Lange-termijn Lethal toxiciteit Test met de Schaal- Artemia franciscana</em
Summary
Dit onderzoek betreft de ontwikkeling en standaardisatie van een waardevolle methodologische protocol op lange termijn (14 dagen) dodelijke toxiciteit die wordt uitgeoefend door chemische stoffen, industrieel afvalwater of in de riolering en vloeibare milieu monsters op de zoutwater schaaldieren te bepalen,<em> Artemia franciscana</em>.
Abstract
Onze onderzoeksactiviteiten gericht op het gebruik van biologische methoden voor de evaluatie van de milieukwaliteit, met bijzondere aandacht voor zout / brak water en sediment. De keuze van de biologische indicatoren moeten gebaseerd zijn op betrouwbare wetenschappelijke kennis en, eventueel, van de beschikbaarheid van gestandaardiseerde procedures. In dit artikel presenteren we een gestandaardiseerd protocol dat het mariene schaaldieren Artemia gebruikt om de toxiciteit van chemische stoffen en / of van het mariene milieu matrices te evalueren. Wetenschappers stellen dat de pekelkreeftjes (Artemia) is een geschikte kandidaat voor de ontwikkeling van een standaard bioassay voor wereldwijd gebruik. Een aantal kranten zijn gepubliceerd op de toxische effecten van verschillende chemische stoffen en toxische stoffen op artemia (Artemia). Het grote voordeel van deze schaal voor de toxiciteit studies is de algehele beschikbaarheid van de droge cysten, deze kan onmiddellijk worden gebruikt bij het testen en moeilijke teelt is niet vereist <sup> 1,2. Cyste op basis van toxiciteit testen zijn goedkoop, continu beschikbaar, eenvoudig en betrouwbaar en zijn dus een belangrijk antwoord op routine behoeften van toxiciteit screening, voor industriële controle-eisen of voor regelgevende doeleinden 3. De voorgestelde methode houdt in de sterfte als eindpunt. Het aantal overlevenden werden geteld en het percentage van de sterfgevallen werden berekend. De larven werden als dood beschouwd als ze een interne of externe beweging niet vertonen tijdens de enkele seconden van observatie 4. Deze procedure werd gestandaardiseerd testen referentiestof (natriumdodecylsulfaat), ongeveer resultaten worden in dit werk. Dit artikel hoort een video, die de prestaties van de procedurele toxiciteit beschrijft, waarin alle stappen die verband houden met het protocol.
Protocol
Discussion
Artemia is een van de meest waardevolle testorganismen beschikbaar voor ecotoxicologische tests en onderzoek tot nu toe gedaan kunnen we stellen dat het mogelijk is om de ondersteuning van meerdere opties met betrekking tot Artemia gebruik in de toxicologie en ecotoxicologie. De kenmerken van dit organisme te zetten in een geschikte soorten voor bioassays zijn: een brede geografische spreiding, een hoog aanpassingsvermogen aan ongunstige milieu-omstandigheden en gevarieerde voedingsstoffen, relatief ee…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Geproduceerd door Loredana Manfra van Instituut voor milieubescherming en onderzoek (Ispra-Department of Environmental Quality Monitoring) en Federica Savorelli van regionale agentschap voor milieubescherming (Emilia-Romagna, Italië).
Referentie leden voor de sub-werkgroep over de Artemia schaaldieren binnen de biologische methoden Groep – Saltwater / brak water en sediment van de UNICHIM Commissie op de waterkwaliteit (het instituut voor de technische normen die in de chemische sector).
Videografie en te bewerken, Marco Pisapia van Ispra (Web Unit).
Productie Coördinatie door Anna Maria Cicero en Erika Magaletti van Ispra (Department of Environmental Quality Monitoring).
We willen het Gewestelijk Agentschap bedanken voor milieubescherming van Emilia-Romagna, Ferrara Branch, de biologische methoden Groep – Saltwater / BrakWater en sediment van de UNICHIM Commissie op de waterkwaliteit en Luciana Migliore, Tor Vergata Universiteit (Rome) voor hun medewerking, Rossella Boscolo en Massimo Gabellini van Ispra (Afdeling Preventie en tegengaan van de effecten) voor hun financiële steun, Fabio Matassa en de London School van de talen in Rome voor hun taalkundige ondersteuning.
Materials
Produced by Loredana Manfra of Institute for environmental protection and research (ISPRA-Department of Environmental Quality Monitoring) and Federica Savorelli of Regional Agency for Environmental Protection (Emilia-Romagna, Italy).
Reference Members for the sub-working Group on the Artemia crustacean within the Biological Methods Group – Saltwater/Brackish Water and Sediment of the UNICHIM Commission on Water Quality (the institute for technical standardization operating in the chemical sector).
Videography and editing by Marco Pisapia of ISPRA (Scientific Advisory and Documentation Services).
Production Coordination by Anna Maria Cicero and Erika Magaletti of ISPRA (Department of Environmental Quality Monitoring).
We would like to thank the Regional Agency for Environmental Protection of Emilia-Romagna, Ferrara Branch and the Biological Methods Group – Saltwater /Brackish Water and Sediment of the UNICHIM Commission on Water Quality for their cooperation; Rossella Boscolo and Massimo Gabellini of ISPRA (Department of Prevention and Mitigation of Impacts) for their financial support; and the London School of Languages in Rome for their linguistic support.
| Name of the reagent | Company | Product number |
| Sodium Dodecyl Sulfate | Sigma-Aldrich | L4390 |
Appendix
The algal media has to be prepared using analytical quality reagents.
A liter of nutrient solution is prepared by dissolving 300 g of NaNO3, 30 g of KH2PO4 and 20 g of NH4Cl in distilled water.
Four initial solutions (A, B, C, D) of minerals are prepared as follows:
- A liter of solution “A” containing 30 g of ZnSO4 H2O, 25 g of CuSO4 5 H2O, 30 g of CoSO4 7 H2O and 20 g of MnSO4 H2O in distilled water;
- A liter of solution “B” containing 50 g of FeCl3 •6 H2O in distilled water;
- A liter of solution “C” containing 25 g of Na2MoO4 •2 H2O in distilled water;
- A liter of solution “D” containing 50 g di Na2EDTA •2 H2O in distilled water.
A liter of a final solution of minerals (solution “E”) is obtained adding aliquots of the above-mentioned solutions to distilled water. The following order of addition is recommended: 100 ml of solution “D”, 10 ml of solution “C”, 10 ml of solution “B” and 10 ml of solution “A”.
Three initial solutions (F, G, H) of vitamins are prepared as follows:
- A liter of solution “F” containing 100 mg of biotin in distilled water;
- A liter of solution “G” containing 10 g of thiamine in distilled water;
- A liter of solution “H” containing 100 mg of cobalamin in distilled water.
A liter of a final solution of vitamins (solution “I”) is obtained adding 10 ml of the three initial solutions to distilled water.
A liter of the algal media is prepared by dissolving 1 ml of the nutrient solution, 1 ml of the mineral final solution (solution “E”) and 1 ml of the vitamin final solution (solution “I”) in seawater. This latter may be obtained by dissolving recognized analytical quality reagents or a commercially available formulation in distilled or de-ionized water. Salt blends for creating the ideal saltwater are commercially available, e.g. the Instant Ocean mixtures. It is recommended the using of a seawater with salinity of 30 (±2) PSU and temperature of 20 (±1) °C.
References
- Togulga, M. The Short-Term Toxicity of Two Toxicants to Artemia Nauplii. Tr. J. of Zoology. 22, 259-266 (1998).
- Persoone, G., Wells, P. G., Sorgeloos, P. Artemia in aquatic toxicology: a review. Artemia Research and its Applications. Morphology, Genetics, Strain characterization Toxicology. , 259-275 (1987).
- Nunes, B. S., Carvalho, F. D., Guilhermino, L. M., Stappen, G. V. a. n. Use of the genus Artemia in ecotoxicity testing. Envir. Poll. 144, 453-462 (2006).
- APAT IRSA-CNR. . Metodi analitici per le acque Manuali e Linee guida 29/2003. Terzo Metodo, 8060 (2003).
- Sorgellos, P., Wielen, C. R. e. m. i. c. h. e. -. V. a. n. D. e. r., Persoone, G. The use of Artemia nauplii for toxicity tests – a critical analysis. Ecotox. Env. Saf. 2, 249-255 (1978).
- Savorelli, F., Palazzi, D., Gorbi, G., Invidia, M., Sei, S., Magaletti, E., Manfra, L., Gelli, F. Set up of a standard methodology for 14-day bioassay on Artemia franciscana and A. parthenogenetica. Biol. Amb. 21, 27-36 (2007).
- Brix, K. V., Cardwell, R. D., Adams, W. J. Chronic toxicity of arsenic to the Great Salt Lake brine shrimp, Artemia franciscana. Ecotox. Environ. Saf. 54, 169-175 (2003).
- Brix, K. V., Deforest, D. K., Cardwell, R. D., Adams, W. J. Derivation of a chronic site-specific water quality standard for selenium in the Great Salt Lake, Utah, USA. Environ. Toxicol. Chem. 23, 606-612 (2004).
- . Qualitá dell’acqua – Determinazione della tossicitá letale a 14 giorni con Artemia franciscana (Crustacea: Anostraca). Commissione UNICHIM “Qualitá dell’acqua” Gruppo di Lavoro “Metodi Biologici” Sottogruppo “Acque salate/salmastre e sedimenti”. , (2010).
- Varo, I., Navarro, J. C., Amat, F., Guilhermino, L. Characterisation of cholinesterases and evaluation of the inhibitory potential of chlorpyrifos and dichlorvos to Artemia salina and Artemia parthenogenetica. Chem. 48, 563-569 (2002).
