Summary
Bu makalede hipoksi-iskemi geçiren yenidoğan farelerde birden fazla derinlik elektrodu kullanılarak sürekli video EEG kayıtları için bir yöntem açıklanmaktadır.
Abstract
Hipoksi iskemi yenidoğan nöbetlerinin en sık nedenidir. Hayvan modelleri, yenidoğan nöbetleri ve hipoksi iskemisinin altında kalan mekanizmaları ve fizyolojiyi anlamak için çok önemlidir. Bu makalede, hipoksi iskemisi sırasında nöbetleri tespit etmek ve EEG arka planını analiz etmek için yenidoğan farelerinde sürekli video elektroensefalogram (EEG) izleme yöntemi açıklanmaktadır. Video ve EEG'nin birlikte kullanılması, nöbet semiyolojisinin tanımlanmasına ve nöbetlerin onaylanmasına izin verir. Bu yöntem ayrıca deneysel zaman dilimi boyunca güç spektrogramlarının ve EEG arka plan desen eğilimlerinin analizine izin verir. Bu hipoksi iskemi modelinde yöntem, yaralanmadan önce EEG kaydının normatif bir taban çizgisi elde etmesine ve yaralanma ve iyileşme sırasında iyileşmesine izin verir. Toplam izleme süresi, yavruların anneden dört saatten uzun süre ayrılamaması ile sınırlıdır. Bu yazıda hipoksik-iskemik nöbetlerin bir modelini kullanmış olsak da, yenidoğan video EEG izleme için bu yöntem kemirgenlerde çeşitli hastalık ve nöbet modellerine uygulanabilir.
Introduction
Hipoksik iskemik ensefalopati (HIE) yılda 1000 yenidoğanda 1,5'ini etkileyen ve yenidoğan nöbetlerinin en sık nedeni olan bir durumdur1,2. Hayatta kalan bebekler serebral palsi, zihinsel engellilik ve epilepsi gibi çeşitli nörolojik engelliler için risk altındadır3,4,5.
Hayvan modelleri hipoksi iskemi ve yenidoğan nöbetlerinin patofizyolojisini anlamada ve araştırmada kritik bir rol oynar6,7. Modifiye vannucci modeli, doğum sonrası 10 (p10)7,8'de hipoksi iskemisini (HI) indük etmek için kullanılır. Bu yaştaki fare yavruları nörolojik olarak kabaca tam insan yenidoğanı terimine çevirir9.
Bu yaralanma modeli ile birlikte kullanılan sürekli video elektroensefalografi (EEG) izleme, yenidoğan hipoksik iskemik nöbetlerin daha iyi anlaşılmasına ve karakterizasyonuna olanak tanır. Önceki çalışmalar kemirgenlerdeki yenidoğan nöbetlerini analiz etmek için video kayıtları, sınırlı EEG kayıtları ve telemetri EEG kayıtları dahil olmak üzere çeşitli yöntemler kullanmıştır10,11,12,13,14,15,16. Aşağıdaki yazıda, hipoksi-iskemi sırasında fare yavrularında sürekli video EEG kaydetme sürecini derinlemesine ele alıyoruz. Yenidoğan fare yavrularında sürekli video EEG izleme için bu teknik çeşitli hastalık ve nöbet modellerine uygulanabilir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Tüm hayvan çalışmaları Virginia Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) tarafından onaylandı.
1. Elektrot bina / kablo binası
- Dişi bir soket konnektörüne bağlı bir elektrot yapmak için tek kutuplu yalıtımlı paslanmaz çelik tel (0,005" çıplak çap, 0,008" kaplamalı) kullanın (dişi kap konnektörü 0,079).
- Hayvanları amplifikatöre bağlamak için özel yapım bir kablo kullanın.
- 4 kanallı bir birliğe erkek 4 pinli konnektör (Erkek konnektör 0,079") takın, operasyonel amplifikatörle (op-amp) eşleşen 4 kanallı birlik kazanç empedansı. 9 V bataryaya bağlanan kablolara 10K direnç takın. Op-amp'ye bağlı olmayan bir topraklama teli pilin orta noktası olarak işlev görür.
- Kablonun bir ucunun (AWG, 0,012" OD) op-amp'ye ve kablonun diğer ucunun amplifikatöre bağlanması.
2. Elektrot implantasyon ameliyatı
- Aşağı doğru bir akış başlığında% 4-5 izofluran ile yavruyu (doğum sonrası gün 9) uyuşturun. İşlemin başlamasından önce, yavrulara bupivacaine enjekte edin (0.02-0.05 mL, % 0.25 deri altı lokal infiltrasyon).
- Hayvan hareketsiz hale geldikten sonra, burun konisi ile stereotaktik bir aşamaya aktarın. Başı sabit tutmak yumuşak olduğu için kulak çubuğunun ters tarafını kullanın. Bu yaşta, yavrular kulak çubuğunun sivri ucını kullanmak için tam olarak gelişmiş bir kulağa sahip değildir.
- Izofluran akışını kısın ve% 2.5-3'te koruyun. Ameliyat prosedürü boyunca yavrunun sabit nefes alışını takip edin. Ağrı yanıtını kontrol etmek için kuyruğu kıstırın ve sonra kesi devam edin.
- Kafatasındaki kesi alanını betadin ve alkolle sterilize edin (3 döngü alternatif iyot ve% 70 etanol). Kesi bölgesinin görülebilecek şekilde çevredeki vücut kısmını örtün.
- Kafa derisini gözlerin biraz üstünden ön-arka açın ve yaklaşık 0,5 cm deriyi geri çek. Fare kafasını stereotaksik sahnede yeniden konumlandırın, böylece cilt açıkta kalan kafatasını dışarı doğru çeker.
- Pamuklu çubuk kullanarak kafatasına hidrojen peroksit uygulayın ve kafatasını neşter bıçağı kullanarak kazıyın. Kafatası çok yumuşaktır; kazıma yaparken dikkatli olun.
- Bir damla (yaklaşık 50 μL) yapıştırıcı uygulayın ve aplikatörünü kullanarak açıkta kalan kafatası bölgesine yayın. Yapıştırıcıyı ayarlamak için 40 sn UV ışığına maruz bırak.
- Referans olarak maruz kalan bregmayı kullanarak koordinatları ölçün. Hipokampus 'un CA1 bölgesinde [-3,5 mm Dorsal-Ventral (DV), ±2 mm Medial-Lateral (ML), -1,75 mm Derin (D)] ve parietal kortekste iki taraflı implant elektrotları [-1,22 mm DV, ±0,5 mm ML, -1 mm D] ve beyincikte bir referans elektrot17. İşaretli bölgede bir delik oluşturmak için 32 G iğne kullanın.
- Kafatasının yüzeyindeki kanı temizleyin. Kadın soket konektörüne stereotaksik kol yardımıyla takılan daha düşük elektrotlar beyne ve diş akrilik ile yerine sabitlenin. Elektrotları beyne yerleştir. Soket konnektör kulaklığı, diş akrilik ile birbirine yapışmış kafatasının üzerine oturur.
- Elektrot sabitlendikten sonra interskapular bölgeye ketoprofen (5 mg / kg) deri altından enjekte edin. Yavruları annenin arkasına koy.
NOT: Çöplerin yarısını teker teker tanıtmak yerine anneye aynı anda kulaklıkla tanıtın. Bu, annenin yavrunun kulaklığını zarar vermesini önleyecektir.
3. EEG kurulumu ve kaydı (temel/yaralanma öncesi)
- Elektrot implantasyonundan sonra 24 saat iyileşmeden sonra, her hayvanı EEG kaydı için ısıtılmış (37 °C) özel yapım pleksiglas bir odaya yerleştirin. Bu oda aynı zamanda bir hipoksi odası olarak da hizmet verecektir.
- Odadaki yavruları esnek bir kablo (özel yapım op-amp kablosu) ile bir video-EEG izleme sistemine bağlayın.
NOT: Kulaklık yerindeyken, fareler serbestçe hareket halindedir ve davranışlarda herhangi bir fark sergilemez. Elektrot tellerine bağlandıktan sonra, yavrunun oda boyunca serbestçe hareket edebilmesi için doğru miktarda gevşeklik sağlamak için teller oda bağı içinde ayarlanmalıdır. - EEG verilerini 1000 Hz'de bir çim amplifikatörü kullanarak 1K kazançla dijitalleştirin. Daha sonra yazılımı (örneğin LabChart Pro) kullanarak EEG sinyalini (3-70 Hz arasında bant geçiş filtresi) gözden geçirin.
- Şahdamar ligasyon prosedürü için hayvanların bağlantısını kesmeden önce 30 dakika boyunca yaralanma öncesi temel EEG kaydedin.
4. Sol şahdamar ligasyonu
- Yavruyu (doğum sonrası gün 10) aşağı doğru bir akış başlığında% 4-5 izofluran ile uyuşturun ve bir su banyosu pedinde özel olarak düzenlenmiş kuruluma yerleştirin. Hayvan supine yerleştirin ve ön ayakları kağıt bantla sabitleyin.
- Izofluran akışını% 2-3'e düşürün. Ağrı tepkisi için kuyruğu kıstırın ve işlem boyunca nefes almayı izleyin.
- Boynun sol tarafındaki kesi alanını (mandibula ve köprücük kemiği arasında) betadin ve alkol (3 döngü alternatif iyot ve% 70 etanol) ile sterilize edin.
- Mikros makas kullanarak boynun sol tarafında yaklaşık 1 cm uzunluğunda bir kesi yapın. Bir diseksiyon mikroskobu kullanarak, şahdamarını açığa çıkarmak için deri altı dokusunu ve cildi dikkatlice geri çekin. Vagus sinirini (artere yanal çalışan) tanımlamaya ve hassas bir şekilde ayırmaya ve arterden geri çekmeye özen edin.
- Mikroforceps kullanarak arterin altına 5 cm uzunluğunda steril ipek dikiş iplik. Tıkanmış akışa arterin etrafına çift düğümlü bir dikiş bağlayın.
- Fazla dikişi kesin ve deri altı dokusunu ve cildini geri çekerek maruz kalan arteri kapatın. Kesiği kapatmak için veteriner bağını kullanın.
- Hayvanı, ısınan bir şilteye yerleştirilen oda sıcaklığında bir odaya sürekli EEG izlemeye geri yerleştirin. Hazneyi açmamak için yavru çekirdek sıcaklığının nokta kızılötesi sıcaklık kontrollerini alın. Hayvanın hipoksiden önce 1 saat boyunca iyileşmesine izin verin.
5. EEG ve hipoksi
- FiO2'i (ilham alan oksijenin fraksiyonu) bir oksijen monitörü aracılığıyla oda içinde sürekli olarak izleyin.
- Hazneyi % 100 N2 için 60 L / dk N2 ve% 100 O2 için 0.415 L / dk ile yıkayın. Haznedeki oksijen doygunluğu %12'ye ulaştığında, O2 akışını değiştirmeden tutarken N2 akışını 10 L/dk'ya düşürin. Küçük ayarlamalarla FiO2'yi 45 dakika boyunca %8'de koruyun.
- 45 dakikalık hipoksi maruziyetinin ardından FiO2'yi %21'e döndürün.
- Yavruların odada iyileşmesini ve hipoksi sonrası 2 saat boyunca EEG'de izlenmesini sağla.
- Kayıt süresi tamamlandıktan sonra, fareleri EEG kaydından çıkarın ve anneye geri dönün.
6. EEG analizi
- EEG dosyasını LabChart Pro'da video ile analiz edin. Kör bir araştırmacının EEG'yi nöbetler ve arka plan desenleri için işaretlemesini söyle17. Nöbetler, net evrim ile yüksek frekanslı ritmik keskin dalga deşarjları (≥3x taban çizgisi) ile 10 saniyeden fazla süren elekrografik bir olay olarak tanımlanır17.
- İkinci bir kör araştırmacı incelemesinin anlaşma için rastgele işaretlenmiş olayları geçirmesini haline geçirin.
- İşaretli her elektrografik olay için ilişkili videoyu gözden geçirin ve yenidoğan kemirgen davranışsal nöbet skoruna göre analiz edin16. Kısaca, bu puan 0-6 arasında değişmektedir (hareketsizlik şiddetli tonik-klonik davranış). Nöbet semiyolojisini daha da karakterize etmek için, yanallık için davranışı analiz edin (multifokal/bilateral hareketler ve odak/tek taraflı vs. karışık).
- Bir güç spektrogramı oluşturun. 1024 veri noktası boyutuna sahip Cosine-Bell veri penceresine sahip hızlı fourier dönüşümü kullanın. %87,5'lik bir pencere çakışması yardımıyla spektrogramda düzgün bir x ekseni oluşturun. Gücü μV218 olarak ifade edin.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Nöbet semiyolojisi
Yenidoğan hipoksi-iskemi maruziyeti farelerde hem genelleştirilmiş hem de odak nöbetleriyle sonuçlanır (Şekil 1A-C). Video EEG kayıtları, elekrografik bulguların videodaki davranışla ilişkilendirilmesini sağlar. Bu davranışlar daha önce yayınlanan yenidoğan kemirgen davranışsal nöbet skoru (BSS)16 kullanılarak puanlanmıştır. BSS'ye ek olarak, olayları odak/tek taraflı, ikili veya karışık olup olmadığına göre kategorize ettik (Şekil 1B).
Bu modelde, fareler genellikle 3 nöbet semiyolojisi modeli sergiler: 1) kontralasyon ekstremitelerinin uzatılması ile ligasyonun tarafına tekrarlayan daire, 2) vücut bükülmesi ve ligasyonun yanına kıvrılmış kuyruk ile duruş kaybı veya 3) ekstremitelerin tek taraflı veya bilateral kürekle kesilmesi (değişen şiddet ve uzunluk). Gözlemlenen olayların çoğunluğu odak/tek taraflı veya karışık davranışları içeriyordu (Şekil 1B). Ek olarak, hipoksik dönemde, farelerin bir alt kümesi, yavrunun EEG'de sürekli nöbet aktivitesi ile hareketsiz olduğu kasılma dışı nöbet aktivitesi sergiledi (Şekil 1C).
Elekrografik kayıtlar
EEG kaydı, yaralanma öncesi taban çizgisi elde etmek için şahdamar ligasyonuna 30 dakika kala başlatılmıştı. Temel aktivite (Şekil 1A ve Şekil 2A), p10 fare yavruları17'de daha önce açıklanan arka plana benzerdi. Ligasyonun ardından, yavrular hemen video EEG'ye geri yerleştirildi. Ligasyon ve hipoksinin başlaması arasındaki dönemde, farelerin bir alt kümesi konvülsif nöbetler sergiler (Şekil 1A-C).
Hipoksi indüksiyonu sonrasında, EEG'deki arka plan genliği azaltıldı (Şekil 3B) ve aralıklı olarak sivri dalga akıntısı patlamaları ve ardından bastırma (Şekil 2A). Fareler, ritmik spike-dalga deşarjları olarak bastırılmış bir arka plandan ortaya çıkan ve polispike dalgaları ile daha karmaşık ve sık hale gelmek için ilerleyen elekrografik nöbetler sergiler (Şekil 2B). Hipoksi sırasında, güç spektrogram analizi iskemik ve kontrallateral yarımküre arasındaki asimetriler için dikkat çekiciydi (Şekil 3A,B). İskemik yarımkürede patlama bastırma patrişi, kontrallateral yarımkürede ise bastırılmış arka plan sergilenmiştir (Şekil 1A ve Şekil 3A,B). Ortalama nöbetler hipoksi indüksiyondan 5±5±8.1 dakika sonra başlar ve her olay 56.57 saniye sürer. Hipoksi (n=4/30) sırasında %13 mortalite oranı vardı ve tüm ölümler konvülsif (BSS=5-6) nöbet sonrası gerçekleşti.
Reoksijenasyon ve iyileşme sırasında, farelerin bir alt kümesi kayıt süresinin geri kalanında nöbet geçirmeye devam eder (hipoksi sonrası 2 saat). EEG arka planı hipoksi sonrası kayıt döneminde kademeli iyileşme ile hipoksiyi takiben taban çizgisine göre baskılandı (Şekil 1A ve Şekil 3). Tüm kayıt süresi boyunca, fareler ortalama 9±5 nöbet olayı sergiledi ve her biri 54±57.7 sn sürdü.
Şekil 1: Yenidoğan hipoksi-iskemiye maruz kalan p10 farelerde nöbet özellikleri. (A) Deneysel zaman çizelgesi aracılığıyla iskemik parietal korteks elektrodundan temsili güç spektrogramı. (Genlik renk ısı haritası ölçeği x10–6). Oklar, spektrogramın altındaki ham elektroensefalogram izlemelerinin temsil ettiği zamanı gösterir. (B) Tüm deney için nöbet davranışları, hipoksi sırasında postischemia/prehipoksi ve posthipoksi. (C) Davranışsal nöbet skoru (BSS) ve tüm nöbet olayları için zamanlama (n = 30 fare, her farenin benzersiz bir sembolü vardır, her nokta ayrı bir nöbet olayıdır). Hipoksi sırasında ele geçirilen farelerin % 100'ü (mavi kutu; zaman = −60 dakika karotid ligasyonun tamamlanmasıdır, time=0 hipoksinin başlangıcıdır). Konvülsif nöbet (grade 5-6) sonrasında hipoksi sırasında yüzde 13'ü öldü. Bu rakam Burnsed ve ark. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 2: Hipoksi iskemi sırasında karakteristik elektroensefalografi (EEG) paternleri. (A) Soldan sağa EEG arka planı: yaralanma öncesi taban çizgisi, hipoksi sırasında patlama bastırma, posthipoksi baskılama. Ipsilateral parietal korteks derinliği elektrodundan kayıt. (B) Hipoksi sırasında nöbet gelişimi. Ipsilateral hipokampal derinlik elektrodundan kayıt. Gölgeli kutular (I-V), (B) sağındaki genişletilmiş EEG alıntılarına karşılık gelir. Bu rakam Burnsed ve ark. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 3: EEG arka planında iskemik ve kontrallateral yarımküreler arasındaki asimetriler. (A) Hipoksi sırasında HI farelerde asimetrik güç spektrogramı (45 dakikalık periyot) iskemik korteks (solda) ve kontrallateral kortekste (sağ; genlik ölçeği x10–6). İskemik yarımkürede patlama bastırma patr ve nöbetleri, CL yarımkürede baskılama. (B) IL ve CL yarımkürelerde hipoksi ve reoksijenasyon sırasında arka plan baskılanması. Deneysel zaman dilimi boyunca ensefalogramın 10 saniyelik rastgele alıntılarından alınan tüm ortalama gerilim ölçümleri (taban çizgisi, 30 dakika postligasyon, hipoksi sırasında- başlangıçtan 15 dakika ve 30 dakika sonra, reoksijenasyondan sonra -başlangıçtan 15 dakika ve 60 dakika sonra) taban çizgisiyle karşılaştırıldı. Her hayvanın taban çizgisi kendi kontrolü olarak hizmet etti ve veriler taban çizgisinin yüzdesi olarak rapor edildi (n = 5 fare). Kortikal elektrotlardan ölçümler alındı. Bu rakam Burnsed ve ark. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Hipoksik-iskemik nöbetler sırasında yenidoğan farelerde sürekli video-EEG izleme için bir model sunduk. EEG ile birlikte video analizi, nöbet semiyolojisinin karakterizasyonuna izin verir. EEG analizi, güç spektrogramlarının çıkarılmasına ve arka plan genlik analizine izin verir.
Elektrotların doğru ve dikkatli yerleştirilmesi bu protokolde çok önemlidir, çünkü elektrot yerleştirme veya yanlış yerleştirme sırasında yaralanma sonuçları önemli ölçüde etkileyebilir. Yaralanmadan önce normal temel EEG aktivitesinin değerlendirilmesi çok önemlidir, çünkü elektrot yerleşimi sırasında kanama veya yaralanma, nadir olsa da gerçekleşebilir. İkincisi, doğru elektrot yerleşimini doğrulamak için beyinler bölümlere ayrılatılabilir ve uygun yerleşimde elektrot izleri için incelenebilir. Ek olarak, yavruların gruplar halinde (ayrı ayrı) anneye iade edilmemesi, elektrot kulaklıkların hasar görmesine veya yavruların anne tarafından öldürülmesine veya ihmal edilmesine neden olabilir.
Bu yöntemin bir sınırlaması, küçük bir yenidoğan beyninde derinlik elektrot kayıtlarının mekansal lokalizasyonunun sınırıdır. Bu, EEG kayıtlarında belirli ele geçirme odaklarını yerelleştirme yeteneğini kısıtlar. Bu hipoksi iskemi modelinde bir diğer sınırlama nöbet yükündeki değişkenliktir. Hipoksi iskemisinin bu kemirgen modelinde lezyon boyutunda değişkenlik ve davranışsal eksiklikler daha önce 7,8,19 olarak iyi tanımlanmıştır. Şaşırtıcı olmayan bir şekilde, bu değişkenlik nöbet yükünde (hem nöbet olaylarının uzunluğu hem de nöbet olaylarının sayısı) mevcuttur. Bununla birlikte, sürekli olarak, bu modeldeki yavruların% 100'ü hipoksi sırasında nöbetler göstermektedir. Son olarak, yavruların EEG izlemesinde (anneden uzakta) olabileceği süre sınırlıdır. Bu nedenle, devam eden nöbetleri yaralanmaya göre daha sonraki zaman noktalarında sürekli EEG ile karakterize edemiyoruz.
Bu yazıda hipoksi-iskemi nöbet modeli kullanmış olsak da yenidoğan fare yavrularında sürekli video-EEG izleme için bu yöntem diğer hastalık/nöbet modellerine de kolayca uygulanabilir. Yenidoğan kemirgenlerindeki nöbetlerin sadece davranışa dayanarak tanınması zordur, bu da video-EEG izlemesini önemli hale getirir. Gelecekteki araştırmalar, diğer yenidoğan nöbet modellerinde nöbet yükünü ve semiyolojiyi analiz etmek veya terapötiklere ve nöroprotektif önlemlere yanıt vermek için bu teknikleri kullanabilir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Hiç kimse.
Acknowledgments
Aşağıdaki finansman kaynaklarını kabul ediyoruz: NIH NINDS – K08NS101122 (JB), R01NS040337 (JK), R01NS044370 (JK), Virginia Üniversitesi Tıp Fakültesi (JB).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| SURGERY | |||
| Ball Point Applicator | Metrex Research | 8300-F | i-bond applicator |
| Cranioplast (Powder/Resin) | Coltene | H00383 | Perm Reline/Power |
| I-Bond | Kulzer GmbH, Germany | ||
| LOOK Silk Suture | Surgical Specialities Corporation | SP115 | LOOK SP115 Black Braided Silk Non absorbable surgical suture |
| RS-5168 Botvin Forceps | Roboz Surgical Instrument | RS5168 | Forcep for surgery/ligation |
| RS-5138 Graefe Forceps | Roboz Surgical Instrument | RS5138 | Forcep for surgery/ligation |
| UV light for I-Bond | Blast Lite By First Media | BL778 | UV ligth for I-bond |
| Vannas Microdissecting Scissor | Roboz Surgical Instrument | RS5618 | Scissor for ligation |
| Vet Bond | 3M Vetbond | 1469SB | Vet Glue |
| HYPOXIA | |||
| Hypoxidial | Starr Life Science | ||
| Oxygen sensor | Medical Products | MiniOxI- oxygen analyzer/sensor for hypoxia rig | |
| EEG RECORDING | |||
| Female receptacle connector 0.079" | Mill-Max Manufacturing Corp | 832-10-024-10-001000 | Ordered from Digikey |
| Grass Amplifier | Natus Neurology Incorporated | Grass Product | |
| LabChart Pro | ADI Instruments | Software to run the system | |
| Male Socket Connector 0.079" | Mill-Max Manufacturing Corp | 833-43-024-20-001000 | Ordered from Digikey |
| Operational Amplifier | Texas Instruments, Dallas, TX, USA | TLC2274CD | TLC2274 Quad Low-Noise Rail-to Rail Operational Amplifier |
| Operational Amplifier | Texas Instruments, Dallas, TX, USA | TLC2272ACDR | TLC2274 Quad Low-Noise Rail-to Rail Operational Amplifier |
| Stainless Steel wire | A-M Systems | 791400 | 0.005" Bare/0.008" Coated 100 ft |
| Ultra-Flexible Wire | McMaster-Carr | 9564T1 | 36 Gauze wire of various color |
References
- Vasudevan, C., Levene, M. Epidemiology and aetiology of neonatal seizures. Seminars in Fetal & Neonatal Medicine. , (2013).
- Volpe, J., et al.
- Shankaran, S., et al. Network EKSNNR. Childhood outcomes after hypothermia for neonatal encephalopathy. New England Journal of Medicine. 366 (22), 2085-2092 (2012).
- Pappas, A., et al. Cognitive outcomes after neonatal encephalopathy. Pediatrics. 135 (3), 624-634 (2015).
- van Schie, P. E., et al. Long-term motor and behavioral outcome after perinatal hypoxic-ischemic encephalopathy. European Journal of Paediatric Neurology. 19 (3), 354-359 (2015).
- Rensing, N., et al. Longitudinal analysis of developmental changes in electroencephalography patterns and sleep-wake states of the neonatal mouse. PLoS One. 13 (11), 1-17 (2018).
- Rice, J. E., Vannucci, R. C., Brierley, J. B. The influence of immaturity on hypoxic-ischemic brain damage in the rat. Annals of Neurology. 9 (2), 131-141 (1981).
- Burnsed, J. C., et al. Hypoxia-ischemia and therapeutic hypothermia in the neonatal mouse brain--a longitudinal study. PLoS One. 10 (3), 0118889 (2015).
- Semple, B. D., et al. Brain development in rodents and humans: Identifying benchmarks of maturation and vulnerability to injury across species. Progress in Neurobiology. , 1-16 (2013).
- Comi, A. M., et al. Gabapentin neuroprotection and seizure suppression in immature mouse brain ischemia. Pediatric Research. 64 (1), 81-85 (2008).
- Comi, A. M., et al. A new model of stroke and ischemic seizures in the immature mouse. Pediatric Neurology. 31 (4), 254-257 (2004).
- Kadam, S. D., White, A. M., Staley, K. J., Dudek, F. E. Continuous Electroencephalographic Monitoring with Radio-Telemetry in a Rat Model of Perinatal Hypoxia-Ischemia Reveals Progressive Post-Stroke Epilepsy. Journal of Neuroscience. 30 (1), 404-415 (2010).
- Burnsed, J., et al. Neuronal Circuit Activity during Neonatal Hypoxic - Ischemic Seizures in Mice. Annals of Neurology. 86, 927-938 (2019).
- Sampath, D., White, A. M., Raol, Y. H. Characterization of neonatal seizures in an animal model of hypoxic-ischemic encephalopathy. Epilepsia. 55 (7), 985-993 (2014).
- Sampath, D., Valdez, R., White, A. M., Raol, Y. H. Anticonvulsant effect of flupirtine in an animal model of neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy. Neuropharmacology. 123, 126-135 (2017).
- Kang, S. K., et al. and sex-dependent susceptibility to phenobarbital-resistant neonatal seizures: role of chloride co-transporters. Frontiers in Cellular Neuroscience. 9, 1-16 (2015).
- Zanelli, S., Goodkin, H. P., Kowalski, S., Kapur, J. Impact of transient acute hypoxia on the developing mouse EEG. Neurobiology of Disease. 68, 37-46 (2014).
- Lewczuk, E., et al. EEG and behavior patterns during experimental status epilepticus. Epilepsia. 59 (2), 369-380 (2017).
- Wu, D., Martin, L. J., Northington, F. J., Zhang, J. Oscillating gradient diffusion MRI reveals unique microstructural information in normal and hypoxia-ischemia injured mouse brains. Magnetic Resonance in Medicine. 72 (5), 1366-1374 (2014).
