İnsan umbilikal ven endotel hücreleri İzolasyon (HUVEC)

Summary

Bu video protokolü insan göbek kordonu, insan umbilikal ven endotel hücreleri (HUVEC) izolasyonu ve kültürü göstermektedir. Bir kere bu hücreler, in vitro Hughes laboratuvar gösterdiği Optimize Fibrin Jel Boncuk Testi gibi anjiyogenez tayinlerde için kullanılabilir izole edilmiştir.

Abstract

Anjiyogenez anjiyogenik uyaranlara yanıt olarak, yeni damarlar mevcut damarsal oluşturulan karmaşık çoklu adımlı bir süreçtir. Bu adımlar şunlardır: kabloları, lümen oluşumu, anastomoz, yeni bir bazal membran oluşumu ve ekstrasellüler matriks, AT uyum içine endotel hücreleri bazal membran, proliferasyon ve göç (çimlenme) (EC) bozulması. In vitro tayinlerde, bu süreç pek çok çalışma için geliştirilmiş, ancak çoğu sadece belirli aşamalarında anjiyogenez taklit ve morfolojik gemilerin çoğu in vivo gemileri benzemez edilmiştir. Burada bir insan umbilikal ven EC ve fibroblastlar kullanır in vitro anjiyogenez tahlil optimize göstermektedir. Bu modeli özetlediği önemlisi anjiyogenez en önemli erken aşamalarında, ve gemilerin, polarize EC çevrili patent hücrelerarası lümen gösterir. Gemiler, faz kontrast ve zaman atlamalı mikroskobu ile kolayca gözlenen ve downstream uygulamalar için saf formu ele olabilir.

Protocol

Prosedür Aşırı kan kapalı temiz yastık ve dab kablosu yatırın. Kablosunun her iki ucunda da taze kesim olun. Damar içine iğne ON plastik kılıflı 21 1 / 2 G iğne takın. (Ven en büyük açılış; 2 küçük olanları arterler) Kelepçe bir hemostatla yerde iğne Hanks, 20cc şırınga ve iğne takın. Orta basınç ile damar yoluyla Hanks itin. Beher çamaşır suyu ile atık toplayın. (Itme ven ha…

Materials

Material Name	Type	Company	Catalogue Number	Comment
0.1% Collagenase				10ml per cord, warmed to 37°C
Tissue culture flasks				T75, one per cord.
Hanks medium
scissors				sterile
beaker				sterile
50 ml tubes