Aparato para la recolección de tejido Microcolumns
Summary
Aquí se describe un protocolo para la producción de la cosecha las agujas que pueden utilizarse para recoger tejidos de la piel de espesor total sin causar donantes sitio marcar con una cicatriz. Las agujas pueden combinarse con un sistema de recolección simple para lograr la recolección de gran volumen.
Abstract
Este manuscrito describe el proceso de producción de un aparato de laboratorio, componentes estándar, que puede utilizarse para recoger microcolumns del tejido cutáneo de espesor total. El tamaño pequeño de la microcolumns permite que los donantes sitios curar rápidamente sin causar sitio dispensador de aceite marcar con una cicatriz, mientras cosecha tejido de grosor total permite la incorporación de todos los componentes celulares y extracelulares del tejido de la piel, los incluidos asociados con regiones dérmicas más profundas y las estructuras anexiales de la piel, que todavía tienen que ser reproducido con éxito utilizando la técnicas de ingeniería convencional. El microcolumns puede ser aplicado directamente en las heridas de la piel para aumentar la sanación, o pueden utilizarse como fuente de tejido autólogo de la célula de otros enfoques de ingeniería de tejidos. Las agujas de cosecha se hacen modificando agujas hipodérmicas estándar, y puede ser usados solo para cosechar pequeñas cantidades de tejido o combinados con un sistema de simple colección basada en succión (también hecho de suministros de laboratorio comúnmente disponibles) para alto volumen de la cosecha para facilitar los estudios en modelos animales grandes.
Introduction
Injerto de piel autólogo es la base de la reparación de la herida, pero está limitado por la escasez de sitio donante y la morbilidad, llevando a los esfuerzos en las últimas décadas para desarrollar nuevas opciones terapéuticas para reemplazar convencionales injertos de piel1,2 . Recientemente hemos desarrollado un método alternativo de recolección piel para aprovechar las ventajas del injerto de piel de grosor total reduciendo al mínimo morbosidad del sitio donante. Recogida de piel de grosor total en forma de pequeño (~0.5 mm de diámetro) “microcolumns”, sitios dispensadores de aceite son capaces de sanar rápidamente y sin dejar cicatrices en circunstancias normales (para posibles excepciones, véase la sección discusión)3. Microcolumns puede ser aplicado directamente en camas de la herida para acelerar el cierre de la herida, reducir la contracción3y restaurar una amplia gama de tipos de células epidérmicas y dérmicas y las estructuras adnexal funcional4, muchos de los cuales carecen de injerto de piel del partir-grueso convencional o actual Bioingeniería de sustitutos de piel,5. La capacidad de microcolumns para aumentar la curación y de sus sitios de donantes a curar sin dejar cicatrices tanto sido independientemente validados por otros grupos de investigación6,7.
Previamente hemos desarrollado un sistema de recolección de laboratorio para permitir la colección de microcolumns en escala de8; sin embargo, este sistema se compone de muchos componentes modificados para requisitos particulares que no están ampliamente disponibles. Aquí, describimos en detalle el proceso de recolección de agujas, así como sistemas de recolección simple, sobre todo componentes estándar, que puede utilizarse para lograr alto volumen cosecha produciendo. El aparato descrito en este manuscrito es conveniente para la vitro y el trabajo animal, pero no para el uso en seres humanos. Un dispositivo clínico con autorización de la FDA para la aplicación de esta técnica en seres humanos está disponible en el mercado pero no se discutirá en detalle aquí.
Protocol
Representative Results
Discussion
Los métodos aquí descritos están diseñados para permitir la colección de tejido microcolumns en cantidades suficientes para en vivo grandes estudios con animales, utilizando herramientas de suministros de laboratorio disponibles en el mercado. Este aparato ha sido utilizado previamente en la recolección del tejido de piel humana suprimido4,9 como cerdos en piel3. Los parámetros específicos descritos son aquellos que fueron…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabajo fue apoyado en parte por el ejército, la Marina, NIH, fuerza aérea, VA y asuntos de salud para apoyar el esfuerzo de afirmar II, bajo el no. de concesión W81XWH-13-2-0054. Los Estados Unidos Ejército investigación adquisición de actividad médica, 820 Chandler Street, Fort Detrick, MD 21702-5014 es la oficina de adquisición adjudicación y administradora. Opiniones, interpretaciones, conclusiones y recomendaciones son las del autor y no necesariamente son endosadas por el Departamento de defensa.
Materials
| Diamond wheel | Dremel | 545 | |
| Hypodermic needle (19G) | Fisher Scientific | 14-840-98 | Other needle sizes could be used, depending on experimental needs |
| Stome wheel | Dremel | 540 | |
| Syringe (20mL with luer lock) | Fisher Scientific | 22-124-967 | |
| Suction adapter | Tulip Medical | PA20BD | Optional, for high volume harvesting |
| Suction canister | Fisher Scientific | 19-898-212 | Optional, for high volume harvesting. Sterilize before use. |
| Suction tubing | Medline | DYND50216H | Optional, for high volume harvesting |
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