בידוד של האדם תאים עורק טבורי האנדותל (HUVEC)
Summary
זה פרוטוקול וידאו ממחישה את הבידוד של התרבות האנושית וריד הטבור בתאי האנדותל (HUVEC) מ חבל הטבור האדם. לאחר מבודד את התאים האלה יכול לשמש ב מבחני חוץ גופית אנגיוגנזה כמו Assay אופטימליים הפיברין ביד ג'ל הוכיח גם על ידי המעבדה יוז.
Abstract
אנגיוגנזה היא תהליך מורכב רב שלבי, שבו בתגובה לגירויים angiogenic, כלי חדש נוצרות vasculature הקיים. צעדים אלה כוללים: ירידה של התפשטות קרום, מרתף והגירה (נביטה) של בתאי האנדותל (EC) לתוך המטריצה תאיים, יישור של EC לתוך מיתרי, היווצרות לומן, השקה, ועל היווצרות קרום מרתף חדשה. רבים מבחני חוץ גופית פותחו כדי ללמוד את התהליך הזה, אבל רוב לחקות רק בשלבים מסוימים של אנגיוגנזה, ואת מורפולוגית כלי לעתים קרובות לא דומים כלי in vivo. כאן אנו מדגימים אופטימיזציה assay אנגיוגנזה במבחנה אשר מנצל האדם וריד הטבור EC ו fibroblasts. זה המודל משחזר את כל השלבים המוקדמים המפתח של אנגיוגנזה, ואת כלי חשוב להציג לומן פטנט אינטר מוקף EC מקוטב. כלי ניתן להבחין בקלות לעומת שלב ואת זמן לשגות מיקרוסקופ, והחלים בצורה הטהורה עבור יישומים במורד הזרם.
Protocol
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| 0.1% Collagenase | 10ml per cord, warmed to 37°C | |||
| Tissue culture flasks | T75, one per cord. | |||
| Hanks medium | ||||
| scissors | sterile | |||
| beaker | sterile | |||
| 50 ml tubes |
