Neurocircuit Assays für Anfällen bei Epilepsie Mutanten Drosophila</em
Summary
Mit hochfrequenten elektrischen Stimulation, Beschlagnahme-ähnliche Aktivität kann in induziert werden<em> Drosophila</em>. Diese Aktivität ist leicht von der riesigen Faser-System aufgezeichnet.
Abstract
Drosophila melanogaster ist ein nützliches Werkzeug zur Untersuchung der Beschlagnahme ähnliche Aktivität. Eine Vielzahl von Mutanten, bei denen Anfälle entweder durch Erschütterungen oder elektrische Stimulation induziert werden kann, ist verfügbar für das Studium der verschiedenen Aspekte der Beschlagnahme Aktivität und Verhalten. Alle Fliegen, einschließlich Wild-Typ wird zu unterziehen Beschlagnahme-ähnliche Aktivität, wenn bei einer ausreichend hohen Spannung angeregt. Beschlagnahme ähnliche Aktivität ist eine Alles-oder-Nichts-Reaktion und jeden Genotyp hat eine spezifische Krampfschwelle. Die Beschlagnahme Schwelle zu einem bestimmten Genotyp fliegen kann entweder durch Behandlung mit einem Medikament oder durch genetische Verdrängung oder Verbesserung verändert werden. Die Schwelle ist leicht von der Elektrophysiologie gemessen. Beschlagnahme-ähnliche Aktivität kann über hochfrequente elektrische Stimulation direkt an das Gehirn geliefert und erfasst durch die dorsale Längsmuskeln (DLMS) in den Thorax induziert werden. Die DLMS sind Teil der riesigen Faser-System innerviert. Beginnend mit niedriger Spannung, Hochfrequenz-Stimulation, und anschließend Erhöhung der Spannung in kleinen Schritten kann die Krampfschwelle für eine Fliege gemessen werden.
Protocol
Discussion
Dieses Video wurde die grundlegenden Schritte bei der Bestimmung der Krampfschwelle einer einzelnen Fliege Drosophila demonstriert. Anstelle der Verwendung der digitalen Oszilloskop kann ein EDV-Digitizer verwendet werden. Diese Technik ist nützlich für die Bestimmung der Wirkung eines Arzneimittels oder genetische Veränderung auf die Krampfschwelle einer Fliege.
Acknowledgements
Diese Arbeit wurde durch ein NIH Forschungsstipendium, eine Epilepsie-Stiftung zu gewähren und eine McKnight Foundation gewähren MT Experimente an Drosophila Fruchtfliege wurden in Übereinstimmung mit den Richtlinien und Vorschriften her von der UC Berkeley Tierversuchen eingesetzten Ausschusses durchgeführt unterstützt.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Digital oscilloscope | Hitachi | VC-6523 | ||
| Stimulator | Cornerstone | S-900 | ||
| Preamplifier | World Precision Instruments | Electro 705 | ||
| Micromanipulators | Narishige | various |
References
- Kuebler, D., Tanouye, M. A. Modifications of seizure susceptibility in Drosophila. J Neurophysiol. 83, 998-1009 (2000).
- Kuebler, D., Zhang, H., Ren, X., Tanouye, M. A. Genetic suppression of seizure susceptibility in Drosophila. J Neurophysiol. 86, 1211-1225 (2001).
- Song, J., Tanouye, M. A. Seizure suppression by shakB2, a gap junction mutation in Drosophila. J Neurophysiol. 95, 627-635 (2006).
