Summary

랫 중심에 엔지니어링된 조직의 주입

Published: June 24, 2009
doi:

Summary

여기, 우리는 방실 (AV) – 홈 성인 루이스 쥐에서 설계 조직을 이식하는 심장 수술을 설명합니다.

Abstract

설치류 수술은 종종 엔지니어링 조직의 유틸리티를 평가하는 중요한 구성 요소입니다. 수술 절차의 다양한는 일반적인 실험실 쥐 또는 마우스로 진행 이러한 꽤 자주 벤치 – 상단 실험 및 대형 동물 실험이나 인체에 실험 사이의 중간 단계 역할을 수 있습니다. 설치류는 비계의 재료와 세포의 새로운 조합을 테스트에 설립, 비용 효율적인, 그리고 생리학 – 관련 모델 시스템을 제공 감안할 때, 그들은 심장 혈관 조직 공학 연구에 적합 특히있다. 현재, 우리는 방실에 myogenic 전구 세포를 포함하는 설계 조직 (AV) 쥐 심장의 홈을 이식하는 심장 절개 수술을 설명합니다. 이 이식은 전체 심장 블록 [1]과 소아 환자에서 기존의 맥박 조정기 주입에 대한 대안 치료를 제공하는 궁극적인 목표로 오른쪽 아트리움과 우심실 사이의 전선관을 만들 것입니다. 설계 조직은 thoracotomy를 통해 AV – 홈에 이식합니다. 우리 목적을 위해서도, 루이스 쥐가 anesthetized 및 invasively 멸균 수술 도중에 긍정적인기도 압력을 유지하기 위해 통풍이 있습니다. 심장에 접근은 5 안테 – 가로 절개를 통해 권리 thoracotomy에 의해 수행됩니다<sup> 일</sup> 늑간 공간. 조직 구조는 하나의 7-0 Prolene의 봉합사를 사용하여 AV 홈에 고정하고 마음의 복부 부분에서 우심실과 아트리움 사이에 위치합니다. epicardium는 부분적으로받는 심근 세포 및 엔지니어링 조직에 포함된 사람 간의 직접 접촉을 허용하는 제거됩니다. 이식 다음, 가슴 벽이 레이어에 폐쇄 모든 pneumothorax은 대피하고, 동물은 extubated와 진통제로 치료합니다.

Protocol

1 부 : 전신 마취의 유도 200-250g 루이스 쥐 50 MG / kg 케타민을 및 intraperitoneal 캐비티에 30 G 바늘로 주입 4 MG / kg Xylazine과 anesthetized 있습니다. 상단 복부 오른쪽 가슴은 머리를 철저하게 70 %의 에탄올 다음 povidone – 요오드 국소 살균 솔루션 청소 절개 사이트를 제거 꺾을 수 있습니다. 동물은 endotracheally 작은 동물 인공 호흡기 (하버드 장치)에 연결된 16 G 정맥 카테터를 사용하여 intubated…

Discussion

수술에 유리한 결과가 들면, 그것은 제대로 intubate 및 invasively 동물을 환기하는 것이 중요합니다. 쥐가 단순히 진정하고 저절로 숨을 쉴 수있다면 흉부가 설치류의 일반적인 늑막에 의한 개설하는 동안, 모두 폐 필연적으로 붕괴됩니다. 가슴을 닫기 전에 모든 pneumothorax 완전히 제거되어야하며 폐가 완전히 무기폐을 줄이기 위해 확장. 그렇지 않으면, 인공 호흡기 및 복구에서 이유하는 것은 실패?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

그리고 어린이 병원 보스턴에서 심장 전도 기금에 기부,이 작품은 연구 국립 보건원에서 보조금 (HL088206 HL068915)에 의해 지원됩니다.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
7×4 Thermo Pad 4/box Equipment Hood Thermo-Pad, Summerland, BC Canada MODEL 704R  
Inspira ASV Ventilator Equipment Harvard Apparatus, Holliston, MA 01746 USA    
Handheld Pulse Oximeter Equipment Nellcor, Boulder, CO 80301 USA N20PA  
Retractor Equipment Roboz, Gaithersburg, MD 20898 USA RS-6514  
Isoflurane (Forane) Reagent Baxter 1001936040  
Ketamine HCl Reagent HOSPIRA Inc., Lake Forest, IL 60045 RL-0065  
Xylazine (AnaSed) Reagent Lloyd LB15705A  
Buprenorphine HCL Inject Reagent Bedford Labs, Bedford, OH 44146 USA Div-BUP-P00  
Bupivacaine 0.25% Reagent HOSPIRA Inc., Lake Forest, IL 60045    
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Cite This Article
Sill, B., Alpatov, I. V., Pacak, C. A., Cowan, D. B. Implantation of Engineered Tissue in the Rat Heart. J. Vis. Exp. (28), e1139, doi:10.3791/1139 (2009).

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