J. J., Swing, S. P. Reproduction and Breeding. The Laboratory Rat. , 147-164 (2006).
- Jaiswal, R. S., Singh, J., Adams, G. P. High-resolution ultrasound biomicroscopy for monitoring ovarian structures in mice. Reprod Biol Endocrinol. 7 (69), (2009).
- Kim, G. H. Murine Fetal Echocardiography. J Vis Exp. (72), (2013).
- Jing, Z., Qiong, Z., Yonggang, W., Yanping, L. Rat bone marrow mesenchymal stem cells improve regeneration of thin endometrium in rat. Fertil Steril. 101 (2), 587-594 (2014).
- Mu, J., Adamson, S. L. Developmental changes in hemodynamics of uterine artery, utero- and umbilicoplacental, and vitelline circulations in mouse throughout gestation. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 291 (3), H1421-H1428 (2006).
- Anderson, C. M., Lopez, F., Zhang, H. Y., Pavlish, K., Benoit, J. N. Reduced uteroplacental perfusion alters uterine arcuate artery function in the pregnant Sprague-Dawley rat. Biol Reprod. 72 (3), 762-766 (2005).
- Hongmei, L., et al. Ultrasound Molecular Imaging of Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 2 Expression for Endometrial Receptivity Evaluation. Theranostics. 5 (2), 206-217 (2015).
