Summary

Doku Microcolumns ürün toplama aparatı

Published: October 25, 2018
doi:

Summary

Burada biz hasat üretmek için bir protokol tarif tam kalınlıkta deri dokusu donör neden olmadan toplamak için kullanılan iğneler site yara izi. İğneler yüksek hacimli hasat elde etmek için basit toplama sistemi ile kombine edilebilir.

Abstract

Bu el yazması için tam kalınlıkta deri dokusunun microcolumns toplamak için kullanılan kapalı bileşenlerden yapılmış bir laboratuvar cihazları, üretim işlemini açıklar. Microcolumns küçük boyutlu donör sitenin hızlı bir şekilde yara izi, tam-kalınlık doku sağlar tüm hücresel ve ekstraselüler bileşenleri de dahil olmak üzere cilt dokusunun birleşme ilişkili hasat sırasında donör sitesi yaratmadan iyileşmek olanak verir. daha derin dermal bölgeler ve adneksiyal cilt yapıları ile hangi henüz başarıyla geleneksel doku mühendislik teknikleri kullanarak yeniden gerekir. Microcolumns şifa artırılması amacıyla doğrudan deri yaraları uygulanabilir veya bunlar için diğer doku mühendisliği yaklaşımlar otolog hücre/doku kaynağı olarak kullanılabilir. Hasat iğneler standart Hipodermik iğneler değiştirerek yapılır ve tek başına doku küçük miktarlarda hasat için kullanılan veya bir basit emme tabanlı toplama sistemi için (aynı zamanda yaygın olarak bulunan Laboratuvar malzemeleri yapılan) ile birleştiğinde yüksek hacimli çalışmalar büyük hayvan modellerinde kolaylaştırmak için hasat.

Introduction

Otolog deri nakli yara onarım dayanak noktası olduğunu, ama donör sitesi kıtlığı ve morbidite, uyumlu çabaları için son yıllarda geleneksel deri nakli1,2 değiştirmek için yeni tedavi olanakları geliştirmek için önde gelen sınırlıdır . Son zamanlarda donör sitesi morbidite en aza indirirken tam kalınlıkta deri nakli faydaları koşum için cilt hasat alternatif bir yöntem geliştirdik. Tam kalınlıkta deri küçük (~0.5 mm çap) “microcolumns” şeklinde toplayarak, donör siteleri hızla ve normal şartlar altında yara izi olmadan iyileşmek edebiliyoruz (potansiyel özel durumlar için aşağıdaki tartışma bölümüne bakın)3. Microcolumns yara kapatma hızlandırmak, daralma3azaltmak için doğrudan yara yatak uygulanabilir ve epidermal ve dermal hücre tipleri ve fonksiyonel adneksiyal yapıları4birçoğu eksik, çeşitli bir yelpazede geri yükleme geleneksel Böl-kalınlık deri nakli veya geçerli Biyomühendislik cilt yerine5. Microcolumns şifa getirmek ve skarlasma olmaksizin iyilesmektedir için donör sitelerinin yeteneği her ikisi de bağımsız olarak doğrulanmış tarafından diğer araştırma grupları6,7.

Biz daha önce microcolumns ölçek8toplamayı etkinleştirmek için bir laboratuvar toplama sistemi geliştirdik; Ancak, bu sistem yaygın olarak kullanılabilir olmayan birçok özelleştirilmiş bileşenleri oluşur. Burada, biz yüksek hacimli hasat elde etmek için kullanılan çoğunlukla kapalı bileşenlerinden, yapılan iğneler gibi basit toplama sistemleri, hasat üreten için süreci ayrıntılı bir şekilde tanımlamak. Bu el yazması açıklanan cihaz uygundur vitro ve hayvan çalışmaları için ama insanlarda kullanım için değil. İnsanlarda bu tekniği uygulamak için klinik bir aygıt FDA izni ile ticari olarak mevcut olmakla birlikte burada ayrıntılı olarak ele değil.

Protocol

Tüm iş içeren canlı hayvan ve hayvan doku örnekleri Massachusetts Genel Hastanesi kurumsal hayvan bakım ve kullanım Komitesi (IACUC) tarafından onaylanmış olan. 1. üretim iğneler hasat Üretim aşaması kurulumu Güvenli bir yazı üzerine bir kadın radarı kilit bağlantı aracı ve radarı kilit sahne (Şekil 1A) merkezindedir post bir rotasyon sahne üzerine bağlarsınız. Bu ilk döndürme aşama dike…

Representative Results

Hasat iğneler yaklaşık % 80-90 başarı oranı tam kalınlıkta deri dokusunun microcolumns toplamak gerekir ve her microcolumn epidermis, dermis ve subkutan bazı yağ (Şekil 4) içermelidir. Eğer hasat başarı oranı düşük ya da doku bir iğne eklemek zor duruma gelirse, yeni bir iğne büyük olasılıkla gereklidir. O zaman hasat için başarı oranı bile yeni iğne ile sürekli olarak düşük ise, iğneler muhtemelen çok kısa. <p class="…

Discussion

Yöntem tanımlamak burada doku microcolumns piyasada bulunan Laboratuvar malzemeleri yapılan araçlarını kullanarak vivo içinde büyük hayvan çalışmaları için yeterli miktarda toplamayı etkinleştirmek için tasarlanmıştır. Bu cihaz doku eksize insan cilt4,9 yanı sıra canlı domuz cilt3hasat daha önce kullanılmış. Açıklanan belirli parametreleri domuz kullanmak için en uygun bulundu bunlar. Bu aynı aparat,…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Bu eser kısmen ordu, Donanma, NIH, Hava Kuvvetleri, VA ve Sağlık işleri Ödülü No altında AFIRM II çaba desteklemek için tarafından desteklenmiştir W81XWH-13-2-0054. ABD Ordu tıbbi araştırma edinme etkinliğini, 820 Chandler Street, Fort Detrick, MD 21702-5014 ödüllendirme ve yönetme edinme ofisten arıyorlar. Görüşleri, Yorumlar, sonuç ve öneriler Onlar yazar ve mutlaka Savunma Bakanlığı tarafından onaylanan değil.

Materials

Diamond wheel Dremel 545
Hypodermic needle (19G) Fisher Scientific 14-840-98 Other needle sizes could be used, depending on experimental needs
Stome wheel Dremel 540
Syringe (20mL with luer lock) Fisher Scientific 22-124-967
Suction adapter Tulip Medical PA20BD Optional, for high volume harvesting
Suction canister Fisher Scientific 19-898-212 Optional, for high volume harvesting. Sterilize before use.
Suction tubing Medline DYND50216H Optional, for high volume harvesting

Riferimenti

  1. Sun, B. K., Siprashvili, Z., Khavari, P. A. Advances in skin grafting and treatment of cutaneous wounds. Science. 346 (6212), 941-945 (2014).
  2. Singh, M., et al. Challenging the Conventional Therapy: Emerging Skin Graft Techniques for Wound Healing. Plastic and Reconstructive Surgery. 136 (4), 524-530 (2015).
  3. Tam, J., et al. Fractional Skin Harvesting: Autologous Skin Grafting without Donor-site Morbidity. Plastic and Reconstructive Surgery. Global Open. 1 (6), 47 (2013).
  4. Tam, J., et al. Reconstitution of full-thickness skin by microcolumn grafting. Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine. 11 (10), 2796-2805 (2017).
  5. Huang, C., et al. Regeneration of hair and other skin appendages: A microenvironment-centric view. Wound Repair and Regeneration. 24 (5), 759-766 (2016).
  6. Fernandes, J. R., et al. Micro-mechanical fractional skin rejuvenation. Plastic and Reconstructive Surgery. 131 (2), 216-223 (2013).
  7. Rettinger, C. L., Fletcher, J. L., Carlsson, A. H., Chan, R. K. Accelerated epithelialization and improved wound healing metrics in porcine full-thickness wounds transplanted with full-thickness skin micrografts. Wound Repair and Regeneration. 25 (5), 816-827 (2017).
  8. Franco, W., et al. Fractional skin harvesting: device operational principles and deployment evaluation. Journal of Medical Devices. 8 (4), 041005 (2014).
  9. Rasmussen, C. A., et al. Chimeric autologous/allogeneic constructs for skin regeneration. Military Medicine. 179, 71-78 (2014).
  10. Ter Horst, B., Chouhan, G., Moiemen, N. S., Grover, L. M. Advances in keratinocyte delivery in burn wound care. Advanced Drug Delivery Reviews. 123, 18-32 (2018).
  11. Wong, V. W., Levi, B., Rajadas, J., Longaker, M. T., Gurtner, G. C. Stem cell niches for skin regeneration. International Journal of Biomaterials. 2012, 926059 (2012).
  12. Manstein, D., Herron, G. S., Sink, R. K., Tanner, H., Anderson, R. R. Fractional photothermolysis: a new concept for cutaneous remodeling using microscopic patterns of thermal injury. Lasers in Surgery and Medicine. 34 (5), 426-438 (2004).
  13. Iriarte, C., Awosika, O., Rengifo-Pardo, M., Ehrlich, A. Review of applications of microneedling in dermatology. Clinical, Cosmetic and Investigational Dermatology. 10, 289-298 (2017).
  14. Anderson, R. R., et al. Laser treatment of traumatic scars with an emphasis on ablative fractional laser resurfacing: consensus report. Journal of the American Medical Association Dermatology. 150 (2), 187-193 (2014).
  15. Hogan, S., Velez, M. W., Ibrahim, O. Microneedling: a new approach for treating textural abnormalities and scars. Seminars in Cutaneous Medicine and Surgery. 36 (4), 155-163 (2017).
  16. Manuskiatti, W., Fitzpatrick, R. E., Goldman, M. P. Long-term effectiveness and side effects of carbon dioxide laser resurfacing for photoaged facial skin. Journal of the American Academy of Dermatology. 40 (3), 401-411 (1999).
check_url/it/58289?article_type=t

Play Video

Citazione di questo articolo
Tam, J., Farinelli, W., Franco, W., Anderson, R. R. Apparatus for Harvesting Tissue Microcolumns. J. Vis. Exp. (140), e58289, doi:10.3791/58289 (2018).

View Video