Summary

Neurocircuit Assays में मिरगी म्यूटेंट की बरामदगी के लिए ड्रोसोफिला</em

Published: April 15, 2009
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Summary

उच्च आवृत्ति जब्ती की तरह बिजली की उत्तेजना गतिविधि, का उपयोग में प्रेरित किया जा सकता है<em> ड्रोसोफिला</em>. इस गतिविधि को आसानी से विशाल फाइबर सिस्टम से दर्ज की गई है.

Abstract

ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर गतिविधि की तरह जब्ती के अध्ययन के लिए एक उपयोगी उपकरण है. म्यूटेंट की एक किस्म है जिसमें बरामदगी या तो शारीरिक आघात या बिजली की उत्तेजना के माध्यम से प्रेरित किया जा सकता है जब्ती गतिविधि और व्यवहार के विभिन्न पहलुओं के अध्ययन के लिए उपलब्ध है. जंगली प्रकार सहित सभी मक्खियों, जब्ती तरह गतिविधि से गुजरना अगर एक पर्याप्त उच्च वोल्टेज में उत्तेजित जाएगा. जब्ती गतिविधि की तरह एक प्रतिक्रिया सभी या कुछ भी नहीं है और प्रत्येक जीनोटाइप एक विशिष्ट जब्ती दहलीज है. मक्खी के एक विशिष्ट जीनोटाइप की जब्ती दहलीज या आनुवंशिक दमन या बढ़ाने के द्वारा एक दवा के साथ इलाज के द्वारा या तो बदल सकते हैं. दहलीज इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी द्वारा आसानी से मापा जाता है. जब्ती गतिविधि की तरह उच्च आवृत्ति बिजली के मस्तिष्क को सीधे दिया और छाती में पृष्ठीय अनुदैर्ध्य मांसपेशियों (DLMs) के माध्यम से दर्ज उत्तेजना के माध्यम से प्रेरित किया जा सकता है. DLMs विशाल फाइबर प्रणाली के भाग के द्वारा innervated कर रहे हैं. कम वोल्टेज, उच्च आवृत्ति उत्तेजना के साथ शुरू, और बाद में छोटे वेतन वृद्धि में वोल्टेज बढ़ाने, एक एकल मक्खी के लिए जब्ती दहलीज मापा जा सकता है.

Protocol

नमूना तैयार करना: प्रयोग से पहले रात, वांछित जीनोटाइप के पुरुष मक्खियों anesthetized और एक नरम नायलॉन प्लग के साथ एक शीशी में रखा जाता है. एक कपास की गेंद भी काम करेगा. Anesthetization के बाद, जब्ती दहलीज बदल दिया …

Discussion

यह वीडियो एक व्यक्ति ड्रोसोफिला मक्खी की जब्ती दहलीज को निर्धारित करने में बुनियादी कदम का प्रदर्शन किया है. डिजिटल आस्टसीलस्कप का उपयोग करने के बजाय, एक कम्प्यूटरीकृत digitizer भी इस्तेमाल किया जा सकत?…

Acknowledgements

यह काम एक NIH अनुसंधान अनुदान, एक मिरगी फाउंडेशन अनुदान और एक McKnight फाउंडेशन अनुदान ड्रोसोफिला फल मक्खियों पर मीट्रिक टन प्रयोगों के लिए UC बर्कले पशु उपयोग समिति द्वारा निर्धारित दिशा निर्देशों और नियमों के अनुसार प्रदर्शन किया गया द्वारा समर्थित किया गया.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Digital oscilloscope   Hitachi VC-6523  
Stimulator   Cornerstone S-900  
Preamplifier   World Precision Instruments Electro 705  
Micromanipulators   Narishige various  

References

  1. Kuebler, D., Tanouye, M. A. Modifications of seizure susceptibility in Drosophila. J Neurophysiol. 83, 998-1009 (2000).
  2. Kuebler, D., Zhang, H., Ren, X., Tanouye, M. A. Genetic suppression of seizure susceptibility in Drosophila. J Neurophysiol. 86, 1211-1225 (2001).
  3. Song, J., Tanouye, M. A. Seizure suppression by shakB2, a gap junction mutation in Drosophila. J Neurophysiol. 95, 627-635 (2006).
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Cite This Article
Howlett, I. C., Tanouye, M. A. Neurocircuit Assays for Seizures in Epilepsy Mutants of Drosophila. J. Vis. Exp. (26), e1121, doi:10.3791/1121 (2009).

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