Summary
जिल्द की सूजन herpetiformis (DH) एक जीर्ण सूजन IgA और epidermal transglutaminase (ETG) के बीच एक autoimmune प्रतिक्रिया द्वारा विशेषता शर्त है. DH लस के प्रति संवेदनशील और / या सीलिएक रोगियों के एक बहुत छोटे से हिस्से में विकसित करता है. इस अध्ययन के परिणामों से संकेत मिलता है कि DH भी रीसस idiopatic जिल्द की सूजन के लक्षणों के साथ बंदर मेजबान में विकसित कर सकते हैं.
Abstract
ऊतक 2 transglutaminase (tTG2) एक पेट पाचक एंजाइम है जो पहले से ही आंशिक रूप से पचता आहार लस जैसे gliadin पेप्टाइड्स deamidates है. आनुवंशिक रूप से संवेदनशील व्यक्तियों में tTG2 autoimmune प्रतिक्रिया है कि tTG2 एंटीबॉडी और उनके छोटे आंत्र दीवार 1,2 में सीधे बयान के उत्पादन द्वारा विशेषता है से चलाता है. ऐसे एंटीबॉडी की उपस्थिति सीलिएक रोग (सीडी) के प्रमुख विशेषता के गठन. Epidermal transglutaminase (ETG) है कि सीडी के रोगियों के एक छोटे से अल्पसंख्यक में एक स्वप्रतिजन के रूप में भी कार्य कर सकते हैं transglutaminase परिवार के एक अन्य सदस्य है. इन अपेक्षाकृत दुर्लभ मामलों में, ETG चिकित्सकीय जिल्द की सूजन herpetiformis (DH) के रूप में जाना जाता है एक autoimmune प्रतिक्रिया (एक त्वचा लाल चकत्ते) चलाता है. हालांकि सीडी और DH रोगजनन की सटीक व्यवस्था अच्छी तरह से समझ नहीं है, यह ज्ञात है कि tTG2 और है कि दोनों सीडी और DH 3,4 रोगियों से सीरम एंटीबॉडी द्वारा मान्यता प्राप्त किया जा सकता है शेयर प्रतिजनी epitopes ETG.
(Macaca mulatta) जिल्द की सूजन के साथ (1 टेबल, चित्र 1 और 2.) की त्वचा के घावों से बायोप्सी नमूनों की परीक्षा प्रभावित ऊतकों का अध्ययन किया गया था. एक जानवर (EM96) में IgA और tTG2 एंटीबॉडी (छवि 3) की एक वर्णक्रमीय ओवरलैप प्रदर्शन किया गया. डबल सकारात्मक tTG2 की उपस्थिति + IgA + कोशिकाओं त्वचीय papillae के आसपास गहरी epidermis में ध्यान केंद्रित किया गया था. यह DH 3 रोगियों में वर्णित घावों के साथ संगत है. जब EM96 एक लस मुक्त आहार, जिल्द की सूजन के रूप में के रूप में अच्छी तरह से रखा गया था tTG2 IgA + + जमा गायब हो गया और नहीं रह गया detectable (1-3 Figs.) है. जिल्द की सूजन निकल आया लेकिन EM96 में आहार लस (नहीं दिखाया गया है) फिर से परिचय के आधार पर. असंबंधित जिल्द की सूजन के साथ जानवरों सहित अन्य मकाक में, tTG2 + IgA + जमा नहीं पाया गया. TTG2 की उपस्थिति के साथ मिलकर EM96 में लस मुक्त आहार निर्भर जिल्द की सूजन की छूट + IgA + अपनी त्वचा में कोशिकाओं का सुझाव है एक autoimmune, DH-की तरहइस हालत के विकास के लिए तंत्र. यह किसी भी गैर मानव प्राइमेट में DH की तरह जिल्द की सूजन की पहली रिपोर्ट है.
Protocol
1. त्वचा बायोप्सी नमूना संग्रह
- त्वचा बायोप्सी प्रक्रिया के पहले जानवरों intramuscularly anesthetize 2.5 मिलीग्राम / tiletamine हाइड्रोक्लोराइड और zolazepam हाइड्रोक्लोराइड telazol मिश्रण (किले Dodge पशु स्वास्थ्य, किले Dodge, आइए) किलो के साथ. अवलंबन जब तक संवेदनाहारी के प्रशासन से पशुओं मॉनिटर और फिर उनके बाड़े से निकालने के.
- एक आकार 40 ब्लेड (Oster व्यावसायिक उत्पाद, मैक्मिनविल, तमिलनाडु) के साथ एक Oster गोल्डन A5 सिंगल स्पीड पशु चिकित्सा क्लिपर का उपयोग ब्याज की त्वचा क्षेत्र से बालों को निकालें और aseptically betadine साफ़ और शराब बारी के साथ तैयार. चयनित बायोप्सी साइट पर एक बाँझ गवाक्षित टांगना सुरक्षित.
- एक बाँझ तकनीक का उपयोग, त्वचा के खिलाफ एक 4.0 मिमी Miltex पंच त्वचीय बायोप्सी साधन (Miltex, यॉर्क, PA) जगह जब तक जबकि साधन 180 डिग्री दक्षिणावर्त और थोड़ा दबाव के साथ काउंटर दक्षिणावर्त rotating बायोप्सी पंच उपचर्म ती में त्वचीय परतों के माध्यम से transectsssue. बायोप्सी नमूना निकालें और संदंश और उपचर्म ऊतक से मुक्त के साथ त्वचा के transected भाग समझ.
- 3-0 नायलॉन सलीब के आकार का पैटर्न में एक 3 / 8 चक्र काटने सुई (Ethilon, Ethicon, जॉनसन एंड जॉनसन मेडिकल लिमिटेड, Berkshire, ब्रिटेन) से जुड़ी सीवन के साथ त्वचा दोष बंद करें. सभी जानवरों 0.01 मिलीग्राम / किग्रा (Hospira, झील वन, आईएल) buprenorphine intramuscularly हाइड्रोक्लोराइड पोस्ट ऑपरेटिव analgesia के लिए दे.
2. नमूना प्रसंस्करण
- क्रोनिक जिल्द की सूजन और त्वचा बायोप्सी के नमूनों के साथ स्वस्थ नियंत्रण से कार्य रीसस मकाक. प्राप्त करने के लिए दो तीन (व्यास में 4 मिमी) प्रत्येक जानवर से बायोप्सी नमूनों.
- जस्ता formalin (जेड तय, Anatech लिमिटेड, बैटल क्रीक, एमआई) में 24 घंटे के लिए पहला नमूना फिक्स करने के लिए, 30 मिनट के लिए पानी में धो, 70% इथेनॉल में संक्षिप्त धोने, और ASP300 Leica ऊतक (Leica माइक्रोसिस्टम्स इंक प्रोसेसर में जगह , भैंस ग्रोव, के एस) जहां ऊतक 70%, 80%, 95% और 100% 48 इथेनॉल के आरोही ग्रेड के साथ निर्जलित है(फिशर साइंटिफिक, पिट्सबर्ग, फिलीस्तीनी अथॉरिटी) प्रत्येक, xylene के दो परिवर्तन (फिशर) द्वारा बाद मि.
- कमरे के तापमान पर दीर्घकालिक भंडारण के लिए पैराफिन मीडिया (फिशर) में एम्बेड. 20 सेक्शनिंग करने के लिए पहले मिनट के लिए 20oC प्लेस. 6 सुक्ष्ममापी वर्गों एक रोटरी सूक्ष्म तक्षणी (HM325, Microm इंटरनेशनल, वाल्डोर्फ, जर्मनी) का उपयोग कर तैयार है. चार्ज (फिशर) स्लाइड्स और 60oC रातोंरात पर शुष्क हवा पर प्लेस वर्गों. Hematoxylin और (एच एंड ई) मानक विधि (नीचे वर्णित) लाल भामसान रंग के साथ दाग.
- कमरे के तापमान पर 30 मिनट के लिए 2% paraformaldehyde (यूएसबी कॉर्प, क्लीवलैंड, OH) में दूसरा नमूना ठीक फॉस्फेट में तीन बार धो खारा (पीबीएस, Gibco Invitrogen, Carlsbad, CA) buffered, 30% sucrose (फिशर) में जगह के लिए 4 घंटे, और अक्तूबर ठंड मध्यम (Sakura Finetek, Torrence, सीए) में एम्बेड. 80oC-20 सेक्शनिंग करने के लिए पहले मिनट के लिए रखें. 15 सुक्ष्ममापी वर्गों cryostat (HM560, थर्मो वैज्ञानिक, Kalamazoo, एमआई) का उपयोग कर तैयार है.
3. एच एंड ई धुंधला हो जाना
- एम्बेड Deparaffinizeतीन परिवर्तन के 100%, 95% के दो परिवर्तन, 80% की एक परिवर्तन और आसुत जल, 2 मिनट प्रत्येक xylenes (फिशर) के तीन परिवर्तन और वर्गीकृत ethanols माध्यम rehydrate के माध्यम से ded वर्गों.
- Hematoxylin (रिचर्ड एलन वैज्ञानिक, Kalamazoo, एमआई) के साथ एक मिनट के लिए दाग और नल का पानी चलाने में एक संक्षिप्त धोने से पालन करें.
- 6 मिनट के लिए लाल भामसान रंग (सिग्मा) के साथ Counterstain.
- 95% और निरपेक्ष इथेनॉल के माध्यम से सना हुआ ऊतकों निर्जलीकरण, 2 मिनट प्रत्येक के दो बदलाव और फिर xylenes के तीन परिवर्तन में स्पष्ट, 3 मिनट प्रत्येक.
- माउंट Cytoseal बढ़ते मध्यम का उपयोग एच एंड ई दाग ऊतक वर्गों पर coverglass (वैज्ञानिक रिचर्ड एलन).
4. Histopathological मूल्यांकन
40x और एक स्पॉट इनसाइट डिजिटल कैमरा (डिजिटल उपकरण इंक, मिशिगन, संयुक्त राज्य अमरीका) के साथ Leica माइक्रोस्कोप बढ़ाई - एच एंड ई से सना हुआ एक प्रकाश 4 का उपयोग कर खुर्दबीन के नीचे बायोप्सी त्वचा वर्गों का निरीक्षण किया.
5. Immunofluorescent staining
- अक्टूबर - एम्बेडेड immunofluorescent धुंधला के लिए त्वचा वर्गों के साथ कार्य करें. पहले धुंधला हो जाना करने के लिए, पीबीएस में 20 मिनट के 0.1% के साथ 0.2% मछली त्वचा जिलेटिन (FSG, सिग्मा) युक्त Triton एक्स 100 (सिग्मा) अक्टूबर को दूर करने के लिए और ऊतकों permeabilize के लिए लेना.
- स्लाइड्स को धोने के बाद, 10% सामान्य बकरी (NGS, सिग्मा) सीरम, PBS-FSG में 1 घंटे के लिए कमरे के तापमान पर, पतला के साथ एक humidified स्लाइड कक्ष में सेते हैं.
- आदेश में IgA और tTG2 एंटीबॉडी के बयान को कल्पना करने के लिए, विरोधी रीसस IgA और tTG2 प्राथमिक एंटीबॉडी, 1 घंटे के लिए 10% NGS - PBS-FSG में पतला के साथ स्लाइड्स सेते हैं.
- 10 मिनट, 10 मिनट के लिए PBS-FSG द्वारा पीछा के लिए PBS-FSG-Triton एक्स 100 (सिग्मा) धो लें.
- माध्यमिक, निर्धारण विशिष्ट एंटीबॉडी 1:1,000 कमजोर पड़ने पर Alexa Fluor fluorochrome 488 (हरा), 568 (लाल) या 633 (नीला) (आण्विक जांच - Invitrogen) के साथ टैग के साथ सेते हैं. डाई ToPro-3 का उपयोग करने के लिए परमाणु डीएनए कल्पना. एक एंटीबॉडी मंदक के रूप में 10% NGS PBS-FSG का प्रयोग करें.
- दाग ऊतक वर्गों माउंट समाधान विरोधी शमन (सिग्मा) का प्रयोग करें.
6. Confocal इमेजिंग
488 एनएम पर एक argon क्रीप्टोण लेजर (हरा), 568 एनएम पर एक क्रीप्टोण लेजर (Leica टीसीएस SP2 को यह सच है Confocal लेज़र स्कैनिंग माइक्रोस्कोप (Leica, Wetzlar, जर्मनी) तीन (उपलब्ध उत्तेजना के लिए छह लाइनों) लेज़रों के साथ सुसज्जित के साथ इमेजिंग प्रदर्शन लाल) और 633 एनएम (नीला), कि दूर लाल स्पेक्ट्रम की ओर से दिखाई अवधि में एक हीलियम - नीयन लेजर. रिकॉर्ड अंतर गैर लेबल ऊतक वास्तुकला के मूल्यांकन के लिए हस्तक्षेप विपरीत (डीआईसी) छवियों.
7. प्रतिनिधि परिणाम
दोनों tTG2 और IgA एंटीबॉडी द्वारा ETG की सकारात्मक पहचान का एक उदाहरण छवि में दिखाया गया है. 3A. लगातार मानव रोगियों में स्थिति और सीडी की तरह रीसस मकाक में लस भी संवेदनशीलता से DH - तरह जिल्द की सूजन के बहुत कम प्रसार के कारण के साथ, त्वचा बायोप्सी नमूनों के सबसे थानेदार की उम्मीद कर रहे हैंसकारात्मक प्रतिक्रिया w tTG2 एंटीबॉडी के साथ, लेकिन tTG2 IgA + + डबल सकारात्मक कोशिकाओं (4 छवि) की उपस्थिति के बिना. माइक्रोबियल मूल के जिल्द की सूजन के मामलों सहित इन DH-असंबंधित मामलों में, कुछ एकल सकारात्मक IgA + कोशिकाओं उपकला नीचे बिखरे हुए प्रकट लेकिन tTG2 और IgA लेबल मार्कर (3B Figs. और 4) के बीच वर्णक्रमीय ओवरलैप. इसलिए, यह महत्वपूर्ण है के लिए सुझाव दिया परीक्षण प्रक्रियाओं के आदेश को बनाए रखने के लिए, नैदानिक परीक्षा (1 छवि), histopathological (छवि 2) मूल्यांकन और सिर्फ अगर कोई अन्य, अधिक आम जिल्द की सूजन के कारण एजेंट confocal पहचाना जा सकता है है, द्वारा पीछा के साथ शुरू tTG2 और IgA के लिए दाग त्वचा बायोप्सी के माइक्रोस्कोपी परीक्षा warranted है. नैदानिक और / या histopathological मूल्यांकन अकेले इस हालत के सकारात्मक निदान के लिए पर्याप्त नहीं हैं. उन मामलों में जब डबल सकारात्मक (tTG2 + IgA +) कोशिकाओं त्वचीय papillae के आसपास के क्षेत्र की पहचान कर रहे हैं, DH तरह जिल्द की सूजन के निदान को जारी किया जा सकता है. ऐसे मामलों में आहार लस की वापसी,और लस मुक्त आहार का प्रशासन क्रम में जिल्द की सूजन के लक्षणों को कम करने की सिफारिश की है.
चित्रा 1 EM96 मकाक के पहले वंक्षण क्षेत्र (ए) और बाद में (बी) 5 हफ्तों के लिए आहार लस की वापसी. आहार लस के reintroduction जिल्द की सूजन की फिर से बाहर निकलना (सी) के साथ हुई.
चित्रा 2. महामहिम EM96 मकाक त्वचा बायोप्सी से पहले एकत्र की धुंधला (ए) और बाद में (बी) 9 सप्ताह के लिए आहार लस की वापसी. एक: उपकला thickened hyperkeratotic कोशिकाओं की एक मोटी सतही पपड़ी degenerating neutrophils साथ घुसपैठ के साथ (उपकला कोशिकाओं की परतों 7-15). Neutrophils उपकला के अंदर भी दिखाई देते हैं और लिम्फोसाइटों, प्लाज्मा कोशिकाओं, और ऊपरी dermis में संयुक्तांश आसपास histiocytes के उदारवादी संख्या के साथ मिश्रित कर रहे हैं. बी: कुछ hyperkeratosis अभी भी मौजूद है, उपकला मोटाई सामान्यीकृत ऊपरी dermis में कम से कम lymphoplasmacytic घुसपैठ के साथ (4-7 परतों) है. सी: FR56 मकाक से सामान्य पेट नहीं lymphoplasmacytic घुसपैठ के साथ, त्वचा, तुलना के लिए शामिल है. 20x बढ़ाई.
चित्रा 3 EM96 मकाक त्वचा बायोप्सी से पहले एकत्र की Confocal माइक्रोस्कोपी छवियों (ए) और बाद में (बी) 9 सप्ताह के लिए आहार लस की वापसी. एक: IgA धुंधला (हरा), (लाल) tTG2 और ToPro 3 परमाणु डीएनए मार्कर (नीला). IgA और tTG2 के सह स्थानीयकरण त्वचीय papilae के आसपास के क्षेत्र में पीले रंग में प्रकट होता है. बी: त्वचा नमूना के 9 सप्ताह के बाद लिया लस मुक्त आहार उपकला भीतर कोई IgA से पता चलता है subepithelial IgA जबकि कुछ अभी भी मौजूद है (हरा), (लाल) tTG2 और ToPro 3 परमाणु डीएनए मार्कर (नीला).
चित्रा 4.
| पशु टैग | लिंग [/ एम एफ] | उम्र [वर्षों] | नैदानिक लक्षण | प्लाज्मा tTG2 एंटीबॉडी | आहार [1,2] * |
| HJ71 | एफ | 1.3 | स्वस्थ | - | 1 |
| HD13 | एम | 1.4 | स्वस्थ, सामयिक दस्त | + | 1 |
| FR56 | एम | 5.4 | पुरानी अज्ञातहेतुक दस्त | - | 1 |
| EM96 | एफ | 5.0 | क्रोनिक जिल्द की सूजन | + / - (सीमा रेखा) | 1 और 2 |
| GI24 | एफ | 4.6 | क्रोनिक जिल्द की सूजन | - | 1 |
तालिका 1. TNPRC रीसस त्वचा बायोप्सी के संग्रह के लिए इस्तेमाल किया मकाक
* 1 आहार - नियमित रूप से बंदर चाउ (लस युक्त); आहार 2 - लस मुक्त आहार
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
हमारे नव स्थापित गैर मानव लस संवेदनशीलता के रहनुमा मॉडल हाल ही आंतों पारगम्यता आहार 5,6 लस द्वारा ट्रिगर परिवर्तन का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया गया था. प्लाज्मा tTG2 एंटीबॉडी आंतों tTG2 + IgA + जमा के रूप में के रूप में अच्छी तरह से कुछ लस के प्रति संवेदनशील मकाक में पाया गया. के बाद से हम हाल ही में कॉलोनी में अज्ञातहेतुक जिल्द की सूजन के दुर्लभ घटनाओं रीसस मकाक, जहां कोई सामान्य (/ संक्रामक चयापचय) एटियलजि स्थापित हो सकता है की पहचान, इस अध्ययन का उद्देश्य का मूल्यांकन करने गया था अगर tTG2 + IgA + एंटीबॉडी जमा इन दुर्लभ मामलों से त्वचा के नमूनों में पता लगाया जा सकता है जिल्द की सूजन (तालिका 1).
TTG2 autoantibodies है कि 1:70 और सात 1:200 के बीच सीडी पर्वतमाला के संकेत हैं की व्याप्तता. लस के प्रति संवेदनशील मकाक के साथ हमारे अध्ययन है कि बंदी में tTG2 एंटीबॉडी के प्रसार से संकेत मिलता है रीसस मानव आबादी से रिपोर्ट मिलता है कि मकाक. प्राथमिक पर्यावरण और आनुवंशिक कारकों हद ओ प्रभावित हो सकता हैच दोनों मानव और मकाक में इस तरह के प्रसार 8,9 understudied रहे हैं. कारक है कि DH (1:400 के लिए 1:10,000) के कम प्रसार के साथ सीडी से जुड़े रहे हैं यह भी ज्ञात नहीं कर रहे हैं. इसलिए, अधिक कठोर अनुसंधान करने के लिए सीडी और DH रोगजनन अध्ययन की जरूरत है. इस रिपोर्ट में गैर मानव प्राइमेट में जिल्द की सूजन DH तरह के अस्तित्व का प्रदर्शन पहली है. DH - तरह जिल्द की सूजन की है कि प्रसार के बावजूद बहुत लस संवेदनशील भी मकाक में आंत्रविकृति की व्यापकता से कम प्रतीत होता है, प्रस्तुत परिणाम भविष्य के अनुसंधान के लिए आशा प्रदान करते हैं, यह सोचते हैं कि DH - तरह जिल्द की सूजन के साथ अतिरिक्त पशुओं की पहचान की जाएगी. डबल सकारात्मक tTG2 की जांच + IgA + प्रभावित पशुओं की त्वचा बायोप्सी में confocal माइक्रोस्कोपी द्वारा कोशिकाओं ऐसे प्रयासों में महत्वपूर्ण भूमिका निभाई जाएगी.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
ब्याज की कोई संघर्ष की घोषणा की.
Acknowledgments
लेखकों अमांडा Tardo, डा. मुस्तफा Bouljihad, स्टेफ़नी feely, कैरल Coyne, डा. आयलैंड Ribka, डा. पीट डिडिएर और डोरोथी Kuebler उनके तकनीकी सहायता के लिए धन्यवाद करना चाहते हैं. इस काम एनआईएच R01-DK076653 अनुदान और के.एस. 3R01-DK076653-02S1 और RR000164 TNPRC के बेस आपरेटिंग अनुदान द्वारा समर्थित किया गया.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Anti-Human IgA-FITC * | Sigma-Aldrich | F-5259 | 1:100 working dilution |
| Anti-Human tTG2 | Thermo Fisher Scientific, Inc. | MS-300-P1ABX | 1:100 working dilution |
| Anti-Mouse IgG1 ** | Invitrogen | A-21124 | 1:1,000 working dilution |
| ToPro-3 DNA probe *** | Invitrogen | T-3605 | 1:1,000 working dilution |
| Zinc Formalin (Z-fix) | Anatech Ltd., Battle Creek, MI | 171 | |
| OCT Freezing Medium | Sakura Finetek | 4583 | |
| Cytoseal Mounting Medium | Richard-Allan Scientific | 8312-4 | |
| Anti-Quenching Solution | Sigma-Aldrich | P 3130 | |
| Ethilon (Nylon Suture) | Ethicon Inc. | 663G | |
| Miltex Punch Dermal Biopsy Instrument | Miltex Inc. | NA | |
| Oster Golden A5 Single Speed Vet Clipper with a size 40 blade | Oster Professional Products | 78005-050 | |
| Leica Tissue Processor | Leica Microsystems | ASP300 | |
| Rotary Microtome | Microm International | HM325 | |
| Cryostat | Thermo Fisher Scientific, Inc. | HM560 | |
| Confocal Microscope | Leica, Wetzlar | TCS SP2 | |
| * Fluorescein isothiocyanate ** Secondary (Alexa Fluor 568-conjugated) antibody used after tTG2 primary antibody ** Dye |
|||
References
- Diosdado, B., Wijmenga, C. Molecular mechanisms of the adaptive, innate and regulatory immune responses in the intestinal mucosa of celiac disease patients. Expert. Rev. Mol. Diagn. 5 (5), 681-700 (2005).
- Schuppan, D., Dennis, M. D., Kelly, C. P. Celiac disease: epidemiology, pathogenesis, diagnosis, and nutritional management. Nutr. Clin. Care. 8 (2), 54-69 (2005).
- Sardy, M. Epidermal transglutaminase (TGase 3) is the autoantigen of dermatitis herpetiformis. J. Exp. Med. 195 (6), 747-757 (2002).
- Rose, C. Autoantibodies against epidermal transglutaminase are a sensitive diagnostic marker in patients with dermatitis herpetiformis on a normal or gluten-free diet. J. Am. Acad. Dermatol. 61 (1), 39-43 (2009).
- Bethune, M. Transepithelial transport and enzymatic detoxification of gluten in gluten-sensitive rhesus macaques. PLoS ONE. 3 (3), e1857-e1857 (2008).
- Mazumdar, K. Visualization of transepithelial passage of the immunogenic 33-residue peptide from α-2 gliadin in gluten-sensitive macaques. PLoS ONE. 5 (4), e10228-e10228 (2010).
- Schuppan, D., Junker, Y., Barisani, D. Celiac disease: from pathogenesis to novel therapies. Gastroenterol. 137 (6), 1912-1933 (2009).
- Hunt, K. Newly identified genetic risk variants for celiac disease related to the immune response. Nature Genet. 40 (4), 395-402 (2008).
- Abadie, V. Integration of genetic and immunological insights into a model of celiac disease pathogenesis. Annu. Rev. Immunol. 29, 493-525 (2011).
