Geç Embriyonik ve Yenidoğan Farelerde Ölçüm Sol Ventrikül Basınç
Summary
Embriyonik ve yenidoğan farelerde Ölçme sol ventrikül basıncı (LV) tarif edilir. Basınç ultrason eşliğinde LV içine bir sıvı dolu transdüktörüne bağlı bir iğne sokarak ölçülür. Bakım deneysel protokol sırasında normal kalp fonksiyonları korumak için alınması gerekir.
Abstract
Kan basıncı omurgalı hayvanlarda embriyonik ve postnatal gelişim sırasında önemli ölçüde artırır. Fare, kan akışı embriyonik gün (E) 8,5 1 etrafında birinci bulgulanabilir. Sistolik sol ventrikül (LV) basınç E9.5 az 2 mmHg ve E14.5 2 11 mmHg. Kaburga ve deri tam gelişmiş değil çünkü bu orta embriyonik aşamalarında, LV invaziv basınç ölçümleri için göğüs duvarına doğru olduğu açıkça görülebilir. E14.5 ve doğum (yaklaşık E21) arasındaki görüntüleme yöntemleri LV görüntülemek için kullanılmalıdır. 35 3 – postnatal gün (P) 2 ila 70 mmHg – Doğumdan sonra, 30 arteriyel basınç artar anlamına gelir. P20 ötesinde, kan basıncı solid-state kateterler (yani Millar veya Scisense) ile ölçülebilir. Özel sıvı dolu basınç dönüştürücüler 3 veya cam mikropipetler att bağlı plastik kateterler çekti ile P20 önce, bu kateterler fare arterler ve kan basıncı geliştirmek için çok büyük ölçülmelidirservo boş basınç dönüştürücüler 4 ağrıyordu.
Bizim son çalışma kan basıncı en büyük artış 5-7 farelerde erken postnatal döneme geç embriyonik sırasında oluşur göstermiştir. Kan basıncında Bu büyük artış gelişmekte olan arterlerde düz kas hücresi (SMC) fenotipi etkileyen ve önemli mechanotransduction olayları tetikleyebilir. Gelişmekte olan arterlerin mekanik özellikleri dışı matriks proteinleri (örneğin Marfan Sendromu 8 ve Supravalvüler Aort darlığı 9) kusurlar olarak bağdaştırılır insan hastalığı, bu dönemde kan basıncında hızlı değişiklikler mechanotransduction değişiklikler yoluyla hastalık fenotipi ve şiddetine katkıda bulunabilir sinyalleri. Bu nedenle, insan hastalık fare modellerinde geç embriyonik ve yenidoğan döneminde kan basıncı değişiklikleri ölçmek için edebilmek önemlidir.
Biz geç ölçüm LV basınç için bir yöntem tarifembriyonik (E18) ve postnatal (P1 – 20) fareler. Bir sıvı dolu bir basınç transdüktörüne bağlı bir iğne ultrason eşliğinde LV sokulur. Bakım özellikle embriyonik fareler için, deneysel protokol sırasında normal kalp fonksiyonları korumak için alınır. Temsilcisi veriler sunulmuş ve protokol sınırlamaları tartışılmıştır.
Protocol
Discussion
Burada sunulan protokolü geç embriyonik ve erken Neonatal farelerde LV basıncı ölçmek için bir yöntem sağlar. Bu protokolün ana sınırlama basınç sisteminin zamansal çözünürlük. Bu dönüştürücü iğne ile LV gelen seyahat ve sadece basınç değerleri kaydedilebilir ortalama olarak basınç sinyali sönümlü edilir. Sönümleme mümkün olan en geniş iğne kullanılarak minimize edilebilir, ancak iğne farklı yaşlı farelerde için LV lümen içinde sığması gerekir. Diastolik basınç sıfı…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Bu çalışma NIH hibe HL087653 ve HL105314 tarafından kısmen finanse edildi. Bazı yöntemler Tıp Washington Üniversitesi Okulu'nda Robert Mecham laboratuvarında geliştirildi.
Materials
| Name of the reagent/equipment | Company | Catalogue number | Comments |
| High resolution ultrasound system | Visualsonics | Vevo 770 | Or other appropriate ultrasound system |
| High frequency ultrasound probes | Visualsonics | 708 and 707B | |
| Imaging platform and injection arm | Visualsonics | Imaging Station 2 | With ECG and temperature feedback control of platform |
| Pressure transducer | AD Instruments | MLT 844 | |
| Bridge amplifier | AD Instruments | ML221 | |
| Data acquisition system | AD Instruments | ML866 | |
| Data recording software | AD Instruments | LabChart | |
| Ring stand and clamp | Various suppliers | To hold pressure transducer during measurements | |
| 3-way stopcocks with luer connections, male lock | Cole Parmer | 30600-02 | |
| 1/16″ ID Tygon Tubing | Cole Parmer | 06408 | |
| Male and female luers w/ 1/16″ hose barb | Cole Parmer | 45510-50 45510-00 | |
| 24″ tubing with male and female luer at each end | Cole Parmer | 30600-60 | |
| 3 and 10 mL syringes | BD Biosciences | ||
| 30 and 25G needles | BD Biosciences | 1.5 inches in length | |
| Big Ben manometer | Riester | 1456-100 | |
| Saline | Various suppliers | ||
| Heparin | Various suppliers | ||
| Ultrasound gel | Parker | Aquasonic 100 | |
| Hair remover lotion | Nair |
References
- Ji, R. P. Onset of cardiac function during early mouse embryogenesis coincides with entry of primitive erythroblasts into the embryo proper. Circ. Res. 92 (2), 133-135 (2003).
- Ishiwata, T., Nakazawa, M., Pu, W. T., Tevosian, S. G., Izumo, S. Developmental changes in ventricular diastolic function correlate with changes in ventricular myoarchitecture in normal mouse embryos. Circ. Res. 93 (9), 857-865 (2003).
- Huang, Y., Guo, X., Kassab, G. S. Axial nonuniformity of geometric and mechanical properties of mouse aorta is increased during postnatal growth. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 290 (2), H657-H664 (2006).
- Ishii, T., Kuwaki, T., Masuda, Y., Fukuda, Y. Postnatal development of blood pressure and baroreflex in mice. Auton. Neurosci. 94 (1-2), 34-41 (2001).
- Le, V. P., Knutsen, R. H., Mecham, R. P., Wagenseil, J. E. Decreased aortic diameter and compliance precedes blood pressure increases in postnatal development of elastin-insufficient mice. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. , (2011).
- Wagenseil, J. E. Reduced vessel elasticity alters cardiovascular structure and function in newborn mice. Circ. Res. 104 (10), 1217-1224 (2009).
- Wagenseil, J. E. The importance of elastin to aortic development in mice. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 299 (2), H257-H264 (2010).
- Ramirez, F., Sakai, L. Y., Rifkin, D. B., Dietz, H. C. Extracellular microfibrils in development and disease. Cell. Mol. Life Sci. 64 (18), 2437-2446 (2007).
- Li, D. Y. Elastin point mutations cause an obstructive vascular disease, supravalvular aortic stenosis. Hum. Mol. Genet. 6 (7), 1021-1028 (1997).
- Roth, D. M., Swaney, J. S., Dalton, N. D., Gilpin, E. A., Ross, J. Impact of anesthesia on cardiac function during echocardiography in mice. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 282 (6), H2134-H2140 (2002).
- Phoon, C. K. Imaging tools for the developmental biologist: ultrasound biomicroscopy of mouse embryonic development. Pediatr. Res. 60 (1), 14-21 (2006).
