Summary
Dit manuscript beschrijft een methode voor continue video-EEG-opnames met behulp van meerdere diepte-elektroden bij neonatale muizen die hypoxie-ischemie ondergaan.
Abstract
Hypoxie ischemie is de meest voorkomende oorzaak van neonatale aanvallen. Diermodellen zijn cruciaal voor het begrijpen van de mechanismen en fysiologie die ten grondslag liggen aan neonatale aanvallen en hypoxie-ischemie. Dit manuscript beschrijft een methode voor continue video-elektro-encefalogram (EEG) monitoring bij neonatale muizen om aanvallen te detecteren en EEG-achtergrond te analyseren tijdens hypoxie-ischemie. Gebruik van video en EEG in combinatie maakt een beschrijving van de semiologie van de aanvallen en de bevestiging van aanvallen mogelijk. Deze methode maakt ook analyse van vermogensspectrogrammen en EEG-achtergrondpatroontrends gedurende de experimentele periode mogelijk. In dit hypoxie-ischemiemodel maakt de methode EEG-registratie voorafgaand aan letsel mogelijk om een normatieve basislijn te verkrijgen en tijdens letsel en herstel. De totale controletijd wordt beperkt door het onvermogen om pups langer dan vier uur van de moeder te scheiden. Hoewel we in dit manuscript een model van hypoxisch-ischemische aanvallen hebben gebruikt, kan deze methode voor neonatale video-EEG-monitoring worden toegepast op verschillende ziekte- en aanvalsmodellen bij knaagdieren.
Introduction
Hypoxische ischemische encefalopathie (HIE) is een aandoening die jaarlijks 1,5 op de 1000 pasgeborenen treft en is de meest voorkomende oorzaak van neonatale aanvallen1,2. Baby's die overleven lopen risico op verschillende neurologische handicaps zoals hersenverlamming, verstandelijke beperking en epilepsie3,4,5.
Diermodellen spelen een cruciale rol bij het begrijpen en onderzoeken van de pathofysiologie van hypoxie-ischemie en neonatale aanvallen6,7. Een aangepast Vannucci-model wordt gebruikt om hypoxie-ischemie (HI) te induceren op postnatale dag 10 (p10)7,8. Muizenjongen van deze leeftijd vertalen zich neurologisch ruwweg naar de volledige term menselijke pasgeborene9.
Continue video-elektro-encefalografie (EEG) monitoring gebruikt in combinatie met dit letselmodel maakt verder begrip en karakterisering van neonatale hypoxische ischemische aanvallen mogelijk. Eerdere studies hebben verschillende methoden gebruikt voor het analyseren van neonatale aanvallen bij knaagdieren, waaronder video-opnames, beperkte EEG-opnames en telemetrie-EEG-opnames10,11,12,13,14,15,16. In het volgende manuscript bespreken we diepgaand het proces van het opnemen van continu video-EEG bij muizenpups tijdens hypoxie-ischemie. Deze techniek voor continue video-EEG-monitoring bij neonatale muisjongen kan worden toegepast op verschillende ziekte- en aanvalsmodellen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle dierstudies werden goedgekeurd door de Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) van de Universiteit van Virginia.
1. Elektrodegebouw/kabelbouw
- Gebruik een unipolaire geïsoleerde roestvrijstalen draad (0,005 " kale diameter, 0,008 " gecoat) om een elektrode te maken die is verbonden met een vrouwelijke socketconnector (vrouwelijke recipiëntconnector 0,079).
- Gebruik een speciale op maat gemaakte kabel om dieren op de versterker aan te sluiten.
- Bevestig een mannelijke 4-pins connector (Male connector 0.079") aan de 4-kanaals unity gain impedantie bijpassende operationele versterker (op-amp). Bevestig een 10K weerstand aan de draden die aansluiten op de 9 V batterij. Een aardingsdraad die niet op de op-amp is aangesloten, fungeert als het middelpunt van de batterij.
- Sluit het ene uiteinde van de kabel (AWG, 0,012" OD) aan op de op-amp en sluit het andere uiteinde van de kabel aan op de versterker.
2. Elektrode-implantatiechirurgie
- Verdoof de pup (postnatale dag 9) met 4-5% isofluraan in een neerwaartse stroomkap. Injecteer de pups vóór het begin van de procedure met bupivacaïne (0,02-0,05 ml, 0,25% subcutane lokale infiltratie).
- Zodra het dier onbeweeglijk is, breng je over naar een stereotactisch stadium met een neuskegel. Gebruik de achterkant van de oorbalk omdat deze zacht is om het hoofd stil te houden. Op deze leeftijd hebben pups geen volledig ontwikkeld oor om het puntige uiteinde van de oorbalk te gebruiken.
- Zet de stroom isofluraan lager en houd deze op 2,5-3%. Houd de gestage ademhaling van de pup in de gaten tijdens de operatieprocedure. Knijp in de staart om de pijnrespons te controleren en ga vervolgens verder met incisie.
- Steriliseer het incisiegebied op de schedel met betadine en alcohol (3 cycli van afwisselend jodium en 70% ethanol). Drapeer het omliggende lichaamsdeel zodanig dat het incisiegebied zichtbaar is.
- Open de voorste-achterste hoofdhuid van iets boven de ogen en trek ongeveer 0,5 cm huid terug. Plaats de muiskop op het stereotaxische podium zodat de huid naar buiten trekt en de schedel blootlegt.
- Breng waterstofperoxide aan op de schedel met een wattenstaafje en schraap de schedel schoon met een scalpelmesje. De schedel is erg zacht; wees voorzichtig tijdens het schrapen.
- Breng één druppel (ongeveer 50 μL) lijm aan en verdeel deze over het blootgestelde schedelgebied met behulp van de applicator. Stel gedurende 40 s bloot aan UV-licht om de lijm in te stellen.
- Meet de coördinaten met behulp van de blootgestelde bregma als referentie. Implantaatelektroden bilateraal in het CA1-gebied van de hippocampus [-3,5 mm Dorsaal-Ventraal (DV), ±2 mm Medial-Lateraal (ML), -1,75 mm diep (D)] en bilateraal in de pariëtale cortex [-1,22 mm DV, ±0,5 mm ML, -1 mm D] en een referentie-elektrode in het cerebellum17. Gebruik een naald van 32 G om een gat te maken in het gemarkeerde gebied.
- Reinig het bloed van het oppervlak van de schedel. Lagere elektroden bevestigd aan de vrouwelijke socket connector in de hersenen met behulp van de stereotaxische arm en fixeren op hun plaats met tandheelkundig acryl. Implanteer de elektrode in de hersenen. De headset met aansluiting zit bovenop de schedel, aan elkaar gelijmd door tandacryl.
- Injecteer ketoprofen (5 mg/kg) subcutaan in het interscapulaire gebied zodra de elektrode is gefixeerd. Plaats de pups terug bij de moeder.
OPMERKING: Introduceer de helft van het nest met de headset in één keer aan de moeder in plaats van ze één voor één voor te introduceren. Dit voorkomt dat moeder de headset van de pup beschadigt.
3. EEG-opstelling en -opname (baseline/pre-injury)
- Na 24 uur herstel na elektrode-implantatie plaatst u elk dier in een verwarmde (37 °C) op maat gemaakte plexiglaskamer voor EEG-opname. Deze kamer zal ook dienen als hypoxiekamer.
- Sluit pups in de kamer aan op een video-EEG-bewakingssysteem via een flexibele kabel (op maat gemaakte op-amp kabel).
OPMERKING: Met de headset op zijn plaats zijn de muizen vrij mobiel en vertonen ze geen verschillen in gedrag. Eenmaal bevestigd aan de elektrodedraden, moeten de draden in de kamer tether worden aangepast om de juiste hoeveelheid speling te bieden, zodat de pup vrij door de kamer kan bewegen. - Digitaliseer de EEG-gegevens op 1000 Hz met 1K-versterking met behulp van een grasversterker. Controleer het EEG-signaal (banddoorlaatfilter tussen 3-70 Hz) later met behulp van software (bijvoorbeeld LabChart Pro).
- Noteer een pre-verwond baseline EEG gedurende 30 minuten voorafgaand aan het loskoppelen van dieren voor de ligatieprocedure van de halsslagader.
4. Ligatie van de linker halsslagader
- Verdoof de pup (postnatale dag 10) met 4-5% isofluraan in een neerwaartse stroomkap en plaats ze op een speciaal ingerichte opstelling op een waterbadkussen. Plaats het dier in rugligging en zet de voorpoten vast met papieren tape.
- Verlaag de stroom van isofluraan tot 2-3%. Knijp in de staart voor pijnrespons en controleer de ademhaling tijdens de procedure.
- Steriliseer het incisiegebied (tussen de onderkaak en het sleutelbeen) aan de linkerkant van de nek met betadine en alcohol (3 cycli van afwisselend jodium en 70% ethanol).
- Maak een ongeveer 1 cm lange incisie aan de linkerkant van de nek met behulp van microscisors. Trek met behulp van een ontleedmicroscoop voorzichtig het onderhuidse weefsel en de huid terug om de halsslagader bloot te leggen. Zorg ervoor dat u de nervus vagus (die lateraal naar de slagader loopt) identificeert en voorzichtig scheidt en terugtrekt van de slagader.
- Rijg met microforceps een 5 cm lange steriele zijden hechting onder de slagader. Bind een dubbel geknoopte hechting rond de slagader om de stroom af te sluiten.
- Snijd de overtollige hechting en sluit de blootgestelde slagader door het onderhuidse weefsel en de huid terug te trekken. Gebruik vet bond om de incisie te verzegelen.
- Plaats het dier terug op continue EEG-monitoring in een kamer bij kamertemperatuur, die op een verwarmend matras wordt geplaatst. Neem spot infrarood temperatuurcontroles van de kerntemperatuur van de pup om te voorkomen dat de kamer wordt geopend. Laat het dier 1 uur herstellen voorafgaand aan hypoxie.
5. EEG en hypoxie
- Monitor Continu FiO2 (fractie van geïnspireerde zuurstof) in de kamer via een zuurstofmonitor.
- Spoel de kamer met 60 L/min van 100% N2 en 0,415 L/min voor 100% O2. Zodra de zuurstofverzadiging in de kamer 12% bereikt, verlaagt u de N2-stroom tot 10 l / min terwijl de O2-stroom ongewijzigd blijft. Houd met kleine aanpassingen de FiO2 gedurende 45 minuten op 8%.
- Na 45 minuten blootstelling aan hypoxie, retourneer FiO2 naar 21%.
- Laat pups herstellen in de kamer en controleer op EEG gedurende 2 uur post-hypoxie.
- Na voltooiing van de opnameperiode, koppelt u muizen los van eeg-opname en keert u terug naar de moeder.
6. EEG-analyse
- Analyseer het EEG-bestand met video in LabChart Pro. Laat een geblindeerde onderzoeker het EEG markeren voor aanvallen en achtergrondpatronen17. Aanvallen worden gedefinieerd als een elektrografische gebeurtenis die langer duurt dan 10 seconden met hoogfrequente ritmische scherpe golfontladingen (≥3x baseline) met duidelijke evolutie17.
- Laat een tweede geblindeerde onderzoeker gebeurtenissen willekeurig markeren voor overeenstemming.
- Bekijk de bijbehorende video voor elke gemarkeerde elekrografische gebeurtenis en analyseer volgens de neonatale gedragsmatige aanvalsscore van knaagdieren16. In het kort varieert deze score van 0-6 (immobiliteit tot ernstig tonisch-clonische gedrag). Om de semiologie van aanvallen verder te karakteriseren, analyseert u gedrag op lateraliteit (multifocale / bilaterale bewegingen versus focale / unilaterale versus gemengde).
- Maak een machtsspectrogram. Gebruik een snelle fouriertransformatie met een Cosine-Bell-gegevensvenster met een grootte van 1024 gegevenspunten. Maak een vloeiende x-as in het spectrogram met behulp van een vensteroverlapping van 87,5%. Druk het vermogen uit als μV218.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Epileptische semiologie
Blootstelling aan neonatale hypoxie-ischemie resulteert in zowel gegeneraliseerde als focale aanvallen bij muizen (figuur 1A-C). Video-EEG-opnames maken het mogelijk om elektrografische bevindingen te correleren met gedrag op video. Dit gedrag werd gescoord met behulp van een eerder gepubliceerde neonatale knaagdiergedragstestscore (BSS)16. Naast BSS hebben we gebeurtenissen gecategoriseerd op basis van de vraag of het gedrag focale / unilaterale, bilaterale of gemengde was (figuur 1B).
In dit model vertoonden muizen over het algemeen 3 patronen van epileptische semiologie: 1) repetitief cirkelen naar de zijkant van ligatie met verlenging van contralaterale ledematen, 2) verlies van houding met lichaamsflexie en staart gekruld aan de zijkant van ligatie, of 3) verlies van houding met eenzijdig of bilateraal peddelen van ledematen (variërende ernst en lengte). De meerderheid van de waargenomen voorvallen betrof focale/unilaterale of gemengde gedragingen (figuur 1B). Bovendien vertoonde een subgroep van muizen tijdens de hypoxische periode niet-convulsieve aanvalsactiviteit, waarbij de pup immobiel was met aanhoudende aanvalsactiviteit op EEG (figuur 1C).
Elektrografie opnames
EEG-opname werd 30 minuten voorafgaand aan carotisligatie gestart om een pre-blessure baseline te verkrijgen. De uitgangsactiviteit (figuur 1A en figuur 2A) was vergelijkbaar met de eerder beschreven achtergrond bij p10-muizenjongen17. Na de ligatie werden de pups onmiddellijk teruggeplaatst op video-EEG. Tijdens de periode tussen ligatie en het begin van hypoxie vertoont een subgroep van muizen convulsieve aanvallen (figuur 1A-C).
Na hypoxie-inductie nam de achtergrondamplitude op EEG af (figuur 3B) en vertoonde met tussenpozen uitbarstingen van piekgolfontladingen, gevolgd door onderdrukking (figuur 2A). Muizen vertonen elektrografische aanvallen, die uit een onderdrukte achtergrond komen als ritmische piekgolfontladingen en zich ontwikkelen om complexer en frequenter te worden, met polyspikegolven (figuur 2B). Tijdens hypoxie was machtsspectrogramanalyse opmerkelijk voor asymmetrieën tussen de ischemische en contralaterale hemisfeer (figuur 3A,B). Het ischemische halfrond vertoonde een burst-onderdrukkingspatroon en de contralaterale hemisfeer vertoonde een onderdrukte achtergrond (figuur 1A en figuur 3A,B). Gemiddeld beginnen aanvallen 5,5±8,1 minuten na inductie van hypoxie, waarbij elke gebeurtenis 56±57 seconden duurt. Er was een sterftecijfer van 13% tijdens hypoxie (n = 4/30), met alle sterfgevallen na een convulsieve (BSS = 5-6) aanval.
Tijdens reoxygenatie en herstel blijft een subgroep van muizen aanvallen hebben gedurende de rest van de registratieperiode (2 uur na hypoxie). EEG-achtergrond werd onderdrukt in vergelijking met baseline na hypoxie (figuur 1A en figuur 3), met geleidelijk herstel tijdens de post-hypoxie registratieperiode. Over de gehele opnameperiode vertoonden muizen gemiddeld 9±5 aanvalsgebeurtenissen, elk 54±57,7 s.
Figuur 1: Epileptische kenmerken bij p10-muizen die werden blootgesteld aan neonatale hypoxie-ischemie. (A) Representatief machtsspectrogram van de ischemische pariëtale cortex elektrode door de experimentele tijdlijn. (Amplitude kleuren heatmap schaal x10-6). Pijlen geven de tijd aan die ruwe elektro-encefalogramtraceringen onder het spectrogram vertegenwoordigen. (B) Aanvalsgedrag voor het hele experiment, postischemie / prehypoxie, tijdens hypoxie en posthypoxie. (C) Behavioral seizure score (BSS) en timing voor alle aanvallengebeurtenissen (n = 30 muizen, elke muis heeft een uniek symbool, elk punt is een discrete aanvalsgebeurtenis). 100% van de muizen gegrepen tijdens hypoxie (blauwe doos; tijd = −60 minuten is de voltooiing van carotisligatie, tijd = 0 is het begin van hypoxie). Dertien procent stierf tijdens hypoxie na een convulsieve aanval (graad 5-6). Dit cijfer is aangepast van Burnsed et al13. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 2: Karakteristieke elektro-encefalografie (EEG) patronen tijdens hypoxie ischemie. (A) EEG-achtergrond van links naar rechts: pre-verwonding baseline, burst suppression tijdens hypoxie, posthypoxie onderdrukking. Opname van ipsilaterale pariëtale cortex diepte-elektrode. (B) Evolutie van een aanval tijdens hypoxie. Opname van ipsilaterale hippocampale diepte-elektrode. Gearceerde dozen (I-V) kwamen overeen met uitgebreide EEG-fragmenten aan de rechterkant van (B). Dit cijfer is aangepast van Burnsed et al13. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 3: Asymmetrieën in EEG-achtergrond tussen ischemische en contralaterale hemisferen. (A) Asymmetrisch machtsspectrogram bij HI-muizen tijdens hypoxie (periode van 45 minuten) in ischemische cortex (links) en contralaterale cortex (rechts; amplitudeschaal x10-6). Burst-onderdrukkingspatroon en aanvallen in ischemische hemisfeer, onderdrukking in CL-hemisfeer. (B) Achtergrondsuppressie tijdens hypoxie en reoxygenatie in IL- en CL-hemisferen. Alle metingen van de gemiddelde spanning genomen van 10-seconden willekeurige fragmenten van het encefalogram over de experimentele periode (baseline, 30 minuten postligatie, tijdens hypoxie - 15 minuten en 30 minuten na start, na reoxygenatie - 15 minuten en 60 minuten na start) werden vergeleken met baseline. De baseline van elk dier diende als zijn eigen controle en de gegevens worden gerapporteerd als een percentage van de baseline (n = 5 muizen). Metingen werden uitgevoerd aan corticale elektroden. Dit cijfer is aangepast van Burnsed et al13. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
We hebben een model gepresenteerd voor continue video-EEG-monitoring bij neonatale muizen tijdens hypoxisch-ischemische aanvallen. Video-analyse in combinatie met EEG maakt karakterisering van de semiologie van aanvallen mogelijk. Analyse van EEG maakt extractie van vermogensspectrogrammen en achtergrondamplitudeanalyse mogelijk.
Correcte en zorgvuldige plaatsing van elektroden is cruciaal in dit protocol, omdat letsel tijdens het plaatsen van elektroden of onnauwkeurige plaatsing de resultaten aanzienlijk kan beïnvloeden. Beoordeling van de normale baseline EEG-activiteit voorafgaand aan letsel is van het grootste belang, omdat bloedingen of letsel tijdens het plaatsen van elektroden, hoewel zeldzaam, kunnen optreden. Ten tweede, om de juiste plaatsing van de elektrode te bevestigen, kunnen hersenen worden gesneden en onderzocht op elektrodesporen in de juiste plaatsing. Bovendien kan het niet terugbrengen van pups naar de moeder in groepen (individueel) ertoe leiden dat elektrodeheadsets worden beschadigd of dat pups door de moeder worden gedood of verwaarloosd.
Een beperking van deze methode is de limiet van ruimtelijke lokalisatie van diepte-elektrode-opnames in een klein neonataal brein. Dit beperkt het vermogen om specifieke aanvalshaarden op EEG-opnames te lokaliseren. Een andere beperking in dit model van hypoxie-ischemie is de variabiliteit in de aanvalslast. Variabiliteit in laesiegrootte en gedragsstoornissen in dit knaagdiermodel van hypoxie-ischemie is eerder goed beschreven7,8,19. Het is niet verrassend dat deze variabiliteit bestaat in de aanvalslast (zowel de duur van de aanvallen als het aantal aanvallen). Echter, consequent vertoont 100% van de pups in dit model aanvallen tijdens hypoxie. Ten slotte is de hoeveelheid tijd dat pups op EEG-monitoring kunnen zijn (weg van de moeder) beperkt. Daarom zijn we niet in staat om lopende aanvallen te karakteriseren met continu EEG op latere tijdstippen ten opzichte van het letsel.
Hoewel we in dit manuscript een hypoxie-ischemie-aanvalsmodel hebben gebruikt, kan deze methode voor continue video-EEG-monitoring bij neonatale muisjongen gemakkelijk worden toegepast op andere ziekte / epileptische modellen. Aanvallen bij neonatale knaagdieren zijn moeilijk te herkennen op basis van gedrag alleen, waardoor video-EEG-monitoring belangrijk is. Toekomstige onderzoeken zouden deze technieken kunnen gebruiken om de aanvalslast en semiologie in andere neonatale aanvalsmodellen of respons op therapeutica en neuroprotectieve maatregelen te analyseren.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Geen.
Acknowledgments
We erkennen de volgende financieringsbronnen: NIH NINDS - K08NS101122 (JB), R01NS040337 (JK), R01NS044370 (JK), University of Virginia School of Medicine (JB).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| SURGERY | |||
| Ball Point Applicator | Metrex Research | 8300-F | i-bond applicator |
| Cranioplast (Powder/Resin) | Coltene | H00383 | Perm Reline/Power |
| I-Bond | Kulzer GmbH, Germany | ||
| LOOK Silk Suture | Surgical Specialities Corporation | SP115 | LOOK SP115 Black Braided Silk Non absorbable surgical suture |
| RS-5168 Botvin Forceps | Roboz Surgical Instrument | RS5168 | Forcep for surgery/ligation |
| RS-5138 Graefe Forceps | Roboz Surgical Instrument | RS5138 | Forcep for surgery/ligation |
| UV light for I-Bond | Blast Lite By First Media | BL778 | UV ligth for I-bond |
| Vannas Microdissecting Scissor | Roboz Surgical Instrument | RS5618 | Scissor for ligation |
| Vet Bond | 3M Vetbond | 1469SB | Vet Glue |
| HYPOXIA | |||
| Hypoxidial | Starr Life Science | ||
| Oxygen sensor | Medical Products | MiniOxI- oxygen analyzer/sensor for hypoxia rig | |
| EEG RECORDING | |||
| Female receptacle connector 0.079" | Mill-Max Manufacturing Corp | 832-10-024-10-001000 | Ordered from Digikey |
| Grass Amplifier | Natus Neurology Incorporated | Grass Product | |
| LabChart Pro | ADI Instruments | Software to run the system | |
| Male Socket Connector 0.079" | Mill-Max Manufacturing Corp | 833-43-024-20-001000 | Ordered from Digikey |
| Operational Amplifier | Texas Instruments, Dallas, TX, USA | TLC2274CD | TLC2274 Quad Low-Noise Rail-to Rail Operational Amplifier |
| Operational Amplifier | Texas Instruments, Dallas, TX, USA | TLC2272ACDR | TLC2274 Quad Low-Noise Rail-to Rail Operational Amplifier |
| Stainless Steel wire | A-M Systems | 791400 | 0.005" Bare/0.008" Coated 100 ft |
| Ultra-Flexible Wire | McMaster-Carr | 9564T1 | 36 Gauze wire of various color |
References
- Vasudevan, C., Levene, M. Epidemiology and aetiology of neonatal seizures. Seminars in Fetal & Neonatal Medicine. , (2013).
- Volpe, J., et al.
- Shankaran, S., et al. Network EKSNNR. Childhood outcomes after hypothermia for neonatal encephalopathy. New England Journal of Medicine. 366 (22), 2085-2092 (2012).
- Pappas, A., et al. Cognitive outcomes after neonatal encephalopathy. Pediatrics. 135 (3), 624-634 (2015).
- van Schie, P. E., et al. Long-term motor and behavioral outcome after perinatal hypoxic-ischemic encephalopathy. European Journal of Paediatric Neurology. 19 (3), 354-359 (2015).
- Rensing, N., et al. Longitudinal analysis of developmental changes in electroencephalography patterns and sleep-wake states of the neonatal mouse. PLoS One. 13 (11), 1-17 (2018).
- Rice, J. E., Vannucci, R. C., Brierley, J. B. The influence of immaturity on hypoxic-ischemic brain damage in the rat. Annals of Neurology. 9 (2), 131-141 (1981).
- Burnsed, J. C., et al. Hypoxia-ischemia and therapeutic hypothermia in the neonatal mouse brain--a longitudinal study. PLoS One. 10 (3), 0118889 (2015).
- Semple, B. D., et al. Brain development in rodents and humans: Identifying benchmarks of maturation and vulnerability to injury across species. Progress in Neurobiology. , 1-16 (2013).
- Comi, A. M., et al. Gabapentin neuroprotection and seizure suppression in immature mouse brain ischemia. Pediatric Research. 64 (1), 81-85 (2008).
- Comi, A. M., et al. A new model of stroke and ischemic seizures in the immature mouse. Pediatric Neurology. 31 (4), 254-257 (2004).
- Kadam, S. D., White, A. M., Staley, K. J., Dudek, F. E. Continuous Electroencephalographic Monitoring with Radio-Telemetry in a Rat Model of Perinatal Hypoxia-Ischemia Reveals Progressive Post-Stroke Epilepsy. Journal of Neuroscience. 30 (1), 404-415 (2010).
- Burnsed, J., et al. Neuronal Circuit Activity during Neonatal Hypoxic - Ischemic Seizures in Mice. Annals of Neurology. 86, 927-938 (2019).
- Sampath, D., White, A. M., Raol, Y. H. Characterization of neonatal seizures in an animal model of hypoxic-ischemic encephalopathy. Epilepsia. 55 (7), 985-993 (2014).
- Sampath, D., Valdez, R., White, A. M., Raol, Y. H. Anticonvulsant effect of flupirtine in an animal model of neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy. Neuropharmacology. 123, 126-135 (2017).
- Kang, S. K., et al. and sex-dependent susceptibility to phenobarbital-resistant neonatal seizures: role of chloride co-transporters. Frontiers in Cellular Neuroscience. 9, 1-16 (2015).
- Zanelli, S., Goodkin, H. P., Kowalski, S., Kapur, J. Impact of transient acute hypoxia on the developing mouse EEG. Neurobiology of Disease. 68, 37-46 (2014).
- Lewczuk, E., et al. EEG and behavior patterns during experimental status epilepticus. Epilepsia. 59 (2), 369-380 (2017).
- Wu, D., Martin, L. J., Northington, F. J., Zhang, J. Oscillating gradient diffusion MRI reveals unique microstructural information in normal and hypoxia-ischemia injured mouse brains. Magnetic Resonance in Medicine. 72 (5), 1366-1374 (2014).
