Summary

의 간질 발작의 돌연변이에 대한 Neurocircuit의 Assays Drosophila</em

Published: April 15, 2009
doi:

Summary

고주파 전기 자극 압수와 같은 활동을 사용하는 것은에서 유도된 수 있습니다<em> Drosophila</em>. 이 활동은 쉽게 거대한 섬유 시스템에서 기록됩니다.

Abstract

Drosophila melanogaster은 활동과 같은 발작을 공부를위한 유용한 도구입니다. 발작이 물리적 충격이나 전기 자극을 통해 유도하거나 수있는 돌연변이의 다양한 발작 활동과 행동의 다양한 측면의 연구에 사용할 수 있습니다. 있을만큼 충분히 높은 전압에서 자극하면 야생 형을 포함한 모든 비행은, 압수와 같은 활동을 받아야합니다. 활동과 같은 발작 모든 – 또는 – 아무것도 응답하고 각각의 유전자형은 특정 발작 한계가 있습니다. 비행의 특정 유전자형의 발작 임계값은 약물 치료 또는 유전자 억제 또는 개선을 통해 변경할 수 있습니다. 임계값은 쉽게 전기 생리학에 의해 측정됩니다. 활동 같은 발작은 뇌에 직접 전달 및 흉부에있는 등 지느러미 근육 길이 (DLMs)를 통해 기록된 고주파 전기 자극을 통해 유도하실 수 있습니다. DLMs은 거대한 섬유 시스템의 일부에 의해 innervated 있습니다. 저전압, 고주파 자극과 함께 시작하고, 이후 작은 단위로 전압을 높여, 하나의 비행에 대한 발작 임계값을 측정할 수 있습니다.

Protocol

표본 준비 : 실험이 있기 전날 밤에, 원하는 유전자형의 남성 파리 anesthetized과 부드러운 나일론 플러그와 유리병에 넣습니다. 커튼 볼도 작동합니다. anesthetization 다음, 발작 임계값이 변경되어 밤 이상적이다하지만 이상, 파리가 가장 최소한 6 시간 동안 남아 있습니다 있도록. 실험 당일, 파리 한쪽에 치과 왁스의 레이어와 유리 슬라이드에 한 번에 하나?…

Discussion

이 비디오는 개별 Drosophila의 비행의 발작 임계값을 결정하는 기본 단계를 보여주었다. 대신 디지털 오실로 스코프를 사용, 컴퓨터 디지타이저도 사용할 수 있습니다. 이 기술은 파리의 발작 직전에 약물이나 유전자 변경의 효과를 결정하는 데 유용합니다.

Acknowledgements

이 작품은 NIH 연구 부여, 간질 재단 교부금 및 맥나이트 재단 교부금 Drosophila 과일 파리에서 MT 실험에 UC 버클리 동물 사용위원회 명시된 지침과 규정에 따라 수행되었다 지원했다.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Digital oscilloscope   Hitachi VC-6523  
Stimulator   Cornerstone S-900  
Preamplifier   World Precision Instruments Electro 705  
Micromanipulators   Narishige various  

References

  1. Kuebler, D., Tanouye, M. A. Modifications of seizure susceptibility in Drosophila. J Neurophysiol. 83, 998-1009 (2000).
  2. Kuebler, D., Zhang, H., Ren, X., Tanouye, M. A. Genetic suppression of seizure susceptibility in Drosophila. J Neurophysiol. 86, 1211-1225 (2001).
  3. Song, J., Tanouye, M. A. Seizure suppression by shakB2, a gap junction mutation in Drosophila. J Neurophysiol. 95, 627-635 (2006).
check_url/kr/1121?article_type=t

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Cite This Article
Howlett, I. C., Tanouye, M. A. Neurocircuit Assays for Seizures in Epilepsy Mutants of Drosophila. J. Vis. Exp. (26), e1121, doi:10.3791/1121 (2009).

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