Summary

לטווח ארוך רעילות מבחן קטלני עם לסרטן הארטמיה franciscana</em

Published: April 14, 2012
doi:

Summary

מחקר זה עוסק בפיתוח סטנדרטיזציה של פרוטוקול מתודולוגית חשוב לקבוע לטווח ארוך (14 יום) רעילות קטלני המופעל על ידי חומרים כימיים, שפכים תעשייתיים או ביוב דגימות סביבתיות נוזליים על לסרטן מים מלוחים,<em> הארטמיה franciscana</em>.

Abstract

פעילויות המחקר שלנו למקד את השימוש בשיטות ביולוגיות לצורך הערכה של איכות הסביבה, תוך התייחסות מיוחדת מים מלוחים / מים מליחים ומשקעים. הבחירה של אינדיקטורים ביולוגיים חייב להיות מבוסס על ידע מדעי אמין, אולי, על זמינותם של נהלים אחידים. במאמר זה, אנו מציגים פרוטוקול סטנדרטי המשמש לסרטן ימית הארטמיה להעריך את רעילות של כימיקלים ו / או של מטריצות הסביבה הימית. המדענים מציעים כי ארטמיה (הארטמיה) הוא המועמד המתאים לפיתוח המבדק תקן ניצול ברחבי העולם. מספר מאמרים פורסמו על ההשפעות הרעילות של כימיקלים שונים על toxicants ארטמיה (הארטמיה). היתרון הגדול של לסרטן זה ללימודים רעילות הוא הזמינות הכללית של ציסטות יבשים אלה יכולים לשמש מיד בבדיקת וטיפוח קשה לא דרש <sup> 1,2. ציסטה על בסיס מבחני רעילות הם זולים, זמינים באופן רציף, פשוטה ואמינה והם ולכן התשובה חשובה לצרכים שגרתיים של ההקרנה רעילות, דרישות ניטור תעשייתיים או למטרות רגולטוריות 3. השיטה המוצעת כרוך בתמותה כנקודת הסיום. המספרים של ניצולי נספרו ואחוז מקרי מוות חושבו. הזחלים נחשבו מתים אם הם לא מפגינים כל תנועה פנימית או חיצונית במהלך כמה שניות של התבוננות 4. הליך זה היה בדיקה סטנדרטית חומר ייחוס (Dodecyl נתרן גופרתי), כמה תוצאות מדווחים עבודה זו. מאמר זה מלווה בסרטון המתאר את ביצוע בדיקות רעילות פרוצדורלי, מראה את כל השלבים הקשורים בפרוטוקול.

Protocol

1. שיטה סטנדרטית בדיקה שלנו כרוך בחשיפת הזחלים הארטמיה למרווח של ריכוזי חומר או מדגם הבדיקה לצורך קביעת ריכוז או דילול לרמות שיגרמו למוות של 50% של האורגניזמים (LC 50) נחשף במהלך 14 יום ועמידה בתנאים המוגדרים בשיטה זו. אם יש צ?…

Discussion

הארטמיה הוא אחד היצורים הבדיקה הערך הרב ביותר עבור בדיקות ecotoxicity מחקר שנעשה עד כה מאפשר לנו לקבוע כי אפשר לקיים מספר אפשרויות הקשורות לשימוש הארטמיה ב טוקסיקולוגיה Ecotoxicology. המאפיינים שהופכים את האורגניזם למין מתאימים bioassays הם: פיזור גיאוגרפי רחב, הסתגלות גב…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

הופק על ידי Loredana Manfra של מכון המחקר להגנה על הסביבה (Ispra-מחלקת ניטור איכות הסביבה) ו פדריקה Savorelli של הסוכנות האזורית לאיכות הסביבה (Emilia-Romagna, איטליה).

התייחסות חברי עבור קבוצת המשנה העבודה על הארטמיה לסרטן בקבוצת שיטות ביולוגיות – מים מלוחים / מים מליחים ומשקעים של ועדת UNICHIM על איכות המים (המכון הפעלה תקינה טכנית במגזר כימי).

Videography ועריכה על ידי מרקו Pisapia של Ispra (יחידת האינטרנט).

תיאום הפקה של אנה מריה קיקרו אריקה Magaletti של Ispra (מחלקת ניטור איכות הסביבה).

אנו רוצים להודות הסוכנות האזורית לאיכות הסביבה של אמיליה, רומניה, פררה סניף, קבוצת שיטות ביולוגיות – מים מלוחים / מליחיםמים ומשקעים של ועדת UNICHIM על איכות המים לוסיאנה Migliore, Tor Vergata האוניברסיטה (רומא) על שיתוף הפעולה, Rossella Boscolo ו מאסימו Gabellini של Ispra (החוג למניעת הקלה של השפעות) על התמיכה הכספית, פאביו Matassa של לונדון בית הספר לשפות ברומא על התמיכה הלשונית שלהם.

Materials

Produced by Loredana Manfra of Institute for environmental protection and research (ISPRA-Department of Environmental Quality Monitoring) and Federica Savorelli of Regional Agency for Environmental Protection (Emilia-Romagna, Italy).

Reference Members for the sub-working Group on the Artemia crustacean within the Biological Methods Group – Saltwater/Brackish Water and Sediment of the UNICHIM Commission on Water Quality (the institute for technical standardization operating in the chemical sector).

Videography and editing by Marco Pisapia of ISPRA (Scientific Advisory and Documentation Services).

Production Coordination by Anna Maria Cicero and Erika Magaletti of ISPRA (Department of Environmental Quality Monitoring).

We would like to thank the Regional Agency for Environmental Protection of Emilia-Romagna, Ferrara Branch and the Biological Methods Group – Saltwater /Brackish Water and Sediment of the UNICHIM Commission on Water Quality for their cooperation; Rossella Boscolo and Massimo Gabellini of ISPRA (Department of Prevention and Mitigation of Impacts) for their financial support; and the London School of Languages in Rome for their linguistic support.

Name of the reagent Company Product number
Sodium Dodecyl Sulfate Sigma-Aldrich L4390

Appendix

The algal media has to be prepared using analytical quality reagents.

A liter of nutrient solution is prepared by dissolving 300 g of NaNO3, 30 g of KH2PO4 and 20 g of NH4Cl in distilled water.

Four initial solutions (A, B, C, D) of minerals are prepared as follows:

  • A liter of solution “A” containing 30 g of ZnSO4 H2O, 25 g of CuSO4 5 H2O, 30 g of CoSO4 7 H2O and 20 g of MnSO4 H2O in distilled water;
  • A liter of solution “B” containing 50 g of FeCl3 •6 H2O in distilled water;
  • A liter of solution “C” containing 25 g of Na2MoO4 •2 H2O in distilled water;
  • A liter of solution “D” containing 50 g di Na2EDTA •2 H2O in distilled water.

A liter of a final solution of minerals (solution “E”) is obtained adding aliquots of the above-mentioned solutions to distilled water. The following order of addition is recommended: 100 ml of solution “D”, 10 ml of solution “C”, 10 ml of solution “B” and 10 ml of solution “A”.

Three initial solutions (F, G, H) of vitamins are prepared as follows:

  • A liter of solution “F” containing 100 mg of biotin in distilled water;
  • A liter of solution “G” containing 10 g of thiamine in distilled water;
  • A liter of solution “H” containing 100 mg of cobalamin in distilled water.

A liter of a final solution of vitamins (solution “I”) is obtained adding 10 ml of the three initial solutions to distilled water.

A liter of the algal media is prepared by dissolving 1 ml of the nutrient solution, 1 ml of the mineral final solution (solution “E”) and 1 ml of the vitamin final solution (solution “I”) in seawater. This latter may be obtained by dissolving recognized analytical quality reagents or a commercially available formulation in distilled or de-ionized water. Salt blends for creating the ideal saltwater are commercially available, e.g. the Instant Ocean mixtures. It is recommended the using of a seawater with salinity of 30 (±2) PSU and temperature of 20 (±1) °C.

References

  1. Togulga, M. The Short-Term Toxicity of Two Toxicants to Artemia Nauplii. Tr. J. of Zoology. 22, 259-266 (1998).
  2. Persoone, G., Wells, P. G., Sorgeloos, P. Artemia in aquatic toxicology: a review. Artemia Research and its Applications. Morphology, Genetics, Strain characterization Toxicology. , 259-275 (1987).
  3. Nunes, B. S., Carvalho, F. D., Guilhermino, L. M., Stappen, G. V. a. n. Use of the genus Artemia in ecotoxicity testing. Envir. Poll. 144, 453-462 (2006).
  4. APAT IRSA-CNR. . Metodi analitici per le acque Manuali e Linee guida 29/2003. Terzo Metodo, 8060 (2003).
  5. Sorgellos, P., Wielen, C. R. e. m. i. c. h. e. -. V. a. n. D. e. r., Persoone, G. The use of Artemia nauplii for toxicity tests – a critical analysis. Ecotox. Env. Saf. 2, 249-255 (1978).
  6. Savorelli, F., Palazzi, D., Gorbi, G., Invidia, M., Sei, S., Magaletti, E., Manfra, L., Gelli, F. Set up of a standard methodology for 14-day bioassay on Artemia franciscana and A. parthenogenetica. Biol. Amb. 21, 27-36 (2007).
  7. Brix, K. V., Cardwell, R. D., Adams, W. J. Chronic toxicity of arsenic to the Great Salt Lake brine shrimp, Artemia franciscana. Ecotox. Environ. Saf. 54, 169-175 (2003).
  8. Brix, K. V., Deforest, D. K., Cardwell, R. D., Adams, W. J. Derivation of a chronic site-specific water quality standard for selenium in the Great Salt Lake, Utah, USA. Environ. Toxicol. Chem. 23, 606-612 (2004).
  9. . Qualitá dell’acqua – Determinazione della tossicitá letale a 14 giorni con Artemia franciscana (Crustacea: Anostraca). Commissione UNICHIM “Qualitá dell’acqua” Gruppo di Lavoro “Metodi Biologici” Sottogruppo “Acque salate/salmastre e sedimenti”. , (2010).
  10. Varo, I., Navarro, J. C., Amat, F., Guilhermino, L. Characterisation of cholinesterases and evaluation of the inhibitory potential of chlorpyrifos and dichlorvos to Artemia salina and Artemia parthenogenetica. Chem. 48, 563-569 (2002).
check_url/kr/3790?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Manfra, L., Savorelli, F., Pisapia, M., Magaletti, E., Cicero, A. M. Long-term Lethal Toxicity Test with the Crustacean Artemia franciscana. J. Vis. Exp. (62), e3790, doi:10.3791/3790 (2012).

View Video