Summary

جهاز لقطع الأنسجة ميكروكولومنس

Published: October 25, 2018
doi:

Summary

هنا يمكننا وصف بروتوكول لإنتاج حصاد الإبر التي يمكن استخدامها لجمع الأنسجة كاملة-سمك الجلد دون التسبب بالجهات المانحة للموقع تندب. يمكن الجمع بين الإبر مع نظام لجمع بسيطة لتحقيق حصاد كبيرة الحجم.

Abstract

ويصف هذه المخطوطة في عملية الإنتاج لجهاز مختبر، المصنوعة من المكونات الجاهزة، التي يمكن استخدامها لجمع ميكروكولومنس أنسجة الجلد كامل-سمك. الحجم الصغير ميكروكولومنس تسمح الجهات المانحة المواقع للشفاء بسرعة دون التسبب في موقع المانحة تندب، بينما الحصاد الكامل-سمك الأنسجة يتيح إدماج جميع مكونات الخلوية وخارج الخلية الأنسجة الجلد، بما في ذلك تلك المرتبطة مع أعمق مناطق الجلد وهياكل الجلد أدنيكسال، التي لم يمكن استنساخها بنجاح باستخدام الأنسجة التقليدية هندسة التقنيات. يمكن أن تطبق ميكروكولومنس مباشرة في الجروح الجلدية لتعزيز الشفاء، أو يمكن استخدامها كمصدر لخلية/الأنسجة الذاتي للنهج هندسة الأنسجة الأخرى. تصنع الإبر الحصاد عن طريق تعديل معيار إبر الإبر، ويمكن استخدامها وحدها لحصاد كميات صغيرة من الأنسجة أو مقترنة بنظام جمع شفط بسيطة (أيضا مصنوعة من اللوازم المختبرية المتاحة عموما) ارتفاع حجم الحصاد لتيسير الدراسات في النماذج الحيوانية الكبيرة.

Introduction

ترقيع الجلد الذاتي هو الدعامة الأساسية لإصلاح الجرح، بل أنه مقيد بندرة موقع الجهات المانحة والاعتلال، مما أدى إلى بذل جهود متضافرة في العقود الأخيرة لتطوير خيارات علاجية جديدة لتحل محل التقليدية ترقيع الجلد1،2 . ونحن مؤخرا بوضع طريقة بديلة لحصاد الجلد تسخير فوائد ترقيع الجلد كامل-سمك مع التقليل من الاعتلال موقع الجهات المانحة. بجمع كامل-سمك الجلد في شكل الصغيرة (~0.5 مم) “ميكروكولومنس”، مواقع الجهات المانحة قادرة على شفاء سريعاً ودون تندب في الظروف العادية (للاستثناءات المحتملة، راجع المقطع المناقشة أدناه)3. ميكروكولومنس يمكن تطبيقها مباشرة في أسرة الجرح للتعجيل بإغلاق الجرح، والحد من انكماش3، واستعادة مجموعة متنوعة من أنواع الخلايا البشرة والجلد والهياكل الوظيفية أدنيكسال4، التي تعاني من نقص في ترقيع الجلد سبليت-سمك التقليدية أو بدائل الجلد المحورة وراثيا الحالية5. القدرة ميكروكولومنس لتعزيز الشفاء ومواقعهم المانحة للشفاء دون تندب لها سواء بشكل مستقل صودق قبل6،مجموعات البحث الأخرى7.

ونحن قد سبق أن وضعت نظام حصاد مختبر لتمكين مجموعة ميكروكولومنس في الجدول8؛ ومع ذلك، يتكون هذا النظام من العديد من المكونات المخصصة التي لا تتوفر على نطاق واسع. هنا، نحن تصف بالتفصيل هذه العملية لإنتاج حصاد الإبر، فضلا عن نظم جمع بسيطة، مصنوعة من معظمهم من المكونات الجاهزة، التي يمكن استخدامها لتحقيق حصاد كبيرة الحجم. جهاز الموصوفة في هذه المخطوطة مناسب في المختبر وعمل الحيوان، ولكن ليس للاستخدام في البشر. جهاز سريرية مع إزالة إدارة الأغذية والعقاقير لتطبيق هذا الأسلوب في البشر هو متاح تجارياً ولكن لن تناقش بالتفصيل هنا.

Protocol

جميع العمل التي تشمل الحيوانات الحية وتمت الموافقة على عينات الأنسجة الحيوانية “ماساشوستس العام المؤسسي الحيوان الرعاية في المستشفيات” واستخدام اللجنة (إياكوك). 1-إنتاج حصاد الإبر الإعداد لمرحلة الإنتاج تأمين رابط قفل اللوير الإناث على وظيفة، وجبل المنصب على مرح?…

Representative Results

الإبر الحصاد ينبغي أن تكون قادرة على جمع ميكروكولومنس أنسجة الجلد كامل-سمك مع حوالي 80-90 ٪ نسبة نجاح، وينبغي أن يتضمن كل microcolumn البشرة، الأدمة، وبعض الدهون تحت الجلد (الشكل 4). إذا كان معدل النجاح لحصاد منخفضة، أو إذا كان يصبح من الصعب إدخال إبرة في الأنسجة، ?…

Discussion

الأساليب الموصوفة هنا تهدف إلى تمكين جمع ميكروكولومنس الأنسجة بكميات كافية في فيفو كبير الدراسات الحيوانية، استخدام أدوات مصنوعة من اللوازم المختبرية المتاحة تجارياً. وقد استخدمت هذا الجهاز سابقا في حصاد الأنسجة من جلد الإنسان قصت4،9 ، فضلا عن جلد ال?…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

كان يؤيد هذا العمل جزئيا بالجيش والبحرية، والمعاهد الوطنية للصحة، والقوة الجوية، خامسا والشؤون الصحية لدعم هذا الجهد الثاني أفيرم، تحت “رقم جائزة” W81XWH-13-2-0054. “الولايات المتحدة الجيش الطبية اكتساب النشاط البحثي”، 820 تشاندلر الشارع، فورت ديتريك، MD 21702-5014 هو مكتب اقتناء مانحة الامتياز والقائمة. الآراء والتفسيرات والاستنتاجات والتوصيات هي آراء المؤلف ولا تقرها وزارة الدفاع بالضرورة.

Materials

Diamond wheel Dremel 545
Hypodermic needle (19G) Fisher Scientific 14-840-98 Other needle sizes could be used, depending on experimental needs
Stome wheel Dremel 540
Syringe (20mL with luer lock) Fisher Scientific 22-124-967
Suction adapter Tulip Medical PA20BD Optional, for high volume harvesting
Suction canister Fisher Scientific 19-898-212 Optional, for high volume harvesting. Sterilize before use.
Suction tubing Medline DYND50216H Optional, for high volume harvesting

Riferimenti

  1. Sun, B. K., Siprashvili, Z., Khavari, P. A. Advances in skin grafting and treatment of cutaneous wounds. Science. 346 (6212), 941-945 (2014).
  2. Singh, M., et al. Challenging the Conventional Therapy: Emerging Skin Graft Techniques for Wound Healing. Plastic and Reconstructive Surgery. 136 (4), 524-530 (2015).
  3. Tam, J., et al. Fractional Skin Harvesting: Autologous Skin Grafting without Donor-site Morbidity. Plastic and Reconstructive Surgery. Global Open. 1 (6), 47 (2013).
  4. Tam, J., et al. Reconstitution of full-thickness skin by microcolumn grafting. Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine. 11 (10), 2796-2805 (2017).
  5. Huang, C., et al. Regeneration of hair and other skin appendages: A microenvironment-centric view. Wound Repair and Regeneration. 24 (5), 759-766 (2016).
  6. Fernandes, J. R., et al. Micro-mechanical fractional skin rejuvenation. Plastic and Reconstructive Surgery. 131 (2), 216-223 (2013).
  7. Rettinger, C. L., Fletcher, J. L., Carlsson, A. H., Chan, R. K. Accelerated epithelialization and improved wound healing metrics in porcine full-thickness wounds transplanted with full-thickness skin micrografts. Wound Repair and Regeneration. 25 (5), 816-827 (2017).
  8. Franco, W., et al. Fractional skin harvesting: device operational principles and deployment evaluation. Journal of Medical Devices. 8 (4), 041005 (2014).
  9. Rasmussen, C. A., et al. Chimeric autologous/allogeneic constructs for skin regeneration. Military Medicine. 179, 71-78 (2014).
  10. Ter Horst, B., Chouhan, G., Moiemen, N. S., Grover, L. M. Advances in keratinocyte delivery in burn wound care. Advanced Drug Delivery Reviews. 123, 18-32 (2018).
  11. Wong, V. W., Levi, B., Rajadas, J., Longaker, M. T., Gurtner, G. C. Stem cell niches for skin regeneration. International Journal of Biomaterials. 2012, 926059 (2012).
  12. Manstein, D., Herron, G. S., Sink, R. K., Tanner, H., Anderson, R. R. Fractional photothermolysis: a new concept for cutaneous remodeling using microscopic patterns of thermal injury. Lasers in Surgery and Medicine. 34 (5), 426-438 (2004).
  13. Iriarte, C., Awosika, O., Rengifo-Pardo, M., Ehrlich, A. Review of applications of microneedling in dermatology. Clinical, Cosmetic and Investigational Dermatology. 10, 289-298 (2017).
  14. Anderson, R. R., et al. Laser treatment of traumatic scars with an emphasis on ablative fractional laser resurfacing: consensus report. Journal of the American Medical Association Dermatology. 150 (2), 187-193 (2014).
  15. Hogan, S., Velez, M. W., Ibrahim, O. Microneedling: a new approach for treating textural abnormalities and scars. Seminars in Cutaneous Medicine and Surgery. 36 (4), 155-163 (2017).
  16. Manuskiatti, W., Fitzpatrick, R. E., Goldman, M. P. Long-term effectiveness and side effects of carbon dioxide laser resurfacing for photoaged facial skin. Journal of the American Academy of Dermatology. 40 (3), 401-411 (1999).
check_url/it/58289?article_type=t

Play Video

Citazione di questo articolo
Tam, J., Farinelli, W., Franco, W., Anderson, R. R. Apparatus for Harvesting Tissue Microcolumns. J. Vis. Exp. (140), e58289, doi:10.3791/58289 (2018).

View Video