Implantation de l'ingénierie tissulaire dans le coeur de rat
Summary
Ici, nous décrivons une procédure de chirurgie cardiaque à l'implant de l'ingénierie tissulaire dans la auriculo-ventriculaire (AV)-groove d'un rat adulte Lewis.
Abstract
La chirurgie des rongeurs est souvent un élément important dans l'évaluation de l'utilité de tissus d'ingénierie. Une grande variété de procédures chirurgicales peuvent être effectuées sur des rats ou des souris de laboratoire courants et ces très souvent servir d'étape intermédiaire entre paillasse expériences et essais sur les animaux ou les grands essais sur les humains. Étant donné que les rongeurs fournir un système modèle établi, rentable, et physiologiquement pertinente permettant de tester de nouvelles combinaisons de matériaux d'échafaudage et les cellules, ils sont particulièrement bien adapté pour les études cardiovasculaires ingénierie tissulaire. Actuellement, nous décrivons une procédure chirurgicale à cœur ouvert pour implanter l'ingénierie tissulaire contenant des cellules progénitrices myogéniques dans le auriculo-ventriculaire (AV) sillon d'un coeur de rat. Ces implants sont destinés à créer un conduit électrique entre l'oreillette droite et le ventricule droit dans le but ultime d'offrir un traitement alternatif à l'implantation du stimulateur classique chez les patients pédiatriques présentant un bloc auriculo-ventriculaire complet [1]. L'ingénierie tissulaire est implanté dans l'AV-sillon au moyen d'un thoracotomie. Pour nos besoins, des rats Lewis sont anesthésiés et ventilés afin de maintenir invasive en pression positive durant la procédure chirurgicale stérile. L'approche du cœur est réalisée par une thoracotomie droite à travers une incision antéro-latérale à la 5<sup> E</supL'espace> intercostaux. La construction du tissu est fixé dans la rainure AV à l'aide d'une seule suture Prolène 7-0 et positionné entre le ventricule droit et l'oreillette à la partie ventrale du cœur. L'épicarde est partiellement enlevée pour permettre le contact direct entre les cellules réceptrices du myocarde et ceux contenus dans le génie tissulaire. Après l'implantation, la paroi thoracique est fermé dans les couches, les pneumothorax est évacuée, et l'animal est extubé et traités avec analgésique.
Protocol
Discussion
Pour un résultat favorable à l'intervention chirurgicale, il est essentiel de bien intuber et ventiler l'animal invasive. Si le rat est tout simplement sous sédation et autorisés à respirer spontanément, les deux poumons s'effondrera inévitablement tout le thorax est ouvert en raison de la plèvre commune chez les rongeurs. Avant de refermer le coffre, tout un pneumothorax doit être complètement éliminés et les poumons complètement développées pour réduire l'atélectasie. Sinon, le sevrage…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Ce travail est soutenu par des subventions de recherche du National Institutes of Health (HL068915; HL088206) et les contributions au Fonds de la conduction cardiaque au Centre hospitalier pour enfants de Boston.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| 7×4 Thermo Pad 4/box | Equipment | Hood Thermo-Pad, Summerland, BC Canada | MODEL 704R | |
| Inspira ASV Ventilator | Equipment | Harvard Apparatus, Holliston, MA 01746 USA | ||
| Handheld Pulse Oximeter | Equipment | Nellcor, Boulder, CO 80301 USA | N20PA | |
| Retractor | Equipment | Roboz, Gaithersburg, MD 20898 USA | RS-6514 | |
| Isoflurane (Forane) | Reagent | Baxter | 1001936040 | |
| Ketamine HCl | Reagent | HOSPIRA Inc., Lake Forest, IL 60045 | RL-0065 | |
| Xylazine (AnaSed) | Reagent | Lloyd | LB15705A | |
| Buprenorphine HCL Inject | Reagent | Bedford Labs, Bedford, OH 44146 USA | Div-BUP-P00 | |
| Bupivacaine 0.25% | Reagent | HOSPIRA Inc., Lake Forest, IL 60045 |
References
- Choi, Y. H. Cardiac conduction through engineered tissue. Am J Pathol. 169, 72-85 (2006).
- Shin, J. W. Low-dose systemic bupivacaine prevents the development of allodynia after thoracotomy in rats. Anesth Analg. 107, 1587-1591 (2008).
- Horstick, G. Surgical procedure affects physiological parameters in rat myocardial ischemia: need for mechanical ventilation. Am J Physiol. 276, H472-H479 (1999).
