Utilizzando la stimolazione elettrica ad alta frequenza, il sequestro-simile può essere indotta a<em> Drosophila</em>. Questa attività è facilmente registrato dal sistema di fibra gigante.
Abstract
Drosophila melanogaster è un utile strumento per studiare come il sequestro di attività. Una varietà di mutanti in cui crisi epilettiche possono essere indotte attraverso uno shock fisico o stimolazione elettrica è disponibile per lo studio di vari aspetti della crisi e del comportamento. Tutte le mosche, compreso wild-type, saranno sottoposti a sequestro un'attività simile, se stimolato con una tensione abbastanza alta. Sequestro come attività è una risposta tutto-o-niente e ogni genotipo ha una determinata soglia convulsiva. La soglia di sequestro di un genotipo specifico di volo può essere alterata mediante trattamento con un farmaco o dalla soppressione o il miglioramento genetico. La soglia può essere facilmente misurato con elettrofisiologia. Sequestro un'attività simile può essere indotta attraverso la stimolazione ad alta frequenza elettrica erogata direttamente al cervello e registrato attraverso i muscoli dorsali longitudinali (DLMS) nel torace. Il DLMS sono innervati dal parte del sistema di fibra gigante. A partire da bassa tensione, la stimolazione ad alta frequenza, e di conseguenza aumentare la tensione con piccoli incrementi, la soglia convulsiva per una sola mosca può essere misurata.
Protocol
Preparazione del campione: La notte prima dell'esperimento, le mosche maschio del genotipo desiderati sono anestetizzati e collocato in una fiala con un tappo in nylon morbido. Un batuffolo di cotone potrebbe anche funzionare. A seguito di anestesia, la soglia convulsiva è alterata, per cui le mosche è meglio lasciarle per almeno 6 ore, anche se durante la notte è l'ideale. Il giorno dell'esperimento, le mosche sono montati uno alla volta alle diapos…
Discussion
Questo video ha dimostrato i passaggi fondamentali nel determinare la soglia di sequestro di una mosca drosofila individuale. Invece di usare l'oscilloscopio digitale, un digitalizzatore computerizzato può anche essere usato. Questa tecnica è utile per determinare gli effetti di un farmaco o di alterazione genetica sulla soglia sequestro di una mosca.
Acknowledgements
Questo lavoro è stato supportato da una ricerca NIH sovvenzione, una sovvenzione della Fondazione Epilessia McKnight e una sovvenzione della Fondazione per Esperimenti MT su moscerini della frutta Drosophila sono stati eseguiti secondo le linee guida e regolamenti stabiliti dal Comitato di Animal Usa UC Berkeley.