Summary
본 프로토콜은 상부 경추 신경절을 식별하고 절제함으로써 아드레날린성 신경 분포를 절제하는 마우스 모델을 설명합니다.
Abstract
교감 신경계가 암 진행에 중요한 역할을 한다는 증거가 늘어나고 있습니다. 아드레날린성 신경 분포는 침샘 분비, 일주기 리듬, 황반 변성, 면역 기능 및 심장 생리학을 조절합니다. 쥐 외과적 교감신경 절제술은 반복적인 약리학적 개입 및 관련 부작용의 필요성을 피하면서 완전하고 일방적인 아드레날린 절제를 허용함으로써 아드레날린 신경 분포의 효과를 연구하는 방법입니다. 그러나 생쥐의 외과적 교감신경 절제술은 상부 경추 신경절의 크기가 작기 때문에 기술적으로 어렵습니다. 본 연구는 상부 경추 신경절을 확실하게 식별하고 절제하여 교감신경계를 절제하는 수술 기법을 기술한다. 신경절의 성공적인 식별 및 제거는 형질전환 마우스를 사용하여 형광 교감신경절을 영상화하고, 절제 후 호너 증후군을 식별하고, 절제된 신경절에서 아드레날린 마커를 염색하고, 교감신경 절제술 후 표적 기관에서 감소된 아드레날린 면역형광을 관찰함으로써 검증됩니다. 이 모델은 암 진행뿐만 아니라 교감 신경계에 의해 조절되는 다른 생리적 과정에 대한 향후 연구를 가능하게 합니다.
Introduction
여러 연구에서 종양 미세 환경의 신경이 종양 진행을 지원하는 데 적극적인 역할을 한다고 보고했습니다. 아드레날린성 교감신경의 절제는 생체 내에서 전립선암과 위암의 종양 발달 및 파종을 저해하는 것으로 나타났으며1,2,3, 아드레날린성 수용체의 약리학적 차단은 두경부암의 종양 성장을 억제한다 4. 교감신경 침범은 또한 췌장암, 자궁경부암 및 기저 세포 암종 진행에서 설명되었습니다 5,6,7.
교감 신경계 내에서 상부 경추 신경절(SCG)은 머리를 자극하는 교감신경 줄기의 유일한 신경절입니다. SCG는 타액 분비 및 일주기 리듬과 같은 다양한 생리적 기능을 조절하고 자궁 경부 림프절을 직접 자극합니다 8,9,10. SCG는 또한 황반변성(macular degeneration)11 및 대동맥 박리(aortic dissection)12의 진행과 같은 병리학적 과정과 관련이 있다. 또한, SCG의 절제술은 허혈 재관류로 유발된 급성 신장 손상을 악화시키고13 또한 쥐14의 장내 미생물군을 변화시키는 것으로 보고되었다.
마우스 모델에서 SCG의 완전한 절제는 암 및 자율 신경계 연구를 가능하게 하는 귀중한 실험 기술을 나타냅니다. 많은 연구에서 약리학적 아드레날린 수용체 차단을 아드레날린 절제술로 활용했지만15,16,17,18,19,20, 외과적 절제술은 반복적인 약리학적 개입 및 관련 부작용의 필요성을 피하면서 완전하고 일방적인 아드레날린 절제를 가능하게 한다 21,22,23.
SCG의 외과적 절제술은 쥐24마리에서 설명되었으며, 우수한 경추 신경절 절제술(SCGx)의 효과를 연구하는 대부분의 보고서에서는 쥐 모델을 사용했습니다. 쥐 모델과 비교할 때 SCGx는 SCG의 크기가 작기 때문에 마우스에서 기술적으로 더 까다롭습니다. 그러나 마우스는 비교적 다루기 쉽고 비용 효율적이며 유전자 조작에 더 적합합니다. Garcia et al. 생쥐에서 SCGx를 보고한 최초의 사람 중 하나였으며 인슐린 방출에 영향을 미치는 것으로 밝혀졌습니다25. 보다 최근에, Ziegler et al. 쥐24,26에 대해 기술된 공개된 기술에 기초하여 마우스에서 SCGx를 기술하였다. 이 기사와 다른 기사에서는 총경동맥(CCA)을 먼저 식별하고 해부한 다음 CCA21,22,27,28의 분기점에서 SCG를 제거하는 방법을 설명합니다. 이 기사에서는 CCA의 해부를 피하는 덜 침습적이고 안전한 기술에 대해 설명하여 이 절차의 가장 심각한 합병증인 CCA 손상으로 인한 출혈을 최소화합니다.
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Protocol
여기에 설명된 동물 절차는 메모리얼 슬론 케터링 암 센터(Memorial Sloan Kettering Cancer Center)의 기관 동물 관리 및 사용 위원회(Institutional Animal Care and Use Committee)의 승인을 받았습니다. 8주령의 수컷 및 암컷 NSG 마우스를 여기에 사용하였다. 동물들은 상업적 공급원으로부터 입수하였다 ( 재료의 표 참조). 기구는 멸균되고, 수술 작업 표면은 소독되고, 동물의 피부 표면은 소독되며, 외과 의사는 수술 내내 멸균 장갑을 착용합니다.
1. 마우스의 준비 및 수술 전 설정
- 수술 전날, 유도 챔버(폭 3.75 x 깊이 9 x 높이 3.75, 재료 표 참조)에서 2% 이소플루란으로 마우스를 마취합니다.
참고: 마취 수술면은 일반적으로 개별 동물에 따라 3-5분 내에 이루어집니다. 발가락 꼬집음으로 마취의 적절성을 평가하고 이소플루란 비율을 적절하게 높입니다.- 목의 복부 측면을 면도하거나 제조업체의 지침에 따라 화학 제모제를 사용하십시오 ( 재료 표 참조).
- 수술 당일, 유도 챔버에서 2% 이소플루란으로 마우스를 마취한다. 발가락 꼬집음으로 마취의 적절성을 평가하고 이소플루란 비율을 적절하게 높입니다.
- 선제적 전신 진통을 위해 멜록시캄 2mg/kg을 피하 투여합니다. 국소 안과 연고( 재료 표 참조)를 바르면 안구 손상과 마취 시 건조를 예방할 수 있습니다.
- 마우스를 등쪽의 해부 현미경 아래에 놓고 열 지원을 제공합니다. 정밀 기화기와 노즈 콘을 사용하여 2%-2.5% 이소플루란으로 흡입 마취를 유지하십시오. 저자극성 테이프로 양쪽 앞다리를 부드럽게 고정합니다( 재료 표 참조).
- 면도한 목의 복부 부분을 포비돈 요오드로 닦은 다음 70% 알코올로 닦습니다. 이 과정을 두 번 더 반복하십시오. 수술 부위에 느슨한 머리카락이 없는지 확인하십시오.
알림: 한 쌍의 짧은 곡선 집게를 사용할 수도 있습니다. 이 제한된 공간에서 적절하게 작업하기 위해 한 쌍의 미세 또는 안과용 집게를 사용해야 합니다. 기관 지침에 따라 추가 수술 전 설정이 포함될 수 있습니다.
2. 해부
- 턱 아래 약 1.5mm에서 흉골 노치 위 2mm까지 작은 가위를 사용하여 목의 복부 부분에 2cm 정중선 피부 절개를 합니다.
- 집게로 피부 가장자리를 옆으로 수축시켜 밑에 있는 근막과 턱밑 침샘을 노출시킵니다. 양쪽 피부 아래에 뾰족한 가위를 삽입하고 펴서 밑에 있는 근막에서 피부를 분리합니다. 집게로 꼬리 아래로 턱밑 땀샘을 당겨 밑에 있는 근육을 드러냅니다.
- digastric muscle과 omohyoid muscle의 뒤쪽 배의 교차점을 찾습니다 (그림 1A, 검은 색 원). 전방 경정맥은 omohyoid 근육에 세로와 측면으로 달리는 것을 볼 수 있습니다.
참고: omohyoid 근육은 기관을 세로로 덮고 있는 반면, digastric 근육은 기관의 두개골 측면에 가로로 놓여 있습니다(그림 1C).- 전방 경정맥 측면의 이 접합부에 45° 각진 집게의 끝을 삽입하여 위에 있는 깊은 경추 근막에 구멍을 뚫고 퍼뜨립니다.
- 2.3.1단계에서 만든 이 창을 45° 각도의 집게로 열어 둡니다. 다른 손에 한 쌍의 구부러진 집게로 퍼짐 기동을 수행하여 이 개구부를 더 넓게 확장하십시오.
3. 신경절의 확인 및 절제술
- 공개된 공간의 측벽에서 상부 경추 신경절(SCG)을 찾습니다. 그것은 둥글고 진주 같은 조직으로 나타납니다.
참고: SCG가 식별되지 않으면 이 공간의 조직을 더 측면으로 그리고 상부하게 검사해야 합니다. SCG는 이 부위에 종종 존재하는 지방과 쉽게 혼동될 수 있습니다. 지방은 약간 노란색을 띠는 반면, SCG는 진주색으로 보입니다. - 다른 손으로 집게로 개구부를 유지하면서 집게로 SCG를 부드럽게 잡고 개구부에서 당겨 더 잘 볼 수 있도록 합니다.
- SCG가 시야에 들어오면 SCG가 여전히 주변 조직에 부착되어 있는 SCG의 측면 기저부를 잡습니다. 다른 손을 사용하여 SCG를 복부 및 꼬리 방향으로 천천히 부드럽게 집어넣습니다.
- SCG를 여러 번 수축시켜 신경절을 조금씩 점차적으로 찢습니다. 이 기동 중에 신경절을 온전하게 유지하여 잔여 신경절 잔해가 남지 않도록 합니다.
알림: 이 단계에서 출혈이 발생할 수 있으므로 신경절을 부드럽게 당깁니다. 경미한 출혈이 발생하면 산화된 재생 셀룰로오스 또는 작은 멸균 거즈 조각을 사용하여 30초에서 1분 동안 개구부에 압력을 유지합니다. 그런 다음 천천히 거즈를 들어 올려 재평가하십시오. 출혈이 멈출 때까지 필요에 따라 개구부에 압력을 가하는 과정을 반복하십시오.
- SCG를 여러 번 수축시켜 신경절을 조금씩 점차적으로 찢습니다. 이 기동 중에 신경절을 온전하게 유지하여 잔여 신경절 잔해가 남지 않도록 합니다.
- 신경절 기저부를 잡고 있는 다른 집게를 천천히 풉니다. 혈액 풀링을 찾아 출혈을 확인하십시오.
알림: 이때 약간의 진물이 나오는 것은 정상입니다. 시술을 종료하고 완료하기 전에 지속적이거나 심각한 출혈이 없는지 모니터링하고 확인하십시오. 이 경우 3.3.1 단계에 설명된 대로 개구부에 압력을 가하십시오. - 침샘을 정상적인 해부학적 위치로 되돌립니다. 간단한 중단 된 5-0 나일론 봉합사를 사용하여 피부를 근사화하고 닫습니다 ( 재료 표 참조).
- 마우스를 깨끗한 케이지에 단독으로 넣어 마취에서 완전히 회복할 수 있도록 합니다.
알림: 마우스가 마취에서 완전히 깨어나는 데 5-15분이 소요될 수 있습니다. 흉골 누운 자세를 유지하기에 충분한 의식을 회복할 때까지 마우스를 방치하지 마십시오. 완전히 회복 될 때까지 마우스를 다른 마우스와 함께 케이지에 넣지 마십시오. 72시간 동안 최소 24시간마다 한 번씩 수술 후 회복을 위해 마우스를 평가합니다.
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Representative Results
이 프로토콜은 마우스 모델에서 SCG의 외과적 제거를 설명합니다. 그림 2 는 CCA, 전경정맥 및 SCG를 포함한 해부학적 랜드마크를 보여줍니다. 해부(그림 2A)를 통해 우측 전방 경정맥이 기관의 측면 경계를 따라 흐르는 것을 볼 수 있습니다. 전경정맥보다 더 깊숙이 위치하기 때문에 왼쪽 CCA와 내경동맥(ICA)과 외경동맥(ECA)으로의 분기점은 정맥 측면에서만 희미하게 보입니다. NSG에서 이를 검사할 때. 형광 현미경 하에서 적색 형광 뉴런을 갖는 B6-P0TdTomato 형질전환 마우스(슈반 세포가 형광 적색, 미공개 연구인 P0-Cre TdTomato 마우스), 형광 미주 신경은 CCA에 측면으로 흐르는 것을 볼 수 있으며, 형광 SCG는 전방 경정맥 측면의 CCA의 분기점에서 볼 수 있습니다(그림 2B).
정상 마우스와 형질전환 마우스에서 SCG를 절제한 후, 절제된 조직은 아드레날린성 신경에 대한 마커인 티로신 하이드록실라제(TH)에 대한 면역형광 염색을 통해 비형광 SCG 대조군(도 3A) 및 면역형광 염색을 통해 확인하였다(도 3B).
수술이 올바르게 수행되면 마우스는 완전한 의식을 회복하는 즉시 수술 직후 동측 호너 증후군을 앓게 된다24. 눈꺼풀의 처짐인 안검하수가 관찰되었는데, 이는 호너 증후군의 징후입니다(그림 4B).
턱밑 침샘은 SCG에 의해 신경이 분포되는 조직 중 하나입니다. 성공적인 SCGx를 검증하기 위해 오른쪽 SCGx에 이어 오른쪽 턱밑 침샘에서 TH에 대한 면역형광 염색을 수행하고 TH 신경 염색이 없는 상태에서 아드레날린 신호 전달의 성공적인 제거를 확인했습니다(점선 오른쪽, 그림 5A). 대조적으로, 좌측 대조군 턱밑샘(SCGx 없음)은 아드레날린 투입과 온전한 TH 신경 염색을 유지했습니다(점선의 왼쪽, 그림 5A). 이러한 결과는 정량화에 의해 확인되었습니다(그림 5B). 이들 조직에서 노르에피네프린 13,30,31의 ELISA 정량화는 대조군 가짜 수술 측과 대조적으로 SCGx 측의 턱밑샘에서 노르에피네프린 발현의 현저한 감소를 추가로 확인했습니다(그림 6). 둘 다에 대한 정량화는 짝을 이루지 않은 양측 스튜던트 t-테스트로 분석되었습니다.
그림 1: 왼쪽 전방 경정맥은 해부학적 랜드마크 역할을 합니다. (A) 왼쪽 전방 경정맥(파란색 화살표)은 세로로 그리고 오모히오이드 근육의 측면 가장자리를 따라 흐르는 것을 볼 수 있습니다. digastric 근육과 omohyoid 근육의 뒤쪽 배꼽의 각도 사이의 깊은 자궁 경부 근막을 뚫을 때, 피어싱은 또한 전방 경정맥 (검은 색 원)의 측면에 있어야합니다. (B) 깊은 자궁 경부 근막이 약간 늘어나면 미주 신경 (흰색 화살표)과 분기가있는 총 경동맥 (빨간색 화살표)도 볼 수 있습니다. (C) (B)의 양식화된 그림. 스케일 바 = 100 μm. 약어: M = 근육. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 2: SCG 및 형광 뉴런이 있는 형질전환 마우스의 해부학적 랜드마크와의 관계. (A) 적색 형광 뉴런이 있는 형질전환 마우스의 해부, 오른쪽 총경동맥(분기점을 가리키는 빨간색 화살표)과 전방 경정맥을 보여줍니다. 총경동맥은 외경동맥(ECA)과 내경동맥(ICA)으로 갈라집니다. 노란색 화살표는 총경동맥으로 측면으로 흐르는 미주 신경을 가리킵니다. 총경동맥과 미주신경 사이의 거리는 이 이미지의 모든 구조를 포착하기 위해 마우스의 머리를 돌릴 때 여기에서 더 넓게 나타납니다. (B) 형광 이미징으로 검사한 동일한 해부. 미주 신경 (노란색 화살표)은 적색 형광을 띠고 다시 총 경동맥 (분기점을 가리키는 빨간색 화살표)으로 측면으로 달리는 것을 볼 수 있습니다. 형광 SCG는 경동맥 (노란색 화살촉)의 분기점에 있습니다. 전방 경정맥 (파란색 화살표)은 총 경동맥 내측으로 이어집니다. 이러한 구조 위에 있는 깊은 경추 근막은 반짝이는 반사로 볼 수 있습니다. 스케일 바 = 1mm. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 3: 절제된 신경절의 현미경 이미지. (A) 형광 현미경으로 절제된 상부 경추 신경절. 왼쪽은 일반 마우스에서 절제된 SCG를 보여주며, 비형광 대조군 역할을 합니다. 오른쪽은 적색 형광 뉴런을 가진 형질전환 마우스에서 절제된 형광 SCG를 보여줍니다. 스케일 바 = 500μm. (B) 절제된 적색 형광 신경절(P0)에서 아드레날린성 신경의 표지자인 티로신 하이드록실라제(TH)에 대한 면역형광 염색. 스케일 바 = 100 μm. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 4: SCGx 후 호너 증후군의 발달. (A) SCGx 이전의 정상 마우스. (B) 호너 증후군의 징후인 동측 SCGx에 이어 눈꺼풀의 처짐인 눈꺼풀 처짐(검은색 화살표)의 발달. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 5 : SCGx 대 가짜 수술 후 표적 조직에서 아드레날린 성 마커에 대한 면역 형광 및 해당 H & E 염색. (A) 왼쪽, SCGx 또는 가짜 수술 후 턱밑 침샘의 티로신 하이드록실라제(TH)에 대한 면역형광 염색. 오른쪽, 동일한 조직의 해당 H & E 염색. 스케일 바 = 200 μm. (B) TH 염색의 정량화. 데이터는 평균 ± SEM을 나타냅니다. unpaired, two-tailed Student's t-test에 의한 통계 분석, p < 0.0001. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 6: SCGx 대 가짜 수술 후 타액선에서 노르에피네프린의 ELISA 정량화. 데이터는 평균 ± SEM을 나타냅니다. 쌍을 이루지 않은 양측 스튜던트 t-검정에 의한 통계 분석, p < 0.0001. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
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Discussion
이 프로토콜은 SCG 입력의 외과적 편측 절제를 위한 마우스 모델을 설명합니다. 이 기술을 사용하면 다양한 환경에서 아드레날린 성 신경 분포의 효과를 연구 할 수 있습니다. 또한, 절제된 교감신경 신경절은 시험관내 실험(in vitro experiments)을 위한 3D 매트리겔 배양(3D matrigel culture)에서도 성장할 수 있다 30.
SCGx와 관련된 연구는 해부학적 구조가 더 커서 해부학적 시각화 및 해부가 더 쉽기 때문에 대부분 쥐에서 수행되었습니다. 마우스의 SCGx는 이전에 Ziegler et al.26에 의해 기술되었고 다른 연구21,22,27,28에서 간략하게 보고되었지만, 이 기술은 SCG의 절제 전에 CCA가 노출되고 해부되는 쥐에서 사용된 것을 기반으로 했습니다. 쥐 모델과 달리 생쥐의 CCA는 더 작고 얇아서 해부가 더 어려워지고 따라서 CCA로 인한 주요 출혈의 심각한 합병증에 더 취약합니다. 또한, CCA의 노출은 흉쇄유돌근의 변위뿐만 아니라 침샘의 해부 및 측면 회전을 포함하여 보다 광범위한 조작을 필요로 한다26. 대조적으로, 본 방법은 CCA 대신 전방 경정맥을 해부학적 랜드마크로 사용합니다. CCA와 비교하여 전방 경정맥은 더 표면적으로 위치하고 더 두개골로 확장됩니다(그림 2A). 이것은 몇 가지 이점을 제공합니다. 첫째, 이 랜드마크는 침샘과 흉쇄유돌근의 해부 및 변위 없이 더 쉽게 볼 수 있어 수술이 덜 침습적입니다. 따라서 이 프로토콜은 타액을 약간만 내리면 됩니다(2.2단계). 최소한의 해부는 또한 동물의 수술 시간과 마취 기간을 단축시킵니다. 또한 CCA의 광범위한 해부를 피함으로써 CCA가 손상될 가능성을 최소화하여 심각한 경우 중대하고 치명적인 출혈로 이어질 수 있습니다. SCG가 CCA의 분기점에 위치하기 때문에 CCA의 조작은 불가피하지만, CCA 바로 위에 있는 근막을 여는 대신 전방 경정맥 옆의 피어싱을 통해 후내측으로 이 영역에 접근함으로써 이 프로토콜은 이 주요 동맥과의 접촉을 최소화하여 손상 위험을 최소화합니다.
이 수술을 수행할 때 두 가지 주요 문제에 직면합니다. 첫 번째는 SCG의 성공적인 식별이며, 특히 마우스 모델에서 해부학적 랜드마크의 크기가 매우 작고 신경절 자체가 있다는 점을 감안할 때 더욱 그렇습니다. 따라서 랜드마크를 주의 깊게 해부하고 식별하는 것이 필수적입니다. 2.3단계에서는 각진 집게를 삽입하여 이위 및 오모설근의 후배 각도로 깊은 경추 근막을 뚫어야 합니다. 이 단계에서 전방 경정맥은 일반적으로 omohyoid 근육의 측면 가장자리를 따라 달리는 것으로 보이며 삽입 지점까지 내측을 유지해야 합니다(그림 1). 이것은 중요한 랜드 마크이며 SCG를 찾기 위해 올바른 공간으로 들어가는 데 도움이 될 것입니다. 이 공간의 측면 영역에서 SCG가 보이지 않으면 조직을 더 측면으로 그리고 우월하게 탐색해야 합니다. 이 절개 동안 경동맥초는 주변 조직의 출혈을 방지하고 이 구조의 내측 SCG를 식별하는 데 도움이 되도록 시야 측면으로 시각화됩니다.
이 절차의 두 번째 주요 과제는 출혈 위험을 관리하는 것입니다. SCG에 인접한 CCA, 외부 경동맥 및 내부 경정맥을 포함하여 여러 중요한 혈관 구조가 있습니다. 우리의 경험에 따르면 출혈이 발생하면 수술 후가 아닌 수술 중에 발생합니다. 3.4단계에서 집게를 푸는 단계에서 출혈이 발생할 수 있습니다. 혈관 손상은 주변 혈관과 조직에서 신경절을 벗겨내고 부드럽게 찢으려고 할 때 발생할 가능성이 가장 높습니다. 활동성 출혈은 한 쌍의 겸자가 해당 부위의 혈관 근처에 고정되어 있기 때문에 즉시 보이지 않을 수 있습니다. 따라서 겸자가 풀리면 출혈을 확인할 수 있으며, 신경절을 제거한 후 해당 부위를 주의 깊게 검사하는 것이 중요합니다. 드물게 주요 혈관의 파열로 인한 출혈의 경우, 출혈 속도가 빠르기 때문에 해당 부위에 압력을 가하는 것은 무의미합니다. 이 경우 수술을 종료하고 마우스를 안락사시켜야합니다.
SCG 식별의 어려움과 가능한 출혈 합병증을 감안할 때, 실험적 생존 수술을 수행하기 전에 해부학에 익숙해지기 위해 먼저 사체 마우스에 대한 SCG 해부 및 제거를 연습하는 것이 좋습니다.
이 방법은 외과 의사의 손에도 영향을 받을 수 있습니다. 절차는 외과 의사의 지배적 인 손과 같은쪽에서 수행하기가 더 쉽습니다. 예를 들어, 마우스의 오른쪽에서 SCGx를 수행할 때 외과의의 왼손은 신경절의 기저부를 잡고 오른손은 신경절을 벗겨내는 데 사용하므로 수술에는 오른손으로 더 많은 기교가 필요합니다. 양측 SCGx를 수행하는 경우 외과의의 비우세 쪽에서 수행하기 위해 더 많은 시간이 소요되고 더 많은 훈련이 필요할 수 있습니다.
쥐 모델에서 SCGx의 이 수술 기술은 종양학적 및 생리학적 환경 모두에서 교감 신경계의 영향을 조사하는 향후 실험 연구를 가능하게 합니다. 마우스 모델은 저렴한 비용, 취급 용이성, 유전자 조작에 대한 편의성 등 다른 생체 내 모델에 비해 여러 가지 장점이 있어 보다 강력한 실험 모델을 만들 수 있습니다.
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Disclosures
저자는 공개 할 것이 없습니다.
Acknowledgments
Q. W.는 NIH T32CA009685의 지원을 받았습니다. RJW는 NIH R01CA219534의 지원을 받았습니다. 메모리얼 슬론 케터링 암 센터 핵심 시설은 NIH P30CA008748의 지원을 받았습니다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Anti-Tyrosine Hydroxylase Antibody | EMD Millipore | AB152 | |
| Artificial Tears Lubricant Ophthalmic Ointment | Akorn | 59399-162-35 | |
| Curity 2 x 2 Inch Gauze Sponge 8 Ply, Sterile | Covidien | 1806 | |
| Derf Needle Holder | Thomas Scientific | 1177K00 | |
| Dissecting Microscope | |||
| Dumont #5/45 Forceps | Fine Science Tools | 11251-35 | |
| Dumont #7b Forceps | Fine Science Tools | 11270-20 | |
| ETHILON Nylon Suture | Ethicon | 698H | |
| Fine Scissors - ToughCut | Fine Science Tools | 14058-09 | |
| Hypoallergenic Surgical Tape | 3M Blenderm | 70200419342 | |
| Induction Chamber, 2 Liter | VetEquip | 941444 | |
| Isoflurane | Baxter | 1001936060 | |
| Nair | Church & Dwight Co., Inc | 40002957 | chemical hair removing agent |
| NORADRENALINE RESEARCH ELISA | Labor Diagnostika Nord (Rocky Mountain Diagnostics) | BA E-5200 | |
| NSG Mouse | Jackson Laboratory | JAX:005557 | |
| Povidone-Iodine Swabstick | PDI | S41350 | |
| Webcol Alcohol Preps | Covidien | 5110 |
References
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